關。在將第十周齡C57/BL6小鼠置于狹 小空間兩周后，誘發(fā)了小鼠的焦慮。申請人提取了大腦海馬區(qū)的RNA，發(fā)現(xiàn)miR-17-92的表 達顯著降低（圖1)。這說明壓力引起的焦慮可以降低miR-17-92的表達。進一步的，選擇 性 5 輕色胺再攝取抑制劑（selective serotonin re-uptake inhibitors，SSRI)氟西汀 (fluoxetine)是目前常用的抗抑郁藥。申請人在給第十周齡的小鼠施與壓力的同時，喂服 了氟西汀。申請人發(fā)現(xiàn)抗抑郁藥的使用可以使小鼠大腦海馬區(qū)miR-17-92的表達量顯著回 升（圖1)。這說明miR-17-92對抗抑郁藥起作用。
[0024] 實施例2
[0025] 為了研宄miR-17-92的具體功能，申請人繁育了 miR-17-92條件性敲除小鼠 (knockout，K0)。在Nestin-CreERtm小鼠和fIoxed的miR-17-92轉基因小鼠交配后，只有 在注射他莫昔芬（Tamoxifen)條件下，才能誘導Cre活性，以敲除miR-17-92在成年大腦海 馬區(qū)的表達。這個條件性敲除小鼠，稱作miR-17-92K0。在小鼠第五周齡時，對其連續(xù)5天 注射了 Tamoxifen，以激活Cre活性，敲除miR-17-92的表達。在小鼠第九周齡時，申請人利 用經典的Morris水迷宮實驗，對該小鼠的學習記憶能力狀況進行了檢測。將小鼠置于一個 直徑1米的圓形水迷宮中。在水迷宮中隱藏著一個平臺，通過測試小鼠發(fā)現(xiàn)平臺的時間，可 以推測小鼠學習和記憶的能力。申請人發(fā)現(xiàn)miR-17-92條件性敲除鼠并未在實驗中表現(xiàn)顯 著性的學習和記憶功能減退（圖2)。我們的結果表明，miR-17-92基因敲除，并不影響小鼠 正常的學習記憶功能。
[0026] 實施例3
[0027] 令人吃驚的是，申請人發(fā)現(xiàn)，敲除miR-17-92基因導致小鼠產生類似焦慮癥和抑 郁的行為（圖3)。在曠場實驗（open field)中，將小鼠置于50cm X 50cm的開放空間中。 由于小鼠比較害怕暴漏于開放空間和光照之下，小鼠越是焦慮，就會越躲避開放空間和光 照。因此，我們可以通過測試小鼠在開放空間停留的時間，爬行的距離，判斷小鼠的焦慮程 度。申請人的結果顯示，miR-17-92敲除小鼠很少停留在曠場中心，說明降低miR-17-92在 大腦中的表達，導致小鼠呈現(xiàn)增高的焦慮癥狀（圖3)。這說明miR-17-92可以作為焦慮和 抑郁癥的新的病理標記物。
[0028] 綜上所述，由于抑郁和焦慮障礙有很多共病癥，臨床常用抗抑郁療法來治療焦慮。 然而，現(xiàn)有的藥物臨床上仍對部分病人施治無效。尤其是抗抑郁藥與其作用靶標在分子水 平的應答機制，仍鮮為人知。焦慮和抑郁癥狀，給患者帶來了巨大的精神壓力和軀體不適。 超過25%的焦慮癥患者，終身都無法得到治愈。本發(fā)明對于基礎研宄和進一步的臨床應用 具有現(xiàn)實意義。通過miR-17-92,研宄者能探測到對抗抑郁藥有應答效果的新的蛋白質編 碼基因和非編碼miRNAs。這將拓展研宄視野，為將來開發(fā)新型抗抑郁藥物打好基礎。進一 步地，本專利將開拓新的抗抑郁治療祀點，由于miRNA是小分子，極易體外合成和導入細胞 內，操縱體內miRNA表達量越來越成為可能。因此，miRNA日漸成為人類神經系統(tǒng)疾病的基 因治療新工具。用miRNA作為抗抑郁抗焦慮的新型治療靶標，亦是前景光明。
[0029] 以上對本發(fā)明的具體實施例進行了描述。需要理解的是，本發(fā)明并不局限于上述 特定實施方式，本領域技術人員可以在權利要求的范圍內做出各種變形或修改，這并不影 響本發(fā)明的實質內容。
【主權項】
1. 一種miR-17-92基因簇在制備治療精神類疾病藥物中的用途。
2. 根據權利要求1所述miR-17-92基因簇在制備治療精神類疾病藥物中的用途，其特 征在于，所述精神類疾病為抑郁癥或焦慮癥。
3. 根據權利要求1所述miR-17-92基因簇在制備治療精神類疾病藥物中的用途，其特 征在于，所述miR-17-92基因簇包含以下組合中的一種或幾種：miR-17，miR-19，m iR-92。
4. 根據權利要求1所述miR-17-92基因簇在制備治療精神類疾病藥物中的用途，其特 征在于，所述 miR-17 的序列為 caaagugcuuacagugcagguag。
5. 根據權利要求1所述miR-17-92基因簇在制備治療精神類疾病藥物中的用途，其特 征在于，所述 miR-19 的序列為 ugugcaaaucuaugcaaaacug〇
6. 根據權利要求1所述miR-17-92基因簇在制備治療精神類疾病藥物中的用途，其特 征在于，所述 miR-92 的序列為 agguugggauuugucgcaaugcu〇
7. 根據權利要求1所述miR-17-92基因簇在制備治療精神類疾病藥物中的用途，其特 征在于，所述應用具體為：提升miR-17-92基因簇的表達量，進而提升抗抑郁能力。
8. 根據權利要求1所述miR-17-92基因簇在制備治療精神類疾病藥物中的用途，其特 征在于，所述應用具體為：提升miR-17-92基因簇的表達量，進而提升抗焦慮能力。
9. 根據權利要求1所述miR-17-92基因簇在制備治療精神類疾病藥物中的用途，其特 征在于，所述應用具體為：提升miR-17-92基因簇的表達量，進而同時提升抗焦慮和抗抑郁 能力。
10. 根據權利要求1所述miR-17-92基因簇在制備治療精神類疾病藥物中的用途，其特 征在于，所述應用具體為：所述miR-17-92基因簇作為制備診斷抑郁癥、或診斷焦慮癥，或 同時診斷抑郁癥和焦慮癥的靶標藥物中的應用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種藥物技術領域的miR-17-92基因簇在制備治療精神類疾病藥物中的用途。本發(fā)明對于基礎研究和進一步的臨床應用具有現(xiàn)實意義，通過miR-17-92，研究者能探測到對抗抑郁藥有應答效果的新的蛋白質編碼基因和非編碼miRNAs；本發(fā)明將拓展相關的研究視野，為將來開發(fā)新型抗抑郁藥物打下良好的基礎；本發(fā)明將開拓新的抗抑郁治療靶點，由于miRNA是小分子，極易體外合成和導入細胞內，操縱體內miRNA表達量越來越成為可能。
【IPC分類】A61P25-24, A61P25-22, A61K48-00, A61P25-18
【公開號】CN104826131
【申請?zhí)枴緾N201510179139
【發(fā)明人】孫濤
【申請人】王嘉胤
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2015年4月15日