本發(fā)明涉及生物工程，具體涉及一種促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生的混合物、制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、皮膚彈性蛋白(elastin)是一種重要的蛋白質(zhì)，主要存在于皮膚、血管、肺部和其他結(jié)締組織中。它的主要功能是賦予組織彈性和韌性，使其能夠在受到拉伸或壓縮后恢復(fù)原狀。有研究發(fā)現(xiàn)，彈性蛋白的前體彈性蛋白原在胎兒生命晚期開(kāi)始表達(dá)，在新生兒階段達(dá)到較高水平，然后開(kāi)始逐漸下降，成年后幾乎沒(méi)有新的彈性蛋白生成。彈性蛋白的半衰期約為70年，因此需要常年發(fā)揮作用但數(shù)十年無(wú)更新，隨著年齡的增長(zhǎng)，或者長(zhǎng)時(shí)間的紫外線暴露，或者吸煙、不良飲食習(xí)慣和缺乏睡眠等不良生活習(xí)慣，會(huì)破壞皮膚中的彈性蛋白，加速皮膚老化。因此在皮膚修復(fù)和皮膚抗老化過(guò)程中彈性蛋白的生成至關(guān)重要。

2、cn113453674a公開(kāi)了i型膠原蛋白或彈性蛋白的產(chǎn)生促進(jìn)劑，其主要以天然的類(lèi)菌胞素氨基酸或鹽作為有效成分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)類(lèi)菌胞素氨基酸或其鹽具有強(qiáng)大的i型膠原蛋白和彈性蛋白的產(chǎn)生促進(jìn)作用，該作用強(qiáng)大到無(wú)法由成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用想象的程度。cn115515558a公開(kāi)了彈性蛋白產(chǎn)生促進(jìn)劑以及皮膚化妝品，其主要以唾液酸酶為有效成分，將其應(yīng)用到皮膚化妝品上能夠改善或預(yù)防隨著年齡增長(zhǎng)的真皮彈性蛋白的減少。

3、外泌體來(lái)源于臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、或者臍帶干細(xì)胞、胎盤(pán)干細(xì)胞等干細(xì)胞分泌的外基質(zhì)囊泡，含有轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子b、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、肝臟生長(zhǎng)因子、過(guò)氧化物歧化酶、白細(xì)胞介素6、表皮生長(zhǎng)因子、膠原蛋白、纖維粘連蛋白、血小板衍生因子等多種細(xì)胞因子和蛋白成分,具有防止氧化損傷,抑制炎性反應(yīng)、內(nèi)皮修復(fù)、組織器官修復(fù)、新陳代謝調(diào)控、免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)等方面的功效。

4、cn110279648a公開(kāi)了一種含外泌體的美容制劑及用途，其使用脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞分泌的外泌體作為有效成分，具有抑制彈性蛋白酶和膠原蛋白酶的活性，能有效對(duì)抗衰老，提高皮膚彈性，改善皮膚皺紋，在配合其他美白組合物共同使用到皮膚上，起到更好的美白緊致肌膚的效果。cn117106704a公開(kāi)了一種中胚層抗衰的外泌體混合物、制備方法及其應(yīng)用，其使用源自成纖維細(xì)胞的外泌體和源自間充質(zhì)干細(xì)胞的外泌體按照1:1的體積比配制，能顯著促進(jìn)膠原合成、彈性蛋白的產(chǎn)生和細(xì)胞外基質(zhì)重塑，對(duì)保持皮膚緊致和彈性至關(guān)重要

5、上述現(xiàn)有技術(shù)將外泌體作為有效成分應(yīng)用于美容制劑等產(chǎn)品上能夠促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生，有效提高皮膚彈性，但是依舊存在一些缺點(diǎn)：一、外泌體主要來(lái)源于干細(xì)胞，制備工藝復(fù)雜，價(jià)格昂貴，人民群眾需要一種價(jià)格相對(duì)便宜的化妝品；二、尚沒(méi)有找到相互促進(jìn)的物質(zhì)來(lái)與外泌體協(xié)同促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明目的在于提供一種促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生的混合物、制備方法及其應(yīng)用，以解決背景技術(shù)中提到的問(wèn)題。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明提供了一種促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生的混合物，該混合物包括以下重量份數(shù)的原料：植物提取物40-45份、外泌體5-25份、羧甲基脫乙酰殼多糖0.2-2份、乙酰化透明質(zhì)酸鈉0.1-1份、可溶性膠原0.1-0.3份、可溶性蛋白多糖0.05-0.3份、銀耳多糖0.05-0.1份、去離子水65-80份。

4、植物提取物包括：仙人掌提取液30-35份、益母草提取液18-22份、麥冬根提取液8-12份、蓖麻油2-4份。

5、作為本發(fā)明進(jìn)一步的優(yōu)選方案，促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生的混合物包括以下重量份數(shù)的原料：植物提取物40份、外泌體5份、羧甲基脫乙酰殼多糖0.2份、乙?；该髻|(zhì)酸鈉0.1份、可溶性膠原0.15份、可溶性蛋白多糖0.05份、銀耳多糖0.05份、去離子水65份，

6、其中，植物提取物包括仙人掌提取液30份、益母草提取液18份、麥冬根提取液8份、蓖麻油2份。

7、作為本發(fā)明進(jìn)一步的優(yōu)選方案，促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生的混合物包括以下重量份數(shù)的原料：植物提取物40份、外泌體20份、羧甲基脫乙酰殼多糖1.5份、乙酰化透明質(zhì)酸鈉0.7份、可溶性膠原0.25份、可溶性蛋白多糖0.1份、銀耳多糖0.1份、去離子水80份，

8、其中，植物提取物包括仙人掌提取液35份、益母草提取液20份、麥冬根提取液10份、蓖麻油2份。

9、作為本發(fā)明進(jìn)一步的優(yōu)選方案，所述外泌體提取自人體細(xì)胞上清液。

10、一種促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生的混合物制備方法，包括以下步驟：

11、s101、將蓖麻油、羧甲基脫乙酰殼多糖、乙?；该髻|(zhì)酸鈉、可溶性膠原、銀耳多糖、去離子水投入反應(yīng)釜中，加熱，按照1200-1600轉(zhuǎn)/分鐘的速率均質(zhì)分散20-30分鐘，冷卻至室溫后得到混合物a；

12、s102、將仙人掌提取液、益母草提取液、麥冬根提取液、外泌體、可溶性蛋白多糖投入均質(zhì)機(jī)中，按照600-800轉(zhuǎn)/分鐘的速率均質(zhì)12-15分鐘，隨后加入步驟s1所得的混合物a，提高轉(zhuǎn)速至1800-2200轉(zhuǎn)/分鐘的速率下快速攪拌均質(zhì)6-8分鐘，得到混合物b；

13、s103、將混合物b高壓蒸汽滅菌后分裝，使用冷凍干燥機(jī)凍干。

14、優(yōu)選地，步驟s101中的加熱溫度為78-82℃。

15、進(jìn)一步的，步驟s103中的凍干包括以下步驟：

16、s201、將分裝后的混合物b連同凍干容器放入-40℃的低溫環(huán)境中進(jìn)行速凍，保持速凍時(shí)間大于3小時(shí)；

17、s202、將步驟s201的混合物b和凍干容器依次進(jìn)行四次升溫，從-40℃升溫至-15℃后保持3小時(shí)；從-15℃升溫至-5℃后保持3小時(shí)；從-5℃升溫至5℃后保持3小時(shí)；再?gòu)?℃升溫至30℃后保持3小時(shí)，完成冷凍干燥過(guò)程，得到促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生的混合物。

18、優(yōu)選地，步驟s202中的四次升溫時(shí)間均為60分鐘；

19、優(yōu)選地，步驟s202中的真空條件為為23±3pa；

20、本發(fā)明的目的還在于提供上述制備的促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生的混合物在抗衰老制劑、增強(qiáng)皮膚彈性制劑中的應(yīng)用。

21、需要說(shuō)明的是羧甲基脫乙酰殼多糖在醫(yī)療健康領(lǐng)域能促進(jìn)創(chuàng)面愈合，通過(guò)促進(jìn)成纖維細(xì)胞和表皮角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)，提高巨噬細(xì)胞的吞噬能力，加速創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程。

22、乙?；该髻|(zhì)酸鈉是引入乙?；鶎?duì)天然的透明質(zhì)酸鈉(ha)進(jìn)行化學(xué)修飾，其生物利用度是普通ha的7倍，對(duì)透明質(zhì)酸酶的耐受性?xún)?yōu)于普通ha，可以抑制細(xì)胞內(nèi)超氧陰離子自由基ros生成，提高uvb輻照后的成纖維細(xì)胞增殖活性。

23、可溶性膠原以人膠原蛋白基因?yàn)槟０?，?yōu)選并優(yōu)化改造，通過(guò)發(fā)酵誘導(dǎo)、分離純化獲得。得到的重組可溶性膠原與人自身膠原蛋白高度一致，具有很好的皮膚親和性和組織相容性。

24、可溶性蛋白多糖可促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞增殖及其透明質(zhì)酸合成，促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖，促進(jìn)成纖維細(xì)胞合成膠原蛋白和透明質(zhì)酸，從而實(shí)現(xiàn)抗衰功效。

25、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

26、1、本發(fā)明的混合物通過(guò)添加植物提取物、多糖、乙酰化透明質(zhì)酸鈉等物質(zhì)，與外泌體在促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生的功能上相互促進(jìn)，極大的節(jié)約了生產(chǎn)成本，使該組合物能夠普惠于民；

27、2、通過(guò)試驗(yàn)測(cè)定，本發(fā)明的混合物能夠顯著促進(jìn)彈性蛋白生成，從而提升衰老或受損肌膚的彈性，具有緊致抗衰功效，具有重要的應(yīng)用價(jià)值；

28、3、該組合物制備工藝簡(jiǎn)單，經(jīng)過(guò)上述凍干工藝之后，區(qū)別于傳統(tǒng)的粉狀，呈現(xiàn)新穎的絮狀結(jié)構(gòu)外觀，絮狀外觀完整的保留了大分子膠原和多糖的三螺旋立體骨架結(jié)構(gòu)，不影響其分子量和分子活性的改變。凍干之后組合物中無(wú)水份殘留，易于長(zhǎng)期保存，不易分解和失活。