本發(fā)明涉及醫(yī)藥，具體涉及一種腦靶向的nmn脂質(zhì)體及其制備神經(jīng)退行性疾病藥物的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、神經(jīng)退行性疾病是由神經(jīng)元和/或其髓鞘的喪失所致，隨著時(shí)間的推移而惡化，進(jìn)而出現(xiàn)神經(jīng)功能障礙的一類疾病，其致病機(jī)制復(fù)雜，常見病因有氧化應(yīng)激、線粒體功能障礙、興奮性毒素和免疫炎癥等。根據(jù)疾病發(fā)生和進(jìn)展情況，神經(jīng)退行性疾病可分為急性和慢性，前者主要包括腦缺血、腦損傷、癲癇；后者包括阿爾茲海默病、帕金森病、亨廷頓病、pick病、肌萎縮性側(cè)索硬化、不同類型脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)等。其中，帕金森病(parkinson’sdisease，pd)是一種影響運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)的進(jìn)行性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。隨著社會人口老齡化進(jìn)程加速，pd的發(fā)病率急劇上升，目前我國的pd患病人數(shù)約占全球總數(shù)的一半，65歲以上人群患病率為1.7％，預(yù)計(jì)到2030年將超過500萬人，已成為一種嚴(yán)重的全球性健康問題，造成沉重的社會和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。由于手術(shù)無法根治，臨床對于pd以藥物治療為主，迫切需要研制安全高效的pd治療藥物。即使是被譽(yù)為目前治療pd“金標(biāo)準(zhǔn)”的左旋多巴，也僅能改善臨床癥狀，并不能阻斷其致病突變。因此，利用多途徑、多靶點(diǎn)的優(yōu)勢全面調(diào)理腦功能，從而改善患者的神經(jīng)功能障礙，將成為pd治療藥物研發(fā)的重要方向，前景廣闊。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種腦靶向的nmn脂質(zhì)體及其制備神經(jīng)退行性疾病藥物的應(yīng)用，具體為一種腦靶向的nmn脂質(zhì)體及其制備pd治療藥物的應(yīng)用。

2、本發(fā)明通過將具有透過血腦屏障能力的功能基配體轉(zhuǎn)鐵蛋白修飾到脂質(zhì)體表面，增加脂質(zhì)體透過血腦屏障的能力；同時(shí)本發(fā)明將nmn包載到靶向脂質(zhì)體中，促進(jìn)nmn在腦內(nèi)發(fā)揮作用。

3、本發(fā)明的目的在于提供一種腦靶向的nmn脂質(zhì)體。

4、本發(fā)明的另一目的在于提供上述負(fù)載nmn的腦靶向脂質(zhì)體的制備方法。

5、本發(fā)明的再一目的在于提供上述負(fù)載nmn的腦靶向脂質(zhì)體的應(yīng)用。

6、一種腦靶向的nmn脂質(zhì)體，所述腦靶向的nmn脂質(zhì)體由載藥脂質(zhì)體和轉(zhuǎn)鐵蛋白組成，所述轉(zhuǎn)鐵蛋白與所述脂質(zhì)體的質(zhì)量比為1：35～45；

7、所述載藥脂質(zhì)體由藥物nmn和脂質(zhì)體組成，所述藥物與脂質(zhì)體的質(zhì)量比為1：10～50，

8、其中，藥物nmn為β-煙酰胺單核苷酸和/或其鹽，

9、脂質(zhì)體包括卵磷脂、膽固醇、dspe-peg2000(二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇)、dspe-peg2000-cooh(二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基)，并且，按照摩爾份數(shù)計(jì)，卵磷脂76～82份，膽固醇6～9份，dspe-peg20005～8份，dspe-peg2000-cooh?0.5～0.8份。

10、優(yōu)選，所述制備脂質(zhì)體的卵磷脂為大豆卵磷脂或蛋黃卵磷脂，所述轉(zhuǎn)鐵蛋白為乳鐵蛋白(lf)。

11、本發(fā)明通過具體實(shí)驗(yàn)，提供具體的一種載藥脂質(zhì)體，其由所述靶向脂質(zhì)體包載藥物得到。其中，優(yōu)選的實(shí)施例之一如下所述：

12、優(yōu)選，所述制備脂質(zhì)體各原料的摩爾份數(shù)具體為：

13、所述卵磷脂79份；

14、所屬膽固醇8份；

15、所述dspe-peg20007份；

16、所述dspe-peg2000-cooh?0.7份。

17、優(yōu)選，所述轉(zhuǎn)鐵蛋白與所述脂質(zhì)體與所述脂質(zhì)體的質(zhì)量比為1：35～45，具體為1：40。

18、所述載藥脂質(zhì)體中，所述藥物具體可為β-煙酰胺單核苷酸和/或其鹽。

19、所述載藥脂質(zhì)體的藥脂比為1：15～1：30，具體可為1：22。

20、所述藥脂比指的是所述藥物的質(zhì)量與所述靶向脂質(zhì)體中的所述卵磷脂和所述膽固醇的質(zhì)量之和的比值。

21、所述載藥脂質(zhì)體的粒徑為(100～250)nm，具體可為160?nm。

22、所述載藥脂質(zhì)體的多分散指數(shù)為0.1～0.3，具體可為0.2。

23、所述載藥脂質(zhì)體的zeta電位為-(7～12)mv，具體可為-9?mv。

24、以所述靶向脂質(zhì)體為活性成分的藥物載體也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

25、本發(fā)明進(jìn)一步提供了所述靶向脂質(zhì)體的制備方法，包括如下步驟：edcl(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)、nhs(n-羥基丁二酰亞胺)存在的情況下，在一定溫度下反應(yīng)過夜，所述轉(zhuǎn)鐵蛋白連接于脂質(zhì)體的所述羧基上，即得所述靶向脂質(zhì)體。

26、一種腦靶向的nmn脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟：

27、(1)將nmn溶于水中，將卵磷脂、膽固醇、dspe-peg2000、dspe-peg2000-cooh溶解于有機(jī)溶劑中，二者混合，得溶液a；

28、(2)對步驟(1)所得溶液a，用細(xì)胞破碎儀進(jìn)行第一次超聲乳化，然后加入水，進(jìn)行第二次超聲乳化，得到溶液b；

29、(3)溫度32℃，將步驟(2)所得溶液b減壓除有機(jī)溶劑，得乳液c；

30、(4)將步驟(3)所得乳液通過微孔濾膜(0.22μm)反復(fù)擠壓，然后與edcl(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)、nhs(n-羥基丁二酰亞胺)及轉(zhuǎn)鐵蛋白混合，反應(yīng)過夜，得乳液d；

31、(5)將步驟(4)所得乳液d進(jìn)行透析，去除游離小分子，即得腦靶向的nmn脂質(zhì)體。

32、上述制備方法中，所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽與所述轉(zhuǎn)鐵蛋白的摩爾比為1：1～350：450，具體可為1：400；

33、所述n-羥基丁二酰亞胺的摩爾比為1：350～1：450，具體可為1：400。

34、本發(fā)明提供了轉(zhuǎn)鐵蛋白修飾的nmn脂質(zhì)體的一種優(yōu)選的制備方法，其中，優(yōu)選的實(shí)施例之一如下所述：

35、包括步驟：

36、(1)將脂質(zhì)體制備材料充分溶解于有機(jī)溶劑中，與特定濃度的nmn水溶液按一定比例混合后得到溶液a；

37、(2)用細(xì)胞破碎儀在一定功率下對溶液a進(jìn)行超聲，然后加入一定比例的水在同功率下再次進(jìn)行超聲，得到溶液b；

38、(3)將溶液b在特定溫度下減壓蒸發(fā)一段時(shí)間除去有機(jī)溶劑后得到乳液；

39、(4)將上述乳液通過微孔濾膜過濾后，與一定比例的edcl(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)、nhs(n-羥基丁二酰亞胺)、乳鐵蛋白混合，在室溫下反應(yīng)過夜；

40、(5)將反應(yīng)后所得乳液通過透析除去游離小分子后，即得所述nmn脂質(zhì)體納米粒子。

41、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案中，所屬大豆卵磷脂、膽固醇、dspe-peg2000、dspe-peg2000-cooh、乳鐵蛋白的質(zhì)量比為20：2.1：1.67：0.186：0.13；

42、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案中，該nmn脂質(zhì)體納米粒子的粒徑為160nm；

43、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案中，所述有機(jī)溶劑為氯仿；

44、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選試驗(yàn)方案中，所述nmn水溶液的濃度為4mg/ml；

45、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案中，超聲乳化的功率為200w；

46、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案中，第一次超聲乳化中有機(jī)溶劑-水的體積比為4.3：1；

47、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案中，第二次超聲乳化中外水相-內(nèi)水相的體積比為9：1；

48、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案中，第一次超聲乳化的時(shí)間為4.5min；

49、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案中，減壓蒸發(fā)的溫度為32℃；

50、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案中，減壓蒸發(fā)的時(shí)間為10min；

51、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案中，dspe-peg2000-cooh與dspe-peg2000的質(zhì)量比為1：9；

52、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案中，所述透析所用的透析袋為mw3414000d。

53、腦靶向的nmn脂質(zhì)體制備帕金森病治療藥物的應(yīng)用。

54、本發(fā)明的有益效果在于，本發(fā)明提供的特定比例組成的nmn腦靶向脂質(zhì)體，具有良好的血腦屏障透過能力。

55、本發(fā)明將藥物活性成分nmn包載到脂質(zhì)體中，并對載藥脂質(zhì)體進(jìn)行轉(zhuǎn)鐵蛋白修飾，在實(shí)現(xiàn)腦組織靶向的同時(shí)，增強(qiáng)藥物血腦屏障透過性，從而促進(jìn)藥物在病灶部位的釋放和富集，提高藥效作用。所述載藥脂質(zhì)體可用于制備帕金森病治療藥物，具有重要的臨床價(jià)值。