巖黃連在制備治療阿爾茲海默病藥物方面的新用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及巖黃連的新用途，特別是巖黃連生物堿的新用途，即在制備治療阿爾 茲海默病藥物方面的新用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 阿爾茨海默?。ˋD)和血管性癡呆（VD)是老年期癡呆中最常見的類型?！吨袊?年學雜志》收載的"阿爾茨海默病發(fā)病機制中炎性反應(yīng)的研宄進展"，統(tǒng)計顯示AD占癡呆病 人總數(shù)的50%?60%，VD占15%?20%。其特征性病理學改變是大腦皮層和皮層下神經(jīng) 原纖維纏結(jié)（NFT)、細胞外大量老年斑（SP)形成及神經(jīng)元缺失。大量研宄認為β淀粉樣 蛋白（|3amyloidprotein，Αβ)在AD發(fā)病中起著主軸作用，Αβ的神經(jīng)毒作用是多種因素 導致AD發(fā)病的共同通路。目前針對Αβ的神經(jīng)毒作用的防治措施主要有以下幾方面：減少 Αβ的前體即β淀粉樣前體蛋白（|3amyloidprecursorprotein，APP)的量；調(diào)節(jié)APP的裂 解，減少Αβ的產(chǎn)生；促進Αβ的降解和清除；防止Αβ的聚集和沉積；阻斷Αβ作用機制 的關(guān)鍵環(huán)節(jié)等（"阿爾茨海默病中β淀粉樣蛋白神經(jīng)毒性作用研宄進展"《中國神經(jīng)精神 疾病雜志》）。
[0003] 根據(jù)已有的巖黃連研宄結(jié)果，巖黃連全草含脫氫卡維丁堿，具有顯著的抗菌、消 炎、鎮(zhèn)痛和強安定作用，并有抑制腫瘤細胞的作用，適用于急慢性肝炎肝膽濕熱癥者。"藥用 植物巖黃連研宄概述"公開巖黃連相關(guān)注射液和片劑等產(chǎn)品，主治肝炎特別是乙型肝炎、肝 硬化、肝癌等，療效顯著。
[0004] 中藥巖黃連的活性成分主要為生物堿類化合物。"巖黃連化學成分"《中國天然藥 物》研宄表明：巖黃連全草可分離出14個化合物，分別為去氫巖黃連堿、黃連堿、齊墩果酸、 刺檗堿、胡蘿卜苷、別隱品堿、β-谷甾醇、白樺脂醇、環(huán)桉烯醇、白樺脂酸、β-香樹脂醇乙 酸脂、小檗堿、四氫掌葉防己堿、巴馬汀。"巖黃連活性成分系統(tǒng)研宄及荼蘆毒性成分研宄" 中采用色譜技術(shù)對巖黃連化學成分進行了系統(tǒng)的分離，共得到47個化合物，其中脫氫卡維 丁、脫氫阿樸卡維丁、脫氫異阿樸卡維丁、脫氫斯氏紫堇堿和黃連堿為巖黃連的主要化學成 分。已知巖黃連主要用于治療肝炎、肝癌、高膽紅素血癥、腎綜合征出血熱等疾病。
[0005] 目前沒有文獻資料提到巖黃連或巖黃連生物堿可用于治療阿爾茲海默病。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供巖黃連在制備治療阿爾茲海默病藥物方面的新用途；
[0007] 本發(fā)明的另一目的是提供巖黃連提取物在制備治療阿爾茲海默病藥物方面的新 用途；
[0008] 本發(fā)明的另一目的是提供巖黃連提取物的制備方法；
[0009] 本發(fā)明的另一目的是提供巖黃連生物堿在制備治療阿爾茲海默病藥物方面的新 用途；
[0010] 本發(fā)明的另一目的是提供巖黃連生物堿的制備方法。
[0011] 本發(fā)明的目的是通過下列的技術(shù)方案實現(xiàn)的：
[0012] 本發(fā)明原料來源：
[0013] 巖黃連：巖黃連系罌栗科紫堇屬植物石生黃堇的全草（Corydalis thalictrifolia Franch)，別稱巖胡、巖連、菊花黃連、土黃連、石生黃堇。巖黃連，多年生草 本，根倒圓錐形，肉質(zhì)，莖單一或叢生，高15-20厘米，葉莖基生，葉片革質(zhì)，與狀復葉，小葉 片多為3深裂或3淺裂，最后裂片先端圓鈍，總狀花序頂生，蒴果線形，膜質(zhì)，黃色，成熟時2 瓣裂，種子細小，生長于石巖上。分布于廣西、貴州等山區(qū)，性涼、味苦。巖黃連主要以根入 藥，具有清熱解毒、利濕、止血止痛和強安定的功能，并具有抑制腫瘤細胞的作用。巖黃連適 用于急慢性肝炎肝膽濕熱癥者，主治瘡癤腫毒、急性黃疸型肝炎、肝硬化、肝癌及口舌糜爛、 火眼、目翳、痢疾、腹瀉、腹痛、痔瘡出血等癥。
[0014] 發(fā)明人在研宄阿爾茲海默病的治療過程中發(fā)現(xiàn)，乙酰膽堿酶（AChE)可以促進 β-淀粉樣多肽的沉積、分解乙酰膽堿（AChE)。植物巖黃連特別是巖黃連所含生物堿表現(xiàn) 出能抑制AChE的表達、聚集或糖基化從而減少神經(jīng)細胞內(nèi)β -淀粉樣多肽的聚集，抑制Ach 的分解，同時還具有增強記憶力的作用，實現(xiàn)了對阿爾茲海默氏病病理進程的干預和病理 癥狀的顯著改善，從而有效治療阿爾茲海默病。
[0015] AD病因及發(fā)病機制主要有淀粉樣蛋白神經(jīng)毒性學說、微量元素學說、膽堿能遞質(zhì) 途徑異常學說、基因突變學說、自由基損傷學說、細胞凋亡學說、雌激素缺乏學說等?，F(xiàn)代 醫(yī)學認為，調(diào)節(jié)學習記憶能力的機制是多方面的，中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的膽堿能神經(jīng)元及其突 觸是構(gòu)成學習記憶的主要通路，與大腦的學習記憶能力密切相關(guān)，其核心ACh是中樞膽堿 能神經(jīng)系統(tǒng)重要的神經(jīng)遞質(zhì)，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有興奮和抑制的雙重作用，參與大腦皮層的 喚醒、運動和情緒特別是對學習和認知等方面功能的調(diào)節(jié)，主要有膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶ChAT合 成，AChE分解。大量研宄報道顯示：AD患者腦組織ACh的合成、釋放、攝取等功能下降，ChAT 的活性下降，與癡呆的嚴重程度密切相關(guān)，是導致患者記憶力減退，行為等發(fā)生異常的主要 原因。AChE作為膽堿能纖維的標志物，可以促進A β25_35促進的沉積，A β斑塊的形成激活 了神經(jīng)膠質(zhì)細胞，影響APP代謝，干擾了膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞。其活性增高，加速Ach分 解，降低學習認知和記憶能力。
[0016] AD等神經(jīng)元退行性疾病發(fā)病機理復雜，其中氧自由基引起的過氧化損傷是AD等 老年疾病發(fā)病的重要因素。SOD是機體清除自由基的重要酶類，其作用主要是催化生物氧化 產(chǎn)生超氧自由基，清除并阻止由氧自由基引發(fā)的自由基連鎖反應(yīng)。MDA是自由基對生物細胞 膜損傷的主要代謝產(chǎn)物，能使生物膜變性、壞死，使DNA發(fā)生突變、交鏈，同時使SOD活性降 低，而造成自由基連鎖反應(yīng)的惡性循環(huán)。腦老化過程中，神經(jīng)細胞膜不飽和脂肪酸被氧化產(chǎn) 生大量自由基，損傷細胞膜、細胞器，產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，最終引起細胞凋亡、退行性病變、學習 記憶能力下降，最終導致AD等眾多老年病的發(fā)生。在研宄中發(fā)現(xiàn)，巖黃連及巖黃連生物堿 的給予明顯減少了大鼠腦組織MDA含量的增加，而同時能夠提高大鼠腦組織的SOD活性，這 些數(shù)據(jù)表明巖黃連生物堿對AD大鼠腦組織氧自由基的清除具有明顯的改善作用。
[0017] 目前已有大量的研宄證實了抗自由基在治療AD中的重要作用。巖黃連生物堿作 為抗自由基作用機制可能是：用于脂質(zhì)過氧化物，打斷鏈鎖反應(yīng)，抑制不飽和脂肪酸過氧 化，抑制磷脂酶Α2及脂化酶活性，減少自由基形成。當然，巖黃連生物堿對AD大鼠的保 護作用可能是一個復雜的機制，其具體機制還需做進一步研宄。雖然目前對其具體作用機 制還不完全明了，但巖黃連生物堿對AD等模型動物腦損傷、神經(jīng)元退變都具有較好的治療 及保護作用，其對AD等神經(jīng)元退變疾病的防治提供了另一種啟示：即抗自由基在AD等神經(jīng) 元退行性疾病中可能扮演著重要角色，而通過抗自由基的使用對神經(jīng)元退行性疾病可能取 得不錯的療效。
[0018] 本發(fā)明專利臨床應(yīng)用的安全性較高，在治療阿爾茲海默病的藥物治療中不失為一 種好藥，其拓寬了治療阿爾茲海默病的新方法，同時為患者解決了現(xiàn)有技術(shù)治療阿爾茲海 默病時出現(xiàn)的不良反應(yīng)。
[0019] 因此，申請人提供巖黃連、巖黃連提取物、巖黃連生物堿能夠用于治療阿爾茲海默 病藥物方面的新用途。
[0020] 本發(fā)明公開了巖黃連提取物在制備治療阿爾茲海默病藥物的應(yīng)用，所述巖黃連提 取物的制備包括以下步驟：巖黃連粉碎，加入藥材總重量10-20倍濃度為40-80%的乙醇， 加熱回流提取2-3次，過濾，得巖黃連提取物。
[0021] 本發(fā)明還公開了巖黃連生物堿在制備治療阿爾茲海默病藥物的應(yīng)用，所述巖黃連 生物堿的制備包括以下步驟：
[0022] 巖黃連提取物經(jīng)1-10倍巖黃連重量的大孔樹脂吸附，先后用蒸餾水和濃度為 10-20 %的乙醇洗柱，再以濃度為40-45 %乙醇溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮，得巖黃連生物 喊。
[0023] 本發(fā)明公開的巖黃連生物堿制備方法還可以包括以下步驟：
[0024] 巖黃連粉碎，加入藥材總重量10倍濃度為75%的乙醇，60-80°C加熱回流提取2-3 次，過濾，得巖黃連提取液；巖黃連提取液以流速為l-12BV/h通過10倍巖黃連原料重量的 大孔樹脂；先后用蒸餾水和濃度為10-20%的乙醇洗柱，再用濃度為40-45%乙醇洗脫，流 速為15-18BV/h，收集洗脫液，65°C以下減壓濃縮至40-65°C時相對密度為1. 0-1. 2的清膏， 干燥，得巖黃連生物堿。
[0025] 巖黃連提取物和巖黃連生物堿與醫(yī)藥學上可接受的載體配合成在制備治療阿爾 茲海默病藥物方面的新用途。
[0026] 本發(fā)明提供的巖黃連、巖黃連提取物、巖黃連生物堿用于治療阿爾茲海默病藥物 方面的新用途具有以下優(yōu)點：
[0027] 1、巖黃連、巖黃連提取物、巖黃連生