一種海參的超高壓提取方法及其制備的海參提取物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種海參的超高壓提取方法及其制備的海參提取物。
【背景技術】
[0002] 海參，別名刺參、海鼠，屬海參綱（Holothurioidea)，是生活在海邊至8000米的海 洋棘皮動物，據(jù)今已有六億多年的歷史，海參以海底藻類和浮游生物為食。海參全身長滿肉 刺，廣布于世界各海洋中。我國南海沿岸種類較多，約有二十余種海參可供食用，海參同人 參、燕窩、魚翅齊名，是世界八大珍品之一。據(jù)《本草綱目拾遺》中記載：海參，味甘咸，補腎， 益精髓，攝小便，壯陽療痿，其性溫補，足敵人參，故名海參。海參是典型的高蛋白、低脂肪、 低膽固醇、富含礦物質和維生素的優(yōu)質食品。干海參富含蛋白質，含量商達55%，由于海參本 身膠原蛋白的包裹作用，無論是新鮮產(chǎn)品或干制品水發(fā)，蛋白質都不能有效利用和吸收，有 效利用率通常在20%左右。近年來，人們發(fā)現(xiàn)海參中含有許多具有重要生物活性的物質，如 海參多肽、多糖、皂苷等。海參多肽具有良好的溶解性和穩(wěn)定性，易消化吸收，食用安全，而 且具有降血壓、預防心腦血管疾病、抗疲勞、提高免疫力、抗腫瘤、抗氧化、延緩衰老等生物 活性。
[0003]目前，海參提取通常采用酶法提取，但是，酶法提取無法兼顧提取物的收率和蛋白 質含量，如，蘇永昌等，"海參多肽的制備工藝優(yōu)化及其抗氧化測定"，福建水產(chǎn)，2009, 2 (6): 6-9中公開了一種酶法提取海參多肽的方法，其加酶量1800U/g，酶解溫度為55°C，酶解pH 值為7. 5,酶解時間為3h。經(jīng)超濾與冷凍干燥后，多肽得率為6. 9%，蛋白質含量為94. 9%， 該方法制備的提取物蛋白質含量高，但是多肽得率太低。另外，酶法對反應條件的要求較為 苛刻，而且酶的價格高，導致生產(chǎn)成本高。
[0004]超高壓提?。╱ltrah igh-pressure ex traction, UHPE)，也稱超高冷等靜壓提 取，是指用1〇〇~lOOOMPa的流體靜壓力作用于提取溶劑和中藥的混合液上，并在預定壓 力下保持一段時間，使植物細胞內外壓力達到平衡后迅速卸壓。由于細胞內外滲透壓力忽 然增大，細胞膜的結構發(fā)生變化，使得細胞內的有效成分能夠穿過細胞的各種膜而轉移到 細胞外的提取液中，達到提取中藥有效成分的目的。超高壓提取可以有效提取黃酮類、皂苷 類、多糖類和生物堿類等有效成。
[0005]目前，未見采用超高壓方法提取海參的報道。

【發(fā)明內容】

[0006] 本發(fā)明提供了一種海參的超高壓提取方法。
[0007] 本發(fā)明海參的超高壓提取方法，包括如下步驟：
[0008] (1)取鮮海參，洗凈，加水，勻漿，得海參漿液；
[0009] (2)超高壓提取步驟（1)制得的海參漿液，提取溫度為20~80°C，壓強為 100-600MPa，提取次數(shù)為2~5次，每次不低于10min，即得提取液；
[0010] (3)離心步驟（2)的提取液，得上清液，濃縮，得濃縮液；
[0011] (4)在步驟（3)的濃縮液中加入乙醇溶液至醇含量為30~60% (v/v)，4~20°C 靜置6~48h，過濾，得上清液，濃縮，干燥，粉碎，即可。
[0012] 步驟（1)中，水的加入量為鮮海參的6~10 (v/w)倍。
[0013] 步驟（2)中，提取溫度為40°C或60°C。
[0014] 步驟（2)中，壓強為300-500MPa。優(yōu)選地，所述壓強為400MPa。
[0015] 步驟（2)中，提取時間為10~lOOmin。優(yōu)選地，所述提取時間為20-60min。進一 步優(yōu)選地，所述提取時間為40min。
[0016] 步驟（4)中，所述溶液的醇含量為60% (v/v)。
[0017] 步驟（4)中，所述靜置的溫度為8°C，時間為12小時。
[0018] 本發(fā)明還提供了前述方法制備的海參提取物。所述海參提取物的蛋白含量不低于 70% (w/w)。優(yōu)選地，所述海參提取物的蛋白含量為70. 1-89. 8% (w/w)。
[0019] 本發(fā)明采用超高壓提取方法提取海參，收率為35. 3%-42. 8%，制得的提取物中，蛋 白含量為70. 1%-89. 8%，可以兼顧收率和提取物的蛋白含量，具有良好的應用前景。
[0020] 以下通過實施例形式的【具體實施方式】，對本發(fā)明的上述內容作進一步的詳細說 明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發(fā)明權利要 求書記載的內容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。
【具體實施方式】
[0021] 本發(fā)明中，蛋白質的含量采用GB 50095-2010食品安全國家標準《食品中蛋白質 的測定》第二法(分光光度法）進行測定。
[0022] 1 范圍
[0023] 本標準規(guī)定了食品中蛋白質的測定方法。
[0024] 本標準不適用于添加無機含氮物質、有機非蛋白質含氮物質的食品測定。
[0025] 2 原理
[0026] 食品中的蛋白質在催化加熱條件下被分解，分解產(chǎn)生的氨與硫酸結合生成硫酸 銨，在PH4. 8的乙酸鈉-乙酸緩沖溶液中與乙酰丙酮和甲醛反應生成黃色的3, 5-二乙 酰-2, 6-二甲基-1，4-二氫化吡啶化合物。在波長400nm下測定吸光度值，與標準系列比 較定量，結果乘以換算系數(shù)，即為蛋白質含量。
[0027] 3試劑和材料
[0028] 除非另有規(guī)定，本方法中所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的三級水。
[0029] 3. 1 硫酸銅（CuS04 ? 5H20)。
[0030] 3. 2 硫酸鉀（K2S04)。
[0031] 3. 3 硫酸（H2S04 密度為 1. 84g/L):優(yōu)級純。
[0032] 3. 4 氫氧化鈉（NaOH)。
[0033] 3. 5 對硝基苯酚（C6H5N03)。
[0034] 3. 6 乙酸鈉（CH3C00Na ? 32H0)。
[0035] 3. 7 無水乙酸鈉（CH3C00Na)。
[0036] 3. 8 乙酸（CH3C00H):優(yōu)級純。
[0037] 3. 9 37% 甲醛（HCH0)。
[0038] 3. 10 乙酰丙酮（C5H802)。
[0039] 3. 11氫氧化鈉溶液（300g/L):稱取30g氫氧化鈉加水溶解后，放冷，并稀釋至 100mL〇
[0040] 3. 12對硝基苯酚指示劑溶液（lg/L):稱取0. lg對硝基苯酚指示劑溶于2mL95%乙 醇中，加水稀釋至l〇〇mL。
[0041] 3. 13乙酸溶液（lmol/L):量取5. 8mL乙酸（3. 8)，加水稀釋至100mL。
[0042] 3. 14乙酸鈉溶液（lmol/L):稱取41g無水乙酸鈉（3.7)或6