乳汁萃取物在制備用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的組成物的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明是有關(guān)于一種乳汁萃取物的用途；具體而言，本發(fā)明是有關(guān)于一種乳汁萃 取物用于制備預(yù)防、緩解、或治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的組成物的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis, RA)是一種自體免疫疾病，其發(fā)生是 與遺傳及感染有關(guān)。RA的致病機(jī)理目前推測是由于自體或外來的一未知抗原與第二型 組織相容復(fù)合體分子（MHC II)及抗原呈現(xiàn)細(xì)胞（APC)結(jié)合后，與T細(xì)胞受器（TCR)連結(jié) 而活化T細(xì)胞。T細(xì)胞因此產(chǎn)生發(fā)炎性的細(xì)胞激素例如腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor α，TNF- α )與介白素 1、6 (interleukinsl, 6 ;IL_1, 6)，以及驅(qū)化因子（chemmokins) 與附著分子（adhesion molecules)。這些分子促使發(fā)炎細(xì)胞進(jìn)入關(guān)節(jié)腔，造成滑液囊發(fā)炎； T細(xì)胞則產(chǎn)生血管內(nèi)皮生長因子，使局部血管新生，讓更多發(fā)炎細(xì)胞浸潤；發(fā)炎細(xì)胞激素如 TNF-α、IL-1、及IL-6會刺激關(guān)節(jié)中的巨噬細(xì)胞與纖維母細(xì)胞分泌軟骨分解酵素，造成軟 骨的破壞。
[0003] 因此，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎也為一種慢性發(fā)炎性的關(guān)節(jié)疾病。病程初期大都發(fā)生于手、 腕、膝、足等四肢關(guān)節(jié)，嚴(yán)重時(shí)會影響頸椎關(guān)節(jié)。癥狀包含熱、腫、痛及僵硬感。進(jìn)入病程中 晚期，關(guān)節(jié)可能變形、嚴(yán)重疼痛，肢體甚至失能。因此不但使患者生活品質(zhì)受到影響，也失去 工作能力而造成社會負(fù)擔(dān)。
[0004] 目前對于RA的治療包含減輕疼痛及降低發(fā)炎反應(yīng)，其中有非類固醇/類固醇抗發(fā) 炎藥的使用及/或免疫抑制劑的使用。一般而言，藥物、藥劑的使用透過抑制免疫系統(tǒng)，減 少對于關(guān)節(jié)的破壞。然而，藥物治療產(chǎn)生的副作用可包含免疫力下降，使患者易受微生物感 染，或發(fā)生內(nèi)分泌失調(diào)。
[0005] 除此以外，在RA的治療上也有免疫療法的采用。舉例來說，九十年代始采用發(fā)炎 細(xì)胞激素如TNF-a的阻斷抗體以減輕關(guān)節(jié)腫脹與疼痛、降低急性發(fā)炎反應(yīng)。然而TNF-a的 抗體治療一來可能因病患本身對該阻斷抗體產(chǎn)生抗體而逐漸失效，二來此被動免疫方式有 賴于持續(xù)用藥，并且產(chǎn)生花費(fèi)；再者，在正常情況下，TNF-a是免疫系統(tǒng)的重要細(xì)胞激素， TNF-α受阻斷將產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用。
[0006] 因此，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物治療或阻斷性抗體治療皆伴隨有副作用產(chǎn)生，在進(jìn) 行治療的同時(shí)也對抗人體內(nèi)天然的免疫機(jī)制。
[0007] 另一方面，一種稱為口服耐受性的免疫現(xiàn)象也應(yīng)用于自體免疫疾病的預(yù)防、緩解、 或治療?？诜褪苄?，簡單來說，在物質(zhì)經(jīng)由口腔進(jìn)入腸道之后，腸道粘膜的免疫系統(tǒng)會產(chǎn) 生認(rèn)識該物質(zhì)的抗原特異性調(diào)節(jié)型T細(xì)胞。此調(diào)節(jié)型T細(xì)胞產(chǎn)生的抑制性細(xì)胞激素可抑制 發(fā)炎型T細(xì)胞的活性，避免發(fā)炎反應(yīng)或自體免疫反應(yīng)。因此，口服耐受性一方面可伴隨飲食 產(chǎn)生，二方面是一種天然的免疫機(jī)制。因此，在藥物與阻斷性抗體治療以外，透過攝取食物 啟動天然免疫機(jī)制是在預(yù)防、緩解、或治療自體免疫疾病上一種值得更多關(guān)注的方式。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于提供一種乳汁萃取物的用途，用于制備預(yù)防、緩解、或治療類風(fēng) 濕性關(guān)節(jié)炎的組成物。
[0009] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種乳汁萃取物的用途，用于制備調(diào)節(jié)第一型輔助性 T細(xì)胞反應(yīng)的組成物。
[0010] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種乳汁萃取物的用途，用于制備預(yù)防、緩解、或治療 自體免疫反應(yīng)所致四肢腫脹的組成物。
[0011] 具本發(fā)明用途的乳汁萃取物每100公克中含有80公克以上的蛋白質(zhì)量，有大于 600毫克的免疫球蛋白G，且由包括下列各步驟的方法所生成：使一產(chǎn)乳動物維持在一超高 免疫狀態(tài)；自該產(chǎn)乳動物收集乳汁；在不大于80°C的溫度條件下進(jìn)行該乳汁的滅菌；去除 乳汁中的脂肪而生成一脫脂乳；最小化該脫脂乳中小于5, 000道爾頓的分子的量；以及移 除該脫脂乳的水分，而完成該乳汁萃取物。
[0012] 在一實(shí)施例中，每公克的乳汁萃取物具有6000以上的抗體力價(jià)。
[0013] 在一實(shí)施例中，是以80°C與65°C之間的溫度條件滅菌10至20秒鐘。
[0014] 在一實(shí)施例中，是利用可保留5, 000道爾頓以上的分子的薄膜進(jìn)行該脫脂乳的薄 膜通透，而最小化該脫脂乳中小于5, 000道爾頓的分子的量。
[0015] 在一實(shí)施例中，是利用溶劑交換法降低該脫脂乳中小于5, 000道爾頓的分子的 量，而最小化該脫脂乳中小于5, 000道爾頓的分子的量。
[0016] 在一實(shí)施例中，最小化該脫脂乳中小于5, 000道爾頓的分子的量的步驟包含降低 該脫脂乳中乳糖和鹽類含量。
[0017] 在一實(shí)施例中，移除該脫脂乳的水分的步驟包含蒸除該脫脂乳的水分及干燥該脫 脂乳的至少其一。
[0018] 由具有本發(fā)明用途的乳汁萃取物制備而得的組成物抑制發(fā)炎相關(guān)細(xì)胞激素的分 泌，其中該細(xì)胞激素包含IL-2及INF-α的至少其一。
[0019] 由具有本發(fā)明用途的乳汁萃取物制備而得的組成物抑制發(fā)炎相關(guān)細(xì)胞激素的分 泌，其中該細(xì)胞激素包含IL-17、IL-6、IL-1、IL12及TNF- α的至少其一。
[0020] 由具有本發(fā)明用途的乳汁萃取物制備而得的組成物抑制發(fā)炎相關(guān)細(xì)胞激素的分 泌，其中該發(fā)炎相關(guān)細(xì)胞激素由包含脾臟的器官所分泌及/或由腹腔細(xì)胞所分泌。
[0021] 由具有本發(fā)明用途的乳汁萃取物制備而得的組成物降低第一型輔助性T細(xì)胞反 應(yīng)。
[0022] 由具有本發(fā)明用途的乳汁萃取物制備而得的組成物降低第一型輔助性T細(xì)胞特 異性免疫球蛋白G2a(IgG2a)的數(shù)量。
[0023] 由具有本發(fā)明用途的乳汁萃取物制備而得的組成物降低血清中膠原蛋白特異性 免疫球蛋白的數(shù)量。
[0024] 由具有本發(fā)明用途的乳汁萃取物制備而得的組成物是以口服攝入，且該攝入包括 每日每公斤體重?cái)z入具有相當(dāng)于一重量的乳汁萃取物所含成分的該組成物。
[0025] 在一實(shí)施例中，由具有本發(fā)明用途的乳汁萃取物制備而得的組成物是以口服攝 入，該攝入包括每日每公斤體重?cái)z入具有相當(dāng)于一重量的乳汁萃取物所含成分的該組成 物，且該重量不大于180mg。
【附圖說明】
[0026] 圖I (A)~I (E)所示為腫脹計(jì)分0~4與所對應(yīng)的腫脹情形。
【具體實(shí)施方式】
[0027] 本發(fā)明提供一種乳汁萃取物的用途，用于制備預(yù)防、緩解、或治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 的組成物，或用于制備調(diào)節(jié)第一型輔助性T細(xì)胞反應(yīng)的組成物，或用于制備預(yù)防、緩解、或 治療自體免疫反應(yīng)所致四肢腫脹的組成物，其中每100公克的該乳汁萃取物含有80公克以 上的蛋白質(zhì)量，具有大于600毫克的免疫球蛋白G，且該乳汁萃取物可由包括如下步驟的方 法生成。舉例而言，該些步驟包含使一產(chǎn)乳動物維持在超高免疫狀態(tài)、自該產(chǎn)乳動物收集乳 汁、在不大于80°C的溫度條件下進(jìn)行該乳汁的滅菌、去除乳汁中的脂肪而生成脫脂乳、最小 化該脫脂乳中小于5, 000道爾頓的分子的量以及移除該脫脂乳的水分，而完成該乳汁萃取 物。
[0028] 在本發(fā)明實(shí)施例中，前述使一產(chǎn)乳動物維持在超高免疫狀態(tài)的步驟可包含選擇抗 原、通過初始免疫使產(chǎn)乳動物產(chǎn)生致敏化反應(yīng)以及引發(fā)并維持超高免疫狀態(tài)等步驟，其中 該產(chǎn)乳動物較佳為牛與羊。在本發(fā)明較佳實(shí)施例中，可選擇例如Bos taurus (家牛、黃牛、 歐洲牛)作為產(chǎn)乳動物。使一產(chǎn)乳動物維持在超高免疫狀態(tài)的各步驟分別進(jìn)一步描述如下：
[0029] 選擇抗原：
[0030] 在本發(fā)明實(shí)施例中，選擇的抗原為細(xì)菌性抗原，包含沙門氏桿菌（Salmonella enteritidis)、模仿葡萄球菌（Staphylococcus simulans)、表皮鏈球菌（Streptococcus epidermidis)、Al 型產(chǎn)胺鏈球菌（Streptococcus pyogenes，type Al)、A3 型產(chǎn)胺鏈球 菌（Streptococcus pyogenes, type A3)、A5 型產(chǎn)月農(nóng)鏈球菌（Streptococcus pyogenes, type A5)、A8 型產(chǎn)胺鏈球菌（Streptococcus pyogenes，type A8)、A12 型產(chǎn)胺鏈球菌 (Streptococcus pyogenes，type Al2)、A14 型產(chǎn)胺鏈球菌（Streptococcus pyogenes， type A14)、A18 型產(chǎn)胺鏈球菌（Streptococcus pyogenes，type A18)、A22 型產(chǎn)胺鏈球菌 (Streptococcus pyogenes，type A22)、產(chǎn)氣桿菌（Aerobacter)、大腸桿菌（Escherichia coli)、綠胺桿菌（Pseudomonas aeruginosa)、肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae)、鼠 傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium)、腸道沙門氏菌（Salmonella enterica)、流 行性感冒嗜血桿菌（Haemophilus influenzae)、和緩鏈球菌（Streptococcus mitis)、 普通變形桿菌（Proteus vulgaris)、赤痢桿菌（Shigella dysenteriae)、肺炎雙球菌 (Streptococcus pneumoniae)、粉刺出油酸菌（Propionibacterium acnes)、突變鏈球菌 (Streptococcus mutans)以及無乳鏈球菌等細(xì)菌（Streptococcus agalactiae)的至少 其一。另一方面，并可使用抗原的多價(jià)混合物。在本發(fā)明另一實(shí)施例中，可采用SlOO免 疫原（SlOOimmunogen，D. A. Gingerich, C. A. McPhillips，Regulatory Toxicology and Pharmac〇l〇gy41 (2005) 102-112)致敏產(chǎn)乳動物及引發(fā)超高免疫狀態(tài)。
[0031] 通過初始免疫使產(chǎn)乳動物產(chǎn)生致敏化反應(yīng)：
[0032] 此步驟是包含使產(chǎn)乳動物攝入前述的抗原、抗原的多價(jià)混合物或免疫原(下皆稱 致敏原)，且方式可為以肌肉注射、靜脈注射、腹膜內(nèi)注射、直腸注射、皮內(nèi)注射、皮下注射或 使該產(chǎn)乳動物口服攝入適當(dāng)劑量的致敏原。
[0033] 引發(fā)并維持超高免疫狀態(tài)：
[0034] 一旦該產(chǎn)乳動物已經(jīng)顯示致敏，則反復(fù)于適當(dāng)時(shí)間間隔