一種輔酶i納米分散體及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及腸胃藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種輔酶I納米分散體及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 輔酶I (NAD)全名為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，也稱為二磷酸吡啶核苷酸（DPN)或 輔脫氫酶（codehydrogenase) I，是一種轉(zhuǎn)遞質(zhì)子的輔酶，它出現(xiàn)在細(xì)胞很多代謝反應(yīng)中。 NADH (或NADH+H")是其還原形式。其分子式為C21H27N7O 14P2，分子量為663. 425,比旋光度：
[a]；；3-34.8。（1%，水）。
[0003] NAD極易吸濕，儲(chǔ)存溫度為-20°C，其固體在干燥器內(nèi)0°C或室溫時(shí)穩(wěn)定；在中 性或微酸性溶液（PH3-7)中，(TC時(shí)可穩(wěn)定2周以上；在堿性溶液中極易變質(zhì)；但加熱 易分解。NAD溶于水（50mg/mL)，不溶于丙酮等有機(jī)溶劑；pH為7. 5時(shí)最大吸收波長(zhǎng) 259nm(e17800)，最小吸收波長(zhǎng) 230nm(e8000)。
[0004]NAD+是脫氫酶的輔酶，如乙醇脫氫酶（ADH)，在糖酵解、糖異生、三羧酸循環(huán)及呼 吸鏈中發(fā)揮著不可替代的作用。中間產(chǎn)物會(huì)將脫下的氫遞給NAD，使之成為NADH+H+。而 NADH+H+則會(huì)作為氫的載體，在呼吸鏈中通過化學(xué)滲透偶聯(lián)的方式，合成ATP。
[0005] 現(xiàn)有技術(shù)中輔酶I的口服制劑往往難以到達(dá)可進(jìn)行吸收的腸道里，先需要制備一 種在胃內(nèi)不溶解但進(jìn)入腸道后分解釋放的制劑，并且要進(jìn)一步提高制劑中輔酶I的含量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 基本【背景技術(shù)】存在的技術(shù)問題，本發(fā)明提出了一種輔酶I納米分散體及其制備方 法，本發(fā)明的載體含量低，尤其是腸載體的含量低，相應(yīng)的輔酶I含量增多，并且其輔酶I可 以在胃內(nèi)不釋放而進(jìn)入腸內(nèi)釋放。
[0007] 本發(fā)明提出的一種輔酶I納米分散體，包括輔酶I和包覆在輔酶I外側(cè)的載 體，載體包括在腸PH下可溶但在胃pH下不溶的腸載體，腸載體占輔酶I納米分散體的 30_48wt%。
[0008] 本發(fā)明可以含有30_70wt%的輔酶I和30_70wt%的載體，載體包括腸載體（即在 腸pH下可溶，但是在胃pH下不溶），其中腸載體在本發(fā)明中的含量為30_48wt%。
[0009] 優(yōu)選地，本發(fā)明可以含有40-70wt%的輔酶I和30-60wt%的載體，載體包括腸載 體（即在腸PH下可溶，但是在胃pH下不溶），其中腸載體在本發(fā)明中的含量為30-48wt %。
[0010] 優(yōu)選地，本發(fā)明可以含有50-70wt%的輔酶I和30-50wt%的載體，載體包括腸載 體（即在腸PH下可溶，但是在胃pH下不溶），其中腸載體在本發(fā)明中的含量為30-48wt %。 [0011] 腸載體占本發(fā)明的（以及通過本發(fā)明的方法形成的輔酶I納米分散體）的 30_48wt %,可以為 31wt %、33wt %、35wt %、38wt %、40wt %、42wt %、44wt %、45wt %、 47Wt%、48Wt%。這種試劑直接摻入到分散體中作為腸載體或結(jié)構(gòu)化試劑，使得輔酶I傳遞 到腸中而不是傳遞到胃中。
[0012] "腸載體"是指沿著消化道能影響腸pH溶解的載體或結(jié)構(gòu)化試劑。任何在腸pH下 可溶但是在胃pH下不溶的腸載體均可用于本發(fā)明。
[0013] 優(yōu)選地，在本發(fā)明第一方面所述的輔酶I納米分散體中，所述輔酶I納米分散體的 平均粒徑為20-200nm。
[0014] 測(cè)定本發(fā)明的分散產(chǎn)物的顆粒尺寸的優(yōu)選的方法使用動(dòng)態(tài)光散射儀器（Nano-s， 由 Malvern Instruments UK 制造）。具體地講，Malvern Instruments Nano-S 使用紅色 (633nm) 4mW氦-氖激光器來照射裝有材料的懸浮液的標(biāo)準(zhǔn)光學(xué)品質(zhì)UV比色杯。在本申請(qǐng) 中引用的顆粒尺寸為由使用標(biāo)準(zhǔn)方法的儀器所得到的"Z-平均"直徑。固體產(chǎn)物的顆粒尺 寸為由固體在水中的溶液所得到的顆粒尺寸的測(cè)定以及顆粒尺寸的測(cè)定所推斷出的顆粒 尺寸。
[0015] 在最終的輔酶I納米分散體中降低顆粒尺寸顯著有利于改進(jìn)輔酶I材料的可用 性，而當(dāng)尋求改進(jìn)的生物利用度時(shí)，或者在需要避免材料局部高濃度的類似的應(yīng)用中尤為 有利。此外，具有小顆粒尺寸的輔酶I納米分散體比具有較大顆粒尺寸的輔酶I納米分散 體更穩(wěn)定。
[0016] 優(yōu)選地，腸載體為乙酸鄰苯二甲酸纖維素、醋酸纖維素苯三酸酯、羥丙基甲基纖維 素鄰苯二甲酸酯、醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯、羧甲基乙基纖維素、聚醋酸乙烯鄰苯二 甲酸酯、甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物中的一種或兩種以上的組合。
[0017] 優(yōu)選地，載體除了上述腸載體，還可包括水溶性載體。具體地，本發(fā)明可以含有 30-60wt%的輔酶I和40-70wt%的載體，載體包括水溶性載體和腸載體（即在腸pH下可 溶，但是在胃PH下不溶），其中腸載體在本發(fā)明中的含量為30-45wt%，其余為水溶性載體。
[0018] 合適的水溶性聚合物載體材料的實(shí)例包括：
[0019] (a)天然聚合物，例如天然存在的樹膠如胍爾豆膠、藻酸鹽、刺槐豆膠或多糖如右 旋糖酐；
[0020](b)纖維素衍生物，例如黃原膠、木糖型葡聚糖（xyloglucan)、乙酸纖維素、甲基 纖維素、甲基-乙基纖維素、羥基-乙基纖維素、羥基-乙基甲基-纖維素、羥基-丙基纖維 素、羥基-丙基甲基纖維素、羥基-丙基丁基纖維素、乙基羥基-乙基纖維素、羧基-甲基纖 維素及其鹽（例如鈉鹽-SCMC)、或羧基-甲基羥基乙基纖維素及其鹽（例如鈉鹽）；
[0021] (C)由兩種或更多種選自以下的單體制備的均聚物或共聚物：乙烯醇、丙烯酸、甲 基丙烯酸、丙烯酰胺、甲基丙烯酰胺、丙烯酰胺甲基丙磺酸鹽（acrylamide methylpropane sulphonates)、丙烯酸氨基烷基酯（aminoalkylacrylates)、甲基丙烯酸氨基烷基酯 (aminoalkyl methacrylate)、丙烯酸輕乙酯、甲基丙烯酸輕乙酯、乙烯基批咯燒酮、乙烯基 咪唑、乙烯基胺、乙烯基吡啶、乙二醇及其它烷撐二醇、環(huán)氧乙烷及其它烯化氧、哌嗪、苯乙 烯磺酸鹽、丙烯酸乙二醇酯和甲基丙烯酸乙二醇酯；
[0022] (e)環(huán)糊精，例如P _環(huán)糊精；以及
[0023] (f)它們的混合物。
[0024] 當(dāng)聚合物材料為共聚物時(shí)，其可以是統(tǒng)計(jì)學(xué)共聚物（在此以前也稱為無規(guī)共聚 物）、嵌段共聚物、接枝共聚物或超支化共聚物。除了所列的那些以外，還可以包括不是以上 所列的那些的共聚單體，只要這些共聚單體的存在不會(huì)破壞所得到的聚合物材料的水溶性 性質(zhì)即可。
[0025]優(yōu)選的水溶性聚合物載體材料為聚乙二醇（PEG)、聚乙烯基吡咯烷酮（PVP)、聚 (2-乙基-2-噁唑啉）、聚乙烯醇（PVA)、羥丙基纖維素、羥丙基-甲基纖維素（HPMC)和藻酸 鹽。
[0026] 當(dāng)水溶性載體還包括表面活性劑時(shí)，表面活性劑可以是非離子、陰離子、陽離子、 兩性或兩性離子表面活性劑。
[0027] 非離子表面活性劑可以為乙氧基化的甘油三酯、乙氧基脂肪醇（fatty alcohol ethoxylates)、乙氧基烷基酚、乙氧基脂肪酸、乙氧基脂肪酰胺、乙氧基脂肪胺、山梨糖醇鏈 燒酸酯、乙基化的山梨糖醇鏈燒酸酯、烷基乙氧基化物（alkyl ethoxylates)、Pluronics?、 烷基多糖昔、乙氧基硬脂酸、烷基多糖昔。
[0028]陰離子表面活性劑可以為烷基醚硫酸鹽（alkylether sulfates)、烷基醚羧酸 鹽（alkylether carboxylate)、烷基苯磺酸鹽、烷基醚磷酸鹽、二烷基磺基琥拍酸鹽、肌 氨酸鹽、烷基磺酸鹽、皂、烷基硫酸鹽、烷基羧酸鹽、烷基磷酸鹽、鏈烷烴磺酸鹽（paraffin sulfonates)、二代正鏈烷烴磺酸鹽（secondary n-alkane sulfonates)、a-烯烴磺酸鹽、 羥乙基磺酸鹽。
[0029] 陽離子表面活性劑可以為脂肪胺鹽、脂肪二胺鹽、季銨化合物、磷表面活性 劑、琉表面活性劑（sulfonium surfactants)、薩爾風(fēng)克表面活性劑（sulfonxonium surfactants)〇
[0030] 兩性離子表面活性劑可以為氨基酸（例如甘氨酸、甜菜堿、氨基丙酸）的N-烷基 衍生物、咪唑啉表面活性劑、氧化胺、酰氨基甜菜堿。
[0031] 可以使用多種水溶性載體的混合物。可以使用多種表面活性劑的混合物。在這種 混合物中，可以存在為液體的單個(gè)組分，條件是整個(gè)載體材料是固體。
[0032] 烷氧基化的非離子表面活性劑（alkoxylated nonionic' s)(優(yōu)選為PEG/PPG Pluronic?材料）、苯酚-乙氧基化物（phenol-ethoxylates)(優(yōu)選為TRITON?材料）、烷基 磺酸鹽（特別是SDS)、酯表面活性劑（優(yōu)選為Span?和Tween?型的脫水山梨糖醇酯）和 陽離子表面活性劑（優(yōu)選為十六烷基三甲基溴化銨-CTAB)可以優(yōu)選作為腸載體的助劑。
[0033] 本文中提及"載體"和"載體材料"是為了涉及包括在輔酶I納米分散體中的所有 載體，即腸載體和/或水溶性載體。本文中具體提及腸載體、水溶性載體時(shí)，則僅涉及那些 具體的載體。
[0034] 在本發(fā)明的上下文中，用于載體的"高溶解度"是指在中性pH和環(huán)境溫度（20°C ) 下其在水中的溶解度大于l〇g/L，優(yōu)選大于15g/L。這種溶解度水平解釋了在本說明書中水 溶性的含義。
[0035] 在本發(fā)明的上下文中，用于載體的"低溶解度"是指在中性pH和環(huán)境溫度（20°C ) 下其在水中的溶解度小于l〇g/L，優(yōu)選小于5g/L，更優(yōu)