一種總蟾毒內(nèi)酯納米膠束制劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，涉及一種總蟾毒內(nèi)酯納米膠束及其制備方法，更具體地說，本發(fā)明涉及一種有助于避免體內(nèi)的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬并可以穩(wěn)定貯存的總蟾毒內(nèi)酯納米膠束及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]華蟾素提取自中藥中華大蟾蜍皮，系采用傳統(tǒng)方法水提醇沉法值得的中藥注射液，華蟾素注射液抗腫瘤療效顯著，但存在有效成分含量低，雜質(zhì)多，質(zhì)量及臨床療效不穩(wěn)定、毒副作用大等嚴重缺陷。經(jīng)研宄發(fā)現(xiàn)，華蟾素注射液中具抗腫瘤活性的總蟾毒內(nèi)酯類(蟾毒配基類、蟾蜍毒素類)成分含量極低，主要為水溶性吲哚類生物堿(如5-羥色胺、蟾蜍色胺、蟾蜍特尼、蟾蜍硫黃等)類、氨基酸等成分，而大量的內(nèi)酯類有效成分損失殆盡，目前尚未有生物堿成分有抗腫瘤活性的研宄報道，且臨床研宄認為華蟾素不良反應(yīng)心律失常、局部靜脈刺激反應(yīng)、皮膚反應(yīng)、哮喘、超敏反應(yīng)等均為水溶性吲哚類生物堿成分的藥理作用所致。因此，提取純化華蟾素的重點在于富集內(nèi)酯類成分和去除生物堿及其他雜質(zhì)成分，特別是生物堿成分。
[0003]對華蟾素提取液進行分離純化，得華蟾素有效部位一一總蟾毒內(nèi)酯，主要含有蟾毒配基(resibufogenin)、華蟾酥毒基(cinobufagin)、蟾毒靈(bufalin)、蟾毒它靈(Bufotalin)、日蟾毒它靈-3-半辛二酸醋(Gamabufotalin-3-hydrogenSuberate)、蟾餘靈-3- 丁二酰精氨酸酯、華蟾毒精-3- 丁二酰精氨酸酯等內(nèi)酯類成分。目前市場上中藥注射液普遍存在的諸多問題，開發(fā)出工藝先進、質(zhì)量穩(wěn)定、療效高、毒副作用少的中藥注射制劑是十分必要的，鑒于總蟾毒內(nèi)酯具有獨特的技術(shù)優(yōu)勢，我們對華蟾素注射液進行二次深度開發(fā)，研制了總蟾毒內(nèi)酯凍干制劑一一 “注射用華蟾內(nèi)酯”。
[0004]聚合物膠束制劑作為藥物載體的開發(fā)研宄源于20世紀90年代，它是由兩親性聚合物在水溶液中自發(fā)形成的一種自組裝結(jié)構(gòu)。聚合物膠束粒徑一般小于lOOnm，具有載藥量高、載藥范圍廣、穩(wěn)定性好、體內(nèi)滯留時間長等特點，可有效地提高藥物的穩(wěn)定性和生物利用度，減輕不良反應(yīng)。然而由單一聚合物自組裝形成的膠束由于鏈段數(shù)量的限制，通常面臨載藥量低，穩(wěn)定性差，生物利用度低等問題。近年來出現(xiàn)了大量有關(guān)納米膠束的研宄報道，納米膠束是2種或2種以上表面活性劑按一定比例混合而得到的膠束體系，其穩(wěn)定性高于單組分膠束。與單一膠束比較，包載的藥物及其在納米膠束的藥物穩(wěn)定性得到很大的提高。通過形成納米膠束，可實現(xiàn)調(diào)整膠束的釋放和功能。
[0005]綜上所述，將總蟾毒內(nèi)酯制成納米膠束，可達到改善藥物的水溶性，提高藥物的生物利用度，延長藥物作用時間等目的。因此，研宄開發(fā)出總蟾毒內(nèi)酯的新劑型是非常必要的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種總蟾毒內(nèi)酯納米膠束；
[0007]本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供一種總蟾毒內(nèi)酯納米膠束凍干針劑；
[0008]本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供一種總蟾毒內(nèi)酯納米膠束及總蟾毒內(nèi)酯納米膠束凍干針劑的制備方法。
[0009]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是:
[0010]本發(fā)明首先公開了一種總蟾毒內(nèi)酯納米膠束，包括以下各組分:總蟾毒內(nèi)酯、聚乙二醇衍生化磷脂、聚氧乙烯-聚氧丙烯聚合物、凍干支架劑、PH調(diào)節(jié)劑、NaCl和注射用水。
[0011]各組分的重量百分含量為:總蟾毒內(nèi)酯0.01?0.3%，聚乙二醇衍生化磷脂I?15%、聚氧乙烯-聚氧丙烯聚合物I?15%、凍干支架劑5?20%、pH調(diào)節(jié)劑0.01-0.05%,NaCl0.2-0.4%，余量為注射用水；
[0012]其中，聚乙二醇衍生化磷脂選自聚乙二醇2000 二硬脂酸磷脂酞乙醇胺、聚乙二醇4000 二棕相酞磷脂酞乙醇胺、聚乙二醇2000 二油酞磷脂酞乙醇胺和聚乙二醇4000磷脂酞乙醇胺；優(yōu)選聚乙二醇2000 二硬脂酸磷脂酞乙醇胺、聚乙二醇4000 二棕相酞磷脂酞乙醇胺任意一種或兩種。
[0013]所述聚氧乙烯-聚氧丙烯聚合物選自泊洛沙姆F68、F108、F127、P105、L61、P123、L121。優(yōu)選泊洛沙姆F68、F108任意一種或兩種或不加入，但加入后可明顯降低膠束粒徑，增加包封率。
[0014]所述凍干支持劑選自乳糖、甘露醇、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、木糖醇、麥芽糖中的一種或多種。優(yōu)選為甘露醇、葡萄糖中任意一種或兩種。
[0015]所述pH值調(diào)節(jié)劑選自鹽酸、乳酸、氫氧化鈉、枸櫞酸、枸櫞酸鈉、酒石酸、酒石酸鈉、醋酸、醋酸鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉中的一種或多種。優(yōu)選為枸櫞酸和枸櫞酸鈉緩沖液或磷酸鹽緩沖液
[0016]本發(fā)明還公開了一種所述總蟾毒內(nèi)酯納米膠束的制備方法，包括以下步驟:
[0017](I)按上述原輔料重量百分比分別稱取總蟾毒內(nèi)酯、聚乙二醇衍生化磷脂、凍干支架劑、PH調(diào)節(jié)劑、NaCl和水，備用；
[0018](2)將總蟾毒內(nèi)酯和聚乙二醇衍生化磷脂溶于有機溶劑中，混合分散均勻，減壓除去有機溶劑，得到總蟾毒內(nèi)酯的聚合物脂膜，其中所述有機溶劑為甲醇、乙醇、氯仿、二氯甲烷、正己烷、丙酮中的一種或幾種；
[0019](3)向所得的聚合物脂膜中加入溶有凍干支架劑和的水溶液，再加入pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH值為6.0?8.0，水浴加熱進行水化，得到總蟾毒內(nèi)酯的聚乙二醇衍生化磷脂包載納米膠束溶液；
[0020](4)將得到的膠束溶液冷凍干燥，得到總蟾毒內(nèi)酯納米膠束的凍干制劑。
[0021]本發(fā)明所制備的總蟾毒內(nèi)酯納米膠束粒徑為80-250nm，包封率為50% -90%。
[0022]本發(fā)明中所述聚乙二醇衍生化磷脂、氧乙烯-聚氧丙烯聚合物有機溶劑的不同種類及其不同用量對總蟾毒內(nèi)酯納米膠束平均粒徑、多分散系數(shù)(roi)、包封率起重要影響作用。其中，總蟾毒內(nèi)酯與聚乙二醇2000 二硬脂酸磷脂酞乙醇胺、甘露醇、枸櫞酸和NaCl制備的總蟾毒內(nèi)酯納米膠束質(zhì)量評價較好。優(yōu)選的，總蟾毒內(nèi)酯0.lmg，聚乙二醇2000 二硬脂酸磷脂酞乙醇胺8mg、泊洛沙姆F6810mg、甘露醇12mg、枸橡酸0.02mg和NaCl0.3mg，無水乙醇與丙酮(體積比1:2)所制得的總蟾毒內(nèi)酯納米膠束平均粒徑為130.7nm，包封率為85.3%，質(zhì)量評價最好。因為，總蟾毒內(nèi)酯納米膠束的粒徑越小、分散系數(shù)越小，其制得的凍干粉針劑藥物的靶向性越好；單位投藥量包封率越大，其可作用于腫瘤細胞的藥量越大，效果越好。
[0023]本發(fā)明還公開了一種所述總蟾毒內(nèi)酯納米膠束凍干針劑的制備方法，包括以下步驟:按照所述配比向總蟾毒內(nèi)酯納米膠束中加入凍干保護劑，冷凍干燥，即得。
[0024]本發(fā)明所制得總蟾毒內(nèi)酯納米膠束凍干針劑用注射用水溶解，以納米粒大小、粒徑分布和包封率做質(zhì)量評價，復(fù)溶后所測得的總蟾毒內(nèi)酯納米膠束粒徑為80-250nm，包封率為30% -90% ;最優(yōu)的，復(fù)溶后所測得的總蟾毒內(nèi)酯納米膠束平均粒徑為130.7nm，包封率為85.3%o
[0025]本發(fā)明技術(shù)方案與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下有益效果:
[0026]本發(fā)明總蟾毒內(nèi)酯納米膠束凍干針劑復(fù)溶后所測得的總蟾毒內(nèi)酯納米膠束粒徑為80-250nm，包封率為30% -90% ;能夠有效提高總蟾毒內(nèi)酯的腫瘤細胞靶向性，降低毒副作用，同時具有緩釋、延長生物半衰期的作用。
【具體實施方式】
[0027]下面結(jié)合具體實施例來進一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點和特點將會隨著描述而更為清楚。但是應(yīng)理解所述實施例僅是范例性的，不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對本發(fā)明技術(shù)方案的細節(jié)和形式進行修改或替換，但這些修改或替換均落入本發(fā)明的保護范圍。
[0028]實施例1總蟾毒內(nèi)酯納米膠束的制備
[0029]將Img總蟾毒內(nèi)酯和SOmg聚乙二醇2000 二硬脂酸磷脂酞乙醇胺溶于ImL無水乙醇與丙酮(體積比1:1)混合溶液中有機溶劑中，混合分散均勻，減壓除去有機溶劑，得到總蟾毒內(nèi)酯的聚合物脂膜。將120mg甘露醇、10mg泊洛沙姆F68溶于0.7mL注射用水中，加入所得的聚合物脂膜中，再加入PH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH值為7.0，水浴加熱至60°C進行水化2h，得到總蟾毒內(nèi)酯的聚乙二醇衍生化磷脂包載納米膠束溶液；將得到的膠束溶液冷凍干燥，得到總蟾毒內(nèi)酯納米膠束的凍干制劑。
[0030]檢測:總蟾毒內(nèi)酯納米膠束平均粒徑為130.7nm，包封率為85.3%。
[0031]實施例2總蟾毒內(nèi)酯納米膠束的制備
[0032]將Img總蟾毒內(nèi)酯和80mg聚乙二醇4000 二棕相酞磷脂酞乙醇胺溶于ImL無水乙醇與丙酮(體積比1:1)混合溶液中有機溶劑中，混合分散均勻，減壓除去有機溶劑，得到總蟾毒內(nèi)酯的聚合物脂膜。將120mg甘露醇、10mg泊洛沙姆F68溶于0.7mL注射用水中，加入所得的聚合物脂膜中，再加入PH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH值為7.0，水浴加熱至60°C進行水化2h，得到總蟾毒內(nèi)酯的聚乙二醇衍生化磷脂包載納米膠束溶液；將得到的膠束溶液冷凍干燥，得到總蟾毒內(nèi)酯納米膠束的凍干制劑。
[0033]檢測:總蟾毒內(nèi)酯納米膠束平均粒徑為148.6nm，包封率為70.4%。
[0034]實施例3總蟾毒內(nèi)酯納米膠束的制備
[0035]將Img總蟾毒內(nèi)酯和SOmg聚乙二醇2000 二硬脂酸磷脂酞乙醇胺溶于ImL無水乙醇與丙酮(體積比1:1)混合溶液中有機溶劑中，混合分散均勻，減壓除去有機溶劑，得到總蟾毒內(nèi)酯的聚合物脂膜。將120mg甘露醇、10mg泊洛沙姆F68溶于0.7mL注射用水中，加入所得的聚合物脂膜中，再加入PH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH值為7.0，水浴加熱至60°C進行水化lh，得到總蟾毒內(nèi)酯的聚乙二醇衍生化磷脂包載納米膠束溶液；將得到的膠束溶液冷凍