本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及一種基于甘油二酯固體脂質(zhì)納米粒的藥物載體及其制備方法。

背景技術(shù)：

固體脂質(zhì)納米粒（solidlipidnanoparticles,sln）是20世紀90年代發(fā)展起來的新一代給藥系統(tǒng)，是指以固態(tài)天然或合成的類脂為載體所形成的粒徑在10～1000nm的固體膠粒給藥系統(tǒng)。固體脂質(zhì)納米粒所采用的脂質(zhì)載體具有毒性低、生物相容性好、生物可降解的特點，因此有著巨大的應(yīng)用價值。

常用的固體脂質(zhì)納米粒的脂質(zhì)載體為三同酸甘油酯、甘油單酯、脂肪酸等，其中以甘油三酯最為常見。但是，隨著人們健康意識的提高，甘油三酯導(dǎo)致的疾病性風(fēng)險愈發(fā)被重視，尋找甘油三酯的替代脂質(zhì)具有迫切的研究價值和應(yīng)用價值；另一方面，甘油三酯、甘油單酯、脂肪酸等一元酸脂質(zhì)在形成固體脂質(zhì)納米粒不會有晶格缺陷，容易發(fā)生藥物滲透和載藥量低的現(xiàn)象。因此，利用更加健康安全，且脂肪酸種類多樣的脂質(zhì)作為固體脂質(zhì)納米粒的載體具有非常重要的應(yīng)用價值和研究意義。

甘油二酯（diacylglycerol,dag），是由兩分子脂肪酸與一分子甘油酯化后得到的結(jié)構(gòu)脂質(zhì)，根據(jù)脂肪酸與甘油羥基結(jié)合的位置不同，可分為1,3-甘油二酯和1,2-甘油二酯，其中1,3-甘油二酯更加穩(wěn)定。甘油二酯在外觀、風(fēng)味和營養(yǎng)價值方面與甘油三酯差異不大，然而由于甘油二酯在結(jié)構(gòu)上的差異導(dǎo)致這兩種脂質(zhì)在人體內(nèi)的代謝方式存在明顯差異。研究發(fā)現(xiàn)，人體在攝取富含甘油二酯的脂質(zhì)后體重及體內(nèi)脂肪含量會明顯減少，同時，甘油二酯還具有降血脂、防止內(nèi)臟脂肪堆積、緩解糖尿病及其并發(fā)癥等眾多生理功能。此外，甘油二酯可方便的引入兩種不同結(jié)構(gòu)的脂肪酸，在形成固體脂質(zhì)納米粒的時候可形成更多的晶格缺陷，進而對藥物具有更好的包埋效率和包埋穩(wěn)定性。

目前還未見基于甘油二酯固體脂質(zhì)納米粒的報道，鑒于此，我們發(fā)明了基于更加健康安全的甘油二酯作為脂質(zhì)載體制備固體脂質(zhì)納米粒的方法。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為了克服常見固體脂質(zhì)納米粒的脂質(zhì)載體所存在的健康問題和穩(wěn)定性問題，我們發(fā)明了一種基于甘油二酯為脂質(zhì)載體的固體脂質(zhì)納米粒的制備方法。通過此方法，可將具有優(yōu)異生理功能的甘油二酯引入到固體脂質(zhì)納米粒的應(yīng)用中。

該制備方法包括以下步驟：

a、稱取適量甘油二酯加熱至設(shè)定溫度t使其完全融化形成油相或?qū)⑦m量水溶性差的乳化劑與甘油二酯加熱形成液態(tài)油相；

b、稱取適量乳化劑和蒸餾水混合形成水相，并加熱至溫度t；

c、將水相及油相在相同的溫度t下攪拌混合5～10分鐘形成粗乳液；

d、向粗乳液中滴加適量無水乙醇直至形成澄清透亮的微乳液；

e、按一定比例將熱的微乳液分散于2～10℃的冷水中形成固體脂質(zhì)納米粒分散液。

步驟a中甘油二酯的加熱溫度t為所選用甘油二酯熔點以上5～10℃的溫度。

步驟b中乳化劑為離子型乳化劑與非離子型乳化劑的復(fù)配，如大豆卵磷脂、sds等離子型乳化劑與吐溫20、吐溫60、吐溫80等非離子型乳化劑的復(fù)配；但優(yōu)選生物毒性小的卵磷脂與吐溫。

步驟b中水相既可以是所有的乳化劑，也可以是部分水溶性好的乳化劑，根據(jù)復(fù)配的乳化劑在水中溶解性來判斷。水相的形成可采用包括機械攪拌、磁力攪拌、高剪切分散、高壓均質(zhì)、超聲等處理方式。

步驟a、b中甘油二酯與乳化劑的質(zhì)量比為1:3～1:8，而乳化劑中兩類乳化劑的復(fù)配比例可以是離子型：非離子型的質(zhì)量比為1:3～1:49，整個體系中甘油二酯的質(zhì)量濃度為1%～10%。

步驟c中將水相與油相混合形成粗乳液時，水相應(yīng)快速趁熱加入，以避免液態(tài)油相受冷結(jié)晶。形成粗乳液的判斷依據(jù)：將樣品輕微搖晃，觀察掛壁回流乳液為色澤均一，較為透亮?xí)r為準。

步驟d中無水乙醇的加入應(yīng)為逐滴加入，優(yōu)選為帶針頭注射器逐滴加入，可保證以細小液滴的形式加入。微乳液形成的判斷依據(jù)：溶液均一澄清透亮。

步驟e中將熱的微乳液分散至冷水中可使液態(tài)油相迅速冷卻結(jié)晶而形成固體脂質(zhì)納米粒分散液，熱微乳液與冷分散水體積比為1：5～1:25。得到的固體脂質(zhì)納米粒分散液可進一步冷凍干燥得到凍干粉，即為固體脂質(zhì)納米粒。

關(guān)于本發(fā)明的基于甘油二酯固體脂質(zhì)納米粒的制備方法，其優(yōu)點在于：（1）采用甘油二酯作為固體脂質(zhì)納米粒的脂質(zhì)載體，具有優(yōu)異的生理功能效應(yīng)。（2）不同脂肪酸形成的甘油二酯可在形成固體脂質(zhì)納米粒時可具有更多的晶格缺陷，進而對藥物具有更好的包埋效率和包埋穩(wěn)定性。

具體實施方式

通過下列實施實例舉例說明本發(fā)明的具體制備方法，但本發(fā)明的保護范圍，不局限于此。

實施例1

稱取0.1克1-月桂酸-3-棕櫚酸甘油二酯，水浴加熱至70℃得到液態(tài)油相；另外稱取0.1克大豆卵磷脂、0.3克吐溫80、2.0克蒸餾水，三者混合形成乳化劑溶液即水相，水浴加熱至70℃，加熱期間可將水相取出渦旋數(shù)次以促進大豆卵磷脂的溶解。在此溫度下，將油水兩相快速混合攪拌，直至形成粗乳液，然后向粗乳液中逐滴加入無水乙醇至形成澄清透亮的微乳液，并快速取熱的微乳液1毫升分散于25毫升的2～10℃的冷水中磁力攪拌得到1-月桂酸-3-棕櫚酸甘油二酯固體脂質(zhì)納米粒分散液。

新制得的納米分散液粒徑為295.1±4.670nm，pdi為0.198±0.022，zeta-potential為

-22.5±1.13mv，儲存一個月后粒徑為243.1±0.4359nm，pdi為0.204±0.008，zeta-potential為-20.1±0.416mv。

實施例2

稱取0.24克1-月桂酸-3-棕櫚酸甘油二酯，水浴加熱至70℃得到液態(tài)油相；另外稱取0.038克大豆卵磷脂、0.922克吐溫80、1.2克蒸餾水，三者混合形成乳化劑溶液即水相，水浴加熱至70℃，加熱期間可將水相取出渦旋數(shù)次以促進大豆卵磷脂的溶解。在此溫度下，將油水兩相快速混合攪拌，直至形成粗乳液，然后向粗乳液中逐滴加入無水乙醇至形成澄清透亮的微乳液，并快速取熱的微乳液1毫升分散于25毫升的2～10℃的冷水中磁力攪拌得到1-月桂酸-3-棕櫚酸甘油二酯固體脂質(zhì)納米粒分散液。

新制得到納米分散液粒徑為115.6±1.308nm，pdi為0.403±0.009，zeta-potential

為-11.5±0.231mv。

實施例3

稱取0.2克1-月桂酸-3-棕櫚酸甘油二酯，水浴加熱至70℃得到液態(tài)油相；另外稱取0.2克大豆卵磷脂、0.6克吐溫80、3.0克蒸餾水，三者混合形成乳化劑溶液即水相，水浴加熱至70℃，加熱期間可將水相取出渦旋數(shù)次以促進大豆卵磷脂的溶解。在此溫度下，將油水兩相快速混合攪拌，直至形成粗乳液，然后向粗乳液中逐滴加入無水乙醇至形成澄清透亮的微乳液，并快速取熱的微乳液1毫升分散于5毫升的2～10℃的冷水中磁力攪拌得到1-月桂酸-3-棕櫚酸甘油二酯固體脂質(zhì)納米粒分散液。

新制得到納米分散液粒徑為249.3±4.738nm，pdi為0.117±0.05，zeta-potential為

-11.6±0.596mv。