本發(fā)明屬于化妝品原料及制備，具體涉及一種從亞麻薺植株中提取的抗氧化組合物及其制備方法、在制備抗氧化化妝品中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、生物體自然新陳代謝及外界環(huán)境影響均可能形成大量的自由基和活性氧(ros)，過量的自由基或ros會對細胞壁、脂膜、線粒體和dna等細胞成分造成損害。正常情況下，人體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)可以清除這些自由基和ros，從而維持氧化和抗氧化之間的平衡。然而，當(dāng)人體不能利用細胞內(nèi)抗氧化酶系統(tǒng)以及細胞抗氧化劑清除過量的自由基和ros時，就會發(fā)生氧化應(yīng)激，引起一系列與衰老相關(guān)的皮膚問題。要改善這種問題，就需要機體補充外源性的抗氧化劑或給予有助于機體內(nèi)源性抗氧化物質(zhì)恢復(fù)的物質(zhì)。傳統(tǒng)的抗氧化劑一般來源于化學(xué)合成，存在穩(wěn)定性差、毒副作用強等缺點，而來自植物的天然抗氧化劑具有安全無毒、穩(wěn)定性強、天然等優(yōu)勢，更符合消費者要求。因此，天然抗氧化劑的研發(fā)已成為化妝品領(lǐng)域的研究熱點。

2、化妝品中常添加的植物成分有來自于植物種子和果實的植物油，富含豐富的脂溶性維生素及不飽和脂肪酸。申請?zhí)枮閏n202110389479.2的專利公開了一種含有植物油的抗氧化抗炎組合物，選用鱷梨油、亞麻籽油、紫蘇籽油、油茶籽油中的一種或幾種與霍霍巴油搭配，作為抗氧化混合物，這些油因易氧化而具有抗氧化性，但易受氧、光照、酶等因素而變質(zhì)，且低溫易沉淀混濁、高溫會產(chǎn)生有害物質(zhì)?？寡趸钚栽綇姷闹参锍煞?，越容易被氧化，使得植物提取物的強抗氧化活性與其在化妝品配方中的穩(wěn)定性，成為一組需解決的矛盾。

3、從植物中提取的黃酮類化合物及多糖類物質(zhì)，具有抗炎、抗氧化、抗菌等作用，也可以作為化妝品原料。申請?zhí)枮閏n202410011438.3的專利公開了一種刺梨提取物的制備方法，通過采用表面活性劑加提取溶劑的方法，增強表面活性劑對刺梨細胞壁的潤濕和增溶作用，大大提高刺梨中總黃酮和多糖的提取率，制得的凍干粉性質(zhì)穩(wěn)定。但由于植物提取中天然成分具有數(shù)量多、成分復(fù)雜的缺點，多種天然成分混合在一起，是否具有協(xié)同效應(yīng)也有待研究。

4、亞麻薺是油料經(jīng)濟作物，生長周期短(85～100d)、耐寒性強、病蟲害少、營養(yǎng)需求低、適應(yīng)干旱和半干旱等地區(qū)。申請人在文獻《亞麻薺植株營養(yǎng)及功能成分質(zhì)量評價》中記載了亞麻薺植株中含有豐富的氨基酸、多酚及黃酮類化合物，并對亞麻薺植株采用醇提、酶解等工藝得到黃酮類提取物，獲得了專利(申請?zhí)枮閏n202211155824.7)。在此基礎(chǔ)上，申請人進一步圍繞亞麻薺植株的提取工藝及功效評價開展了研究，通過試驗表征各提取物之間的協(xié)同效應(yīng)，為開發(fā)穩(wěn)定、有效的抗氧化化妝品提供理論基礎(chǔ)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、基于現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供了一種從亞麻薺植株中提取的抗氧化組合物及其制備方法，通過醇提、酶解及后處理，得到亞麻薺提取物i，通過水提、發(fā)酵與酶解聯(lián)合，經(jīng)不同的后處理得到亞麻薺提取物ⅱ及亞麻薺提取物iii，通過亞麻薺提取物i、亞麻薺提取物ⅱ及亞麻薺提取物iii復(fù)配得到抗氧化活性良好且性質(zhì)穩(wěn)定的抗氧化組合物。

2、本發(fā)明還公開了該抗氧化組合物作為化妝品原料在制備抗氧化化妝品中的應(yīng)用，對dpph自由基、羥基自由基和超氧陰離子自由基有較好的清除能力，且溫和無刺激，無毒副作用。

3、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

4、一種從亞麻薺植株中提取的抗氧化組合物的制備方法，包括以下步驟：

5、(1)將經(jīng)過清洗、干燥、粉碎的亞麻薺植株分散于乙醇水溶液中，然后加入生物復(fù)合酶i，于45～65℃酶解1～3h，超聲處理0.5～2h，固液分離，得到亞麻薺提取液；

6、(2)將步驟(1)所得亞麻薺提取液經(jīng)脫色、濃縮、冷凍干燥，得到亞麻薺提取物i；

7、(3)將經(jīng)過清洗、干燥、粉碎的亞麻薺植株，用水提取，得到亞麻薺水提液；向亞麻薺水提液中加入凝結(jié)芽孢桿菌液及扣囊復(fù)膜孢酵母菌液，于25～35℃振蕩48～72h，得到亞麻薺發(fā)酵液；

8、(4)向步驟(3)所得亞麻薺發(fā)酵液中加入生物復(fù)合酶ii，于45～65℃酶解2～5h后，超聲處理0.5～2h，固液分離，取液體濃縮，得到浸膏；向浸膏中加入乙醇進行醇沉，經(jīng)過濾，得到濾液及濾渣；

9、(5)將步驟(4)所得濾渣溶解于水中，通過分子量1000～3000da的超濾膜，收集截留液，經(jīng)濃縮、冷凍干燥，得到亞麻薺提取物ii；將步驟(4)所得濾液濃縮后，注入吸附樹脂中，收集水洗脫部分，經(jīng)濃縮、冷凍干燥，得到亞麻薺提取物iii；

10、(6)將亞麻薺提取物i、亞麻薺提取物ii及亞麻薺提取物iii按照質(zhì)量比1～2:3～5:1混合，即得抗氧化組合物。

11、優(yōu)選地，步驟(1)中所述生物復(fù)合酶i由蛋白酶和果膠酶按照質(zhì)量比1:2～3混合而成，生物復(fù)合酶i的加入量為步驟(1)所述亞麻薺植株質(zhì)量的0.8～2.0％；步驟(4)中所述生物復(fù)合酶ii由纖維素酶和果膠酶按照質(zhì)量比1:1.2～2.5混合而成，生物復(fù)合酶ii的加入量為步驟(3)所述亞麻薺植株質(zhì)量的1.5～3.0％。

12、優(yōu)選地，步驟(1)中所述乙醇水溶液中乙醇的體積濃度為60～80％；亞麻薺植株分散于乙醇水溶液時，亞麻薺植株與乙醇水溶液的用量按照料液比1g:20～40ml。

13、優(yōu)選地，步驟(2)中所述脫色是向亞麻薺提取液中加入脫色劑，于50～70℃脫色1～2h；其中，所述脫色劑由硅藻土和活性炭按照質(zhì)量比1:1～3混合而成，脫色劑的加入量與步驟(1)所述亞麻薺植株的質(zhì)量之比為1:10～30。

14、優(yōu)選地，步驟(3)中所述用水提取的具體步驟為：將經(jīng)過清洗、干燥、粉碎的亞麻薺植株分散于水中，于常壓、密閉環(huán)境下，提取1～3次；每次提取時，控制溫度為85～100℃、時長1～3h，每次提取結(jié)束，冷卻至室溫、過濾出水提液，合并每次提取的水提液，得到亞麻薺水提液；其中，提取用水的總量為所述亞麻薺植株質(zhì)量的8～30倍。

15、進一步，為了保證提取效果、提高提取效率，步驟(3)中提取的具體步驟如下：將亞麻薺植株分散于水(水作為提取溶劑)中，于常壓、密閉環(huán)境下，升溫至85～100℃，攪拌提取1～3h，冷卻至室溫，過濾，得到一次水提液及料渣，完成一次提?。幌蛄显性俅渭尤胨?，于常壓、密閉環(huán)境下，升溫至85～100℃，攪拌提取1～2h，冷卻至室溫，過濾，得到二次水提液，完成二次提?。缓喜⒁淮嗡嵋杭岸嗡嵋?，得到亞麻薺水提液，滅菌后備用；其中，一次提取時，水(提取溶劑)的用量是亞麻薺植株質(zhì)量的8～15倍，二次提取時，水(提取溶劑)的用量是亞麻薺植株質(zhì)量的4～8倍。

16、優(yōu)選地，步驟(3)中，所述凝結(jié)芽孢桿菌液及扣囊復(fù)膜孢酵母菌液的濃度均為0.7～1.3×109cfu/ml，凝結(jié)芽孢桿菌液與扣囊復(fù)膜孢酵母菌液加入的體積之比為1:0.8～1.2，且凝結(jié)芽孢桿菌液與扣囊復(fù)膜孢酵母菌液加入的總體積為亞麻薺水提液體積的3～6％。

17、進一步，所述凝結(jié)芽孢桿菌液及扣囊復(fù)膜孢酵母菌液采用以下步驟制得：分別取凝結(jié)芽孢桿菌種和扣囊復(fù)膜孢酵母菌種，作為待活化菌種，采用無菌水或液體培養(yǎng)基作為稀釋劑，用稀釋劑將待活化菌種稀釋后，接種于固體培養(yǎng)基上，于27～35℃培養(yǎng)48～72h，長出單菌落，將單菌落轉(zhuǎn)接到液體培養(yǎng)基中，利用透氣膜封口，于25～35℃振蕩培養(yǎng)22～30h后，調(diào)節(jié)菌液濃度為0.7～1.3×109cfu/ml，分別得到凝結(jié)芽孢桿菌液和扣囊復(fù)膜孢酵母菌液；其中，用稀釋劑將待活化菌種稀釋時，待活化菌種與稀釋劑的用量按照0.1～0.5g/ml；所述單菌落轉(zhuǎn)接到液體培養(yǎng)基時，單菌落與ym液體培養(yǎng)基的用量按照0.05～0.25g/l。

18、其中，所述固體培養(yǎng)基采用ym固體培養(yǎng)基，ym固體培養(yǎng)基的制備方法如下：以1l用量為基準，稱取蛋白胨4～5g、葡萄糖5～8g、牛肉膏5～10g、酵母浸粉2.5～3g、瓊脂粉16～20g和氯化鈉4～5g，混合均勻后加入水補足1l，滅菌后倒入培養(yǎng)皿，室溫靜置凝固后，即得ym固體培養(yǎng)基；所述液體培養(yǎng)基采用ym液體培養(yǎng)基，ym液體培養(yǎng)基的制備方法如下：以1l用量為基準，稱取稱取蛋白胨4～5g、葡萄糖5～8g、牛肉膏5～10g、酵母浸粉2.5～3g和氯化鈉4～5g，混合均勻后加入水補足1l，滅菌，即得ym液體培養(yǎng)基。

19、優(yōu)選地，步驟(2)及(5)中，所述冷凍干燥的條件均為：真空度20～80pa、溫度-20～-40℃、時長3～6h。

20、優(yōu)選地，步驟(4)中，所述醇沉是向浸膏中加入乙醇，放置16～36h；其中，乙醇的加入量為浸膏質(zhì)量的1.0～2.5倍。

21、優(yōu)選地，步驟(5)中，所述吸附樹脂采用d101大孔樹脂，d101大孔樹脂的用量為步驟(3)所述亞麻薺植株質(zhì)量的1.5～3倍；洗脫時，采用水為洗脫劑，所述洗脫劑的用量為步驟(3)所述亞麻薺植株質(zhì)量的4～6倍，洗脫速度為1.5～2.5bv/h。

22、采用上述方法制備得到抗氧化組合物，在制備抗氧化化妝品中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了一種抗氧化化妝品，包括所述的抗氧化組合物。

23、查閱現(xiàn)有文獻發(fā)現(xiàn)，有關(guān)亞麻薺植株研究的技術(shù)大多為含量測定、揮發(fā)性成分測定及種植技術(shù)，尚未有關(guān)于亞麻薺植株提取物作為原料應(yīng)用在化妝品的相關(guān)文獻。本發(fā)明以可再生的亞麻薺植株作為原料，利用發(fā)酵和酶解技術(shù)產(chǎn)生的黃酮產(chǎn)物及糖類產(chǎn)物，降低了化妝品產(chǎn)業(yè)對環(huán)境的影響，提高原料的生物活性，使其具有更強的抗氧化功能且性質(zhì)穩(wěn)定；由亞麻薺三種提取物混合而成的抗氧組合物對dpph自由基、羥基自由基和超氧陰離子自由基有較好的清除能力。

24、和現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果如下：

25、本發(fā)明所制備的亞麻薺提取物i是以黃酮類化合物為主的組合物，亞麻薺提取物ⅱ及亞麻薺提取物iii為不同分子量大小的糖類組合物，亞麻薺提取物i、亞麻薺提取物ⅱ及亞麻薺提取物iii均對dpph自由基、羥基自由基和超氧陰離子自由基有一定的清除能力。由于不同分子量糖類組合物的單糖組成、官能團、構(gòu)型及微觀形貌均存在差異，導(dǎo)致其生物活性不同，亞麻薺提取物ⅱ及亞麻薺提取物iii復(fù)配在一起，可互相修飾達到優(yōu)化效果；當(dāng)亞麻薺提取物i、亞麻薺提取物ⅱ及亞麻薺提取物iii三者混合進入溶液體系后，亞麻薺提取物ⅱ及亞麻薺提取物iii作為天然的大分子聚合物，與亞麻薺提取物i之間可能存在鍵合及物理吸附等作用方式聯(lián)合，使亞麻薺提取物ⅱ及亞麻薺提取物iii成為亞麻薺提取物i的載體或包覆層，從而改善亞麻薺提取物i水溶性差及化學(xué)穩(wěn)定性低的問題，且三者復(fù)配在抗氧化活性試驗中出現(xiàn)明顯的協(xié)同增效作用。本發(fā)明所制備的抗氧化組合物具有易獲取、穩(wěn)定性好、生物相容性好、無毒無刺激等優(yōu)點，表現(xiàn)出良好的抗氧化特性，在制備抗氧化化妝品中具有良好的應(yīng)用前景。

26、說明書附圖

27、圖1是實施例1～3及比較例7、10待測試樣的dpph清除率曲線圖；

28、圖2是實施例1～3及比較例7、10待測試樣的超氧自由基清除率曲線圖；

29、圖3是實施例1～3及比較例7、10待測試樣的羥基自由基清除率曲線圖。