糖，采用從臭紅菇中分離出的紅菇酮萜為穩(wěn)定劑，所制得的微針貼片其疫苗活性 至少要高出12. 4%，但其成本至少高出4倍，目前還不宜常規(guī)化。
[0024] 以10只體重約20kg的年齡在7周左右的雌性豬為實(shí)驗(yàn)對象，其中5只作為實(shí)驗(yàn) 對象接種疫苗，另外5只不接種作為對照組。將本實(shí)施例中得到的藍(lán)耳病疫苗微針貼片按 壓在豬的左臀部，按壓時盡量使微針垂直刺入豬皮膚，按壓時間2分鐘，使可溶性疫苗微針 頂端的疫苗完全釋放到豬皮膚中，完成經(jīng)皮給藥。兩周后重復(fù)一次上述給藥。并在第二次 給藥前一天從豬尾靜脈抽血并獲得血清，通過ELISA方法測定血清中針對藍(lán)耳病疫苗的特 異性IgGl抗體的滴度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，對照組通過上述制備的藍(lán)耳病疫苗微針貼片接種的實(shí) 驗(yàn)豬血清中的特異性IgGl抗體的平均滴度滴度為61og2,對照組特異性IgGl抗體的平均滴 度滴度為01〇g2。說明通過本發(fā)明所述的可溶性高分子微針貼片用于豬藍(lán)耳病疫苗的給藥 成功，效果顯著。
[0025] 實(shí)施例3
[0026] -種便于動物疫苗給藥的微針貼片，所述微針貼片包括可溶性微針基底和可溶性 微針針體；所述可溶性微針針體載有目標(biāo)藥物，其制備材料包括由水溶性生物可降解的高 分子材料；所述尚分子材料為重均分子量為2000-300000的聚乙稀醇；所述制備材料還包 括穩(wěn)定劑，該穩(wěn)定劑為海藻糖；所述目標(biāo)藥物的載藥方式為尖端載藥；所述微針貼片是邊 長為IOmm的方形，共有100個微針，相鄰微針之間的間距是0. 6_ ;所述微針針體的形狀為 圓錐形或類圓錐形，該微針針體長度為600 μ m，底徑為500 μ m。
[0027] 本發(fā)明所述的一種便于動物疫苗給藥的微針貼片的制備方法，所述制備方法包括 以下步驟：取狂犬疫苗與疫苗佐劑配制疫苗質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為〇. 5%的疫苗溶液；取18g聚乙烯 醇、12g海藻糖、30g水混合，在90°C下加熱攪拌，完全溶解后抽真空去除氣泡，制得聚乙烯 醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%，海藻糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20 %的高濃度溶液；將疫苗溶液涂在微針模板上， 抽真空15min后，回收多余的疫苗溶液，繼續(xù)在真空環(huán)境干燥20min，待疫苗溶液沉積到微 針頂端；將高濃度溶液覆蓋到上述載有疫苗溶液的微針模板上（注：貼片基底會與微針針 體的下段一塊成形），回收多余的高濃度溶液，再次抽真空Ih后，放置于20°C通風(fēng)櫥干燥 上，固化成型后將其轉(zhuǎn)移到厚度Imm的貼片上，再次冷凍干燥0. 5h脫水，在溫度為15°C，濕 度10% RH下的密閉空間中進(jìn)行封裝，得微針貼片。
[0028] 以5只體重約IOkg的年齡在7周左右的雌性犬為實(shí)驗(yàn)對象。將本實(shí)施例中得到 的狂犬疫苗微針貼片按壓在犬的左下腹部，按壓時盡量使微針垂直刺入皮膚，按壓時間2 分鐘，使可溶性疫苗微針頂端的疫苗完全釋放到犬皮膚中，完成經(jīng)皮給藥。兩周后重復(fù)一次 上述給藥。并在第二次給藥前一天從靜脈抽血并獲得血清，測定血清中針對鏈球菌的特異 性IgGl抗體平均滴度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，對照組通過上述制備的狂犬疫苗微針貼片接種的實(shí)驗(yàn) 犬血清中的特異性IgGl抗體的平均滴度滴度為41og2,對照組特異性IgGl抗體的平均滴度 滴度為01〇g2。說明通過本發(fā)明所述的可溶性高分子微針貼片用于狂犬疫苗給藥成功，效果 顯著。
[0029] 效果驗(yàn)證
[0030] 1、微針皮膚試驗(yàn)
[0031] 預(yù)先準(zhǔn)備未脫毛的平整的新鮮豬皮，取上述制得的載負(fù)熒光模型藥物磺酰羅丹明 溶液的聚乙烯醇微針貼片，將微針針尖對準(zhǔn)豬皮表層垂直刺入，用手按壓微針貼片的背面， 按壓的時間為2min，然后取下作用后的微針貼片，可在光學(xué)顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察作 用后的豬皮。在光學(xué)顯微鏡下可觀察到，作用后的豬皮表面有100個清晰的紅色的針孔，其 他部分皮膚表面完好，紅色針孔為微針貼片的可溶性微針針體頂端載負(fù)的紫紅色模型藥物 磺酰羅丹明溶液所留，表明微針貼片的可溶性微針針體可有效地刺穿豬皮表層，在皮下溶 解并且將可溶性微針頂端載負(fù)的模型藥物磺酰羅丹明溶液釋放到豬皮之中。同樣的，在熒 光顯微鏡下可觀察到，作用后的豬皮表面有100個清晰地發(fā)出紅色熒光的針孔，其他部分 顯示黑色，說明紅色熒光的針孔為微針貼片的可溶性微針針體頂端載負(fù)的紫紅色模型藥物 磺酰羅丹明溶液所留，表明微針貼片的可溶性微針針體可有效地刺穿豬皮表層，在皮下溶 解并且將可溶性微針頂端載負(fù)的模型藥物磺酰羅丹明溶液釋放到豬皮之中。
[0032] 2、微針皮下溶解動力學(xué)
[0033] 按照實(shí)施例1中的步驟制備200個微針貼片，每個微針貼片面積Icm2有10 X 10個 微針，針體長度700 μ m，間距0. 5mm ;每個微針貼片載負(fù)模型藥物磺酰羅丹明溶液的質(zhì)量是 0.2mg。每十個微針貼片一組，一共20組。按照實(shí)施例2中的皮膚試驗(yàn)步驟，將上述微針貼 片插入相同實(shí)驗(yàn)條件的豬皮，每組微針按壓時間不同，1組按壓時間IOs后取下，2組按壓時 間是20s，3組按壓時間是30s，依次類推，第20組按壓時間是200s。在皮膚實(shí)驗(yàn)之后，檢測 每一片給藥之后的的豬皮膚上的有效給藥率，即皮膚上沉積的藥物占微針貼片總載藥量的 百分比，結(jié)果如表1所示。
[0034] 表1 :不同按壓時間的有效給藥率
[0035]
【主權(quán)項】
1. 一種便于動物疫苗給藥的微針貼片，其特征在于，所述微針貼片包括可溶性的貼片 基底和陣列分布在貼片基底上的可溶性的微針針體；所述微針針體在其頂端載有目標(biāo)藥 物，該微針針體的制備材料包括水溶性的生物可降解的高分子材料。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種便于動物疫苗給藥的微針貼片，其特征在于，所述高分 子材料為聚乙烯醇、聚羧甲基纖維素、硫酸軟骨素、聚乳酸聚乙醇酸共聚物、蠶絲蛋白、糊 精、透明質(zhì)酸、明膠中一種或幾種。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種便于動物疫苗給藥的微針貼片，其特征在于，所述動物 疫苗為藍(lán)耳疫苗、豬瘟疫苗、口蹄疫疫苗、犬咳疫苗、犬六聯(lián)疫苗、狂犬疫苗、牛流行熱疫苗、 炭疽疫苗、牛布魯氏桿菌疫苗，羊痘苗、偽狂犬病疫苗、豬瘟兔化弱毒疫苗、豬肺疫弱毒疫 苗、豬丹毒氫氧化鋁菌苗、仔豬紅痢菌苗、豬鏈球菌氫氧化鋁菌苗、豬喘氣病疫苗中的一種 或幾種。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種便于動物疫苗給藥的微針貼片，其特征在于，所述制備 材料還包括穩(wěn)定劑，該穩(wěn)定劑為蔗糖、紅菇酮萜、葡萄糖、海藻糖、殼聚糖中一種或幾種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種便于動物疫苗給藥的微針貼片，其特征在于，所述目標(biāo) 藥物的載藥方式為將藥物涂抹在微針針體頂端的外表、混勻在微針針體頂端或集中在微針 針體頂端。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種便于動物疫苗給藥的微針貼片，其特征在于，所述微針 貼片是邊長為2-50mm的方形，共有1-10000個微針，相鄰微針之間的間距是0. 2-5mm。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種便于動物疫苗給藥的微針貼片，其特征在于，所述微針 針體的形狀為圓錐形或類圓錐形，該微針針體長度為200-3000 μ m，底徑為100-1500 μ m。
8. -種如權(quán)利要求1所述的便于動物疫苗給藥的微針貼片的制備方法，其特征在于， 所述制備方法包括以下步驟：按質(zhì)量百分比將5% -50%的高分子材料、0% -50%的穩(wěn)定 劑與余量的水混合，在40°C -KKTC下攪拌溶解；溶解完全后抽真空去除氣泡，得到高濃度 溶液，密封；按計量要求，配制濃度范圍0. l-l〇〇〇mg/ml的疫苗溶液；取疫苗溶液0. 01-5ml 涂在微針模板上，抽真空〇. 5 -6 Om i η后，回收多余的疫苗溶液，繼續(xù)在真空環(huán)境干燥 0. 5-60min，待疫苗溶液沉積到微針頂端；取高濃度溶液0. 01-5ml涂到上述載有疫苗溶液 的微針模板上，再次抽真空l_300min ;冷凍干燥5-600min，干燥后脫模，在溫度為15-25°C， 濕度10% -30% RH下的密閉空間中進(jìn)行封裝，得微針貼片。
【專利摘要】本發(fā)明屬于給藥設(shè)備技術(shù)領(lǐng)域，具體來說，涉及一種便于動物疫苗給藥的微針貼片及其制備方法。所述微針貼片包括可溶性的貼片基底和陣列分布在貼片基底上的可溶性的微針針體；所述微針針體在其頂端載有目標(biāo)藥物，該微針針體的制備材料包括由水溶性的生物可降解的高分子材料。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所述的便于動物疫苗給藥的微針貼片在接種疫苗時不會引起動物的懼怕反應(yīng)，易于給藥，操作方便，不需要對接種人員培訓(xùn)；單人即可完成接種疫苗工作，效率高；完成疫苗接種時不需額外對動物進(jìn)行標(biāo)記；一次性使用，避免了交叉感染的可能性；所用材料可生物降解，無醫(yī)療垃圾產(chǎn)生；制作方法簡單經(jīng)濟(jì)；產(chǎn)品無需冷藏保存或真空保存等；運(yùn)輸方便。
【IPC分類】A61M37-00, A61K9-70, A61K39-12, A61P31-14
【公開號】CN104706626
【申請?zhí)枴緾N201510131662
【發(fā)明人】郭新東, 王淇磊, 陳洋
【申請人】北京化工大學(xué)
【公開日】2015年6月17日
【申請日】2015年3月25日