，縮 短提取時(shí)間，生產(chǎn)成本低，產(chǎn)品安全，可提高生產(chǎn)企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益； (4) 本發(fā)明通過(guò)對(duì)海蘿藻進(jìn)行高值化利用，提取抗紫外輻射活性物質(zhì)，可廣泛應(yīng)用于 化妝品行業(yè)作為天然防曬劑，對(duì)促進(jìn)海藻產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要的經(jīng)濟(jì)意義和社會(huì)意 義； (5) 本發(fā)明制備方法能為海蘿藻的高值化利用提供新的技術(shù)，促進(jìn)海蘿藻養(yǎng)殖加工產(chǎn) 業(yè)的發(fā)展，可提高生產(chǎn)企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。
【附圖說(shuō)明】
[0022] 圖1是實(shí)施例1中超聲波提取時(shí)甲醇濃度對(duì)提取效率的影響； 圖2是實(shí)施例1中超聲波提取時(shí)海蘿藻和甲醇的料液比的選擇對(duì)提取效率的影響； 圖3是實(shí)施例1中超聲波提取時(shí)超聲波處理時(shí)間的選擇對(duì)提取效率的影響； 圖4是實(shí)施例1中超聲波提取時(shí)超聲波處理溫度的選擇對(duì)提取效率的影響； 圖5是實(shí)施例1中超聲波提取時(shí)超聲波處理功率的選擇對(duì)提取效率的影響。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 實(shí)施例1 本實(shí)施例提供的從海蘿藻中提取抗紫外輻射活性物質(zhì)的方法，包括以下步驟： (1) 前處理：將新鮮采集的海蘿藻洗去泥沙，瀝干水，然后放在-60°C冷凍干燥機(jī)中干 燥24h，取凍干海蘿藻于組織粉碎機(jī)間斷粉碎或用高通量組織研磨儀粉碎，粉碎的海蘿藻粉 過(guò)60目網(wǎng)篩，收集60目藻粉于密封袋保存； (2) 超聲波法提?。菏紫缺景l(fā)明申請(qǐng)人進(jìn)行了最佳提取工藝條件研宄，分別研宄了甲 醇濃度對(duì)提取率的影響、料液比的選擇、超聲波處理時(shí)間的選擇、超聲波處理溫度的選擇、 超聲波功率對(duì)提取率的影響，結(jié)果見(jiàn)圖1-5中所示，從圖1-5中可以看出：甲醇水溶液中甲 醇的體積百分含量為5~15%，甲醇水溶液的用量為海蘿藻總質(zhì)量的55~75倍，提取溫度為 35~50°C，提取時(shí)間為60~85min，超聲波的頻率為35kHz，超聲波的強(qiáng)度為280~360W時(shí)，提 取效率相對(duì)較高。
[0024] 本實(shí)施例中采用以下條件對(duì)海蘿藻中有效成分進(jìn)行提?。簩⒑Ｌ}藻粉放在抽提容 器中，加入濃度(體積百分含量，下同)為10%的甲醇溶液，料液比為1 :70,在超聲波儀器中， 進(jìn)行提取，控制提取溫度為40°C，提取時(shí)間為60min，超聲波的頻率為35kHz，超聲波的強(qiáng)度 為360W，將提取物離心分離，取上清液，將沉淀物按上述方法重復(fù)提取一次，合并兩次上清 液； (3) 冷凍醇沉：將上述收集的上清液，加入無(wú)水乙醇，二者的體積比為1 :4,然后在低 于-18°C條件下穩(wěn)定醇沉2h; (4) 離心去雜質(zhì)：將醇沉后的物質(zhì)進(jìn)行離心分離，離心溫度為4°C，轉(zhuǎn)速為10000r/min， 離心時(shí)間為15min，保留上清液，除去沉淀物； (5) 將上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中40°C旋干，所得產(chǎn)物用IOmL超純水復(fù)溶，移出溶解物，即 為抗紫外輻射活性物質(zhì)，產(chǎn)品為黃褐色； (6) 脫色：將上述提取的活性物質(zhì)用超純水稀釋10倍，通過(guò)SPE-pak C18固相萃取小 柱，過(guò)濾純化去除色素，收集純化物，經(jīng)凍干得到白色抗紫外輻射活性物質(zhì)。
[0025] SPE-pak C18固相萃取小柱過(guò)濾前需要先進(jìn)行柱活化和柱淋洗，其中柱活化過(guò)程 為：取3~5倍柱體積甲醇，以大約5mL/min的流速通過(guò)柱填料；柱淋洗過(guò)程為：取3~5倍柱 體積超純水，以大約5mL/min的流速淋洗柱。
[0026] 采用SPE-pak C18固相萃取小柱過(guò)濾純化黃褐色溶解物的具體過(guò)程為：將黃褐色 溶解物，以大約l~3mL/min的流速通過(guò)SPE-pak C18固相萃取小柱，收集流出的樣液，然后 清洗柱：以大約1倍柱體積的超純水清洗柱，同時(shí)收集洗脫液，將樣液和洗脫液合并，即為 純化物。
[0027] 根據(jù)QB/T 2410-1998中的方法，采用本發(fā)明實(shí)施例1中制備的抗紫外輻射活性物 質(zhì)進(jìn)行的紫外吸收測(cè)試，其結(jié)果見(jiàn)下表1。
[0028] 表1海蘿藻提取物的紫外吸光值
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種從海蘿藻中提取抗紫外輻射活性物質(zhì)的方法，其特征是含以下步驟： (1) 前處理：選取海蘿藻，清洗、干燥后粉碎； (2) 超聲波提?。涸诜鬯榈暮Ｌ}藻中加入甲醇水溶液，采用超聲波提取，提取后離心，取 上清液，在沉淀物中加入上述甲醇水溶液，重復(fù)提取一次，提取后離心，取上清液，合并兩次 提取的上清液； (3) 冷凍醇沉：在步驟（3)所得上清液中加入無(wú)水乙醇進(jìn)行醇沉； (4) 離心除雜：將醇沉獲得的沉淀物離心，取上清液，將上清液旋干，所得產(chǎn)物用超純水 復(fù)溶后，移出黃褐色溶解物； (5) 脫色：將黃褐色溶解物采用固相萃取柱過(guò)濾純化，收集純化物，凍干即得到白色抗 紫外輻射活性物質(zhì)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從海蘿藻中提取抗紫外輻射活性物質(zhì)的方法，其特征是：步 驟（1)中干燥采用冷凍干燥，干燥溫度為-55~-60°C，干燥時(shí)間為24~40h。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從海蘿藻中提取抗紫外輻射活性物質(zhì)的方法，其特征是：步 驟（2)中甲醇水溶液中甲醇的體積百分含量為5~15%，甲醇水溶液的用量為海蘿藻總質(zhì)量 的55~75倍。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從海蘿藻中提取抗紫外輻射物質(zhì)的方法，其特征是：步驟（2) 中超聲波提取時(shí)，提取溫度為35~50°C，提取時(shí)間為60~85min，超聲波的頻率為35kHz，超聲 波的強(qiáng)度為280~360W。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從海蘿藻中提取抗紫外輻射活性物質(zhì)的方法，其特征是：步 驟（3)中無(wú)水乙醇的用量為上清液總體積的3. 5~4. 5倍，醇沉?xí)r在低于-18°C條件下醇沉 2~3h〇
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從海蘿藻中提取抗紫外輻射活性物質(zhì)的方法，其特征是：步 驟（4)中離心時(shí)，離心溫度為2~6°C，轉(zhuǎn)速為8000~12000r/min，離心時(shí)間為15~20min，離心 后保留上清液，除去沉淀物。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從海蘿藻中提取抗紫外輻射活性物質(zhì)的方法，其特征是：步 驟（4)中將上清液旋干時(shí)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的溫度為35~45°C。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從海蘿藻中提取抗紫外輻射活性物質(zhì)的方法，其特征是：步 驟（4)中所得產(chǎn)物用10~50mL超純水復(fù)溶。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從海蘿藻中提取抗紫外輻射活性物質(zhì)的方法，其特征是：步 驟（5)中所述的固相萃取柱為SPE-pak C18固相萃取小柱。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種從海蘿藻中提取抗紫外輻射活性物質(zhì)的方法，含以下步驟：（1）前處理；（2）超聲波提?。唬?）冷凍醇沉；（4）離心除雜；（5）脫色，得到白色抗紫外輻射活性物質(zhì)。該方法采用低濃度甲醇、超聲波技術(shù)提取及固相小柱分離純化技術(shù)相結(jié)合的集成技術(shù)，通過(guò)控制提取的時(shí)間、溫度、甲醇濃度、料液比例，超聲波的頻率和功率，最大化地提取該活性物質(zhì)，該方法提取的海蘿藻抗紫外輻射活性物質(zhì)在UVB(280~320nm)區(qū)段和320~360nm（UVA）均有明顯的紫外吸光能力，很適合應(yīng)用于化妝品中，對(duì)于日常防曬具有明顯的效果。
【IPC分類】A61Q17-04, A61K8-99
【公開(kāi)號(hào)】CN104856926
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510245220
【發(fā)明人】吳燕燕, 李來(lái)好, 楊賢慶, 張婉, 王錦旭, 陳勝軍, 胡曉, 戚勃, 岑劍偉, 馬海霞, 榮輝
【申請(qǐng)人】中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所
【公開(kāi)日】2015年8月26日
【申請(qǐng)日】2015年5月14日