一種流感病毒神經(jīng)氨酸酶的新型抑制劑及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種流感病毒神經(jīng)氨酸酶的新型抑制劑，其具體為淫羊藿苷及其衍 生物。本發(fā)明還涉及該新型抑制劑在制備用于預(yù)防和/或治療流感病毒引起的疾病的藥 物、食品、保健品中的用途。屬于藥學(xué)和藥理學(xué)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 以下描述利于讀者理解。所提供的信息或引用的參考文獻(xiàn)都不能被認(rèn)為是本發(fā)明 的現(xiàn)有技術(shù)。
[0003] 流行性感冒病毒（influenza virus)，簡稱流感病毒，是一種能夠引起人、狗、 馬、豬哺乳動(dòng)物及禽類等流行性感冒的RNA病毒。在分類學(xué)上，流感病毒屬于正粘病毒科 (Orthomyxoviridae)，它會(huì)造成急性上呼吸道感染，并可通過空氣迅速傳播，在世界各地會(huì) 發(fā)生周期性大流行。該病毒最早是在1933年由英國人威爾遜·史密斯（Wilson Smith)認(rèn) 識(shí)的，稱為H1N1。H代表血凝素；N代表神經(jīng)氨酸酶。數(shù)字代表不同類型。人流感病毒分為 甲（A)、乙（B)、丙（C)三型，是流行性感冒（流感）的病原體。其中甲型流感病毒抗原易發(fā) 生變異，曾多次引起世界性大流行。
[0004] 流感病毒呈球形，新分離的毒株則多呈絲狀，其直徑在80至120納米之間，絲狀流 感病毒的長度可達(dá)400納米。流感病毒結(jié)構(gòu)自外而內(nèi)可分為包膜、基質(zhì)蛋白以及核心三部 分。病毒的核心包含了存貯病毒信息的遺傳物質(zhì)以及復(fù)制這些信息必須的酶。流感病毒的 遺傳物質(zhì)是單股負(fù)鏈RNA，簡寫為ss-RNA，SS-RNA與核蛋白（NP)相結(jié)合，纏繞成核糖核蛋白 體（RNP)，以密度極高的形式存在。除了核糖核蛋白體，還有負(fù)責(zé)RNA轉(zhuǎn)錄的RNA多聚酶。甲 型流感病毒的RNA由8個(gè)節(jié)段組成。流感病毒的基因由8個(gè)單鏈RNA片段組成，分別為NA、 擬、即、厘、呢、？81、？82和？六基因。它們編碼10種蛋白：膜蛋白血凝素（他111&881此111111擬）， 神經(jīng)氨酸（Neuraminidase NA)，基質(zhì)蛋白（Matrix proteinlMl，核蛋白（Nucleoprotein NP)，3 種 RNA依賴聚（RNA-dependent RNA polymerase PBl、PB2 和 PA)離子通道蛋白（Ion channel protein M2)和非結(jié)構(gòu)蛋白（Non-structural protein NSl 和 NS2)。
[0005] 基質(zhì)蛋白構(gòu)成了病毒的外殼骨架，實(shí)際上骨架中除了基質(zhì)蛋白（Ml)之外還有膜 蛋白（M2)。M2蛋白具有離子（主要是Na+)通道和調(diào)節(jié)膜內(nèi)PH值的作用，但數(shù)量很少?；?質(zhì)蛋白與病毒最外層的包膜緊密結(jié)合，起到保護(hù)病毒核心和維系病毒空間結(jié)構(gòu)的作用。當(dāng) 流感病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)完成其繁殖之后，基質(zhì)蛋白是分布在宿主細(xì)胞膜內(nèi)壁上的，成型的 病毒核衣殼能夠識(shí)別宿主細(xì)胞膜上含有基質(zhì)蛋白的部位，與之結(jié)合形成病毒結(jié)構(gòu)，并以出 芽的形式突出釋放成熟病毒顆粒（Virion)。包膜是包裹在基質(zhì)蛋白之外的一層磷脂雙分子 層膜，這層膜來源于宿主的細(xì)胞膜，成熟的流感病毒從宿主細(xì)胞出芽，將宿主的細(xì)胞膜包裹 在自己身上之后脫離細(xì)胞，去感染下一個(gè)目標(biāo)。包膜中除了磷脂分子之外，還有兩種非常重 要的糖蛋白：血凝素和神經(jīng)氨酸酶。這兩類蛋白突出病毒體外，長度約為10至40納米，被稱 作刺突。一般一個(gè)流感病毒表面會(huì)分布有500個(gè)血凝素刺突和100個(gè)神經(jīng)氨酸酶刺突。在 甲型流感病毒中血凝素和神經(jīng)氨酸酶的抗原會(huì)發(fā)生變異，這是區(qū)分病毒毒株亞型的依據(jù)。
[0006] 血凝素（HA)呈柱狀，能與人、鳥、豬豚鼠等動(dòng)物紅細(xì)胞表面的受體相結(jié)合引起凝 血，故而被稱作血凝素。血凝素蛋白水解后分為輕鏈和重鏈兩部分，后者可以與宿主細(xì)胞膜 上的唾液酸受體相結(jié)合，前者則可以協(xié)助病毒包膜與宿主細(xì)胞膜相互融合。血凝素在病毒 導(dǎo)入宿主細(xì)胞的過程中扮演了重要角色。血凝素具有免疫原性，抗血凝素抗體可以中和流 感病毒。神經(jīng)氨酸酶（NA)是一個(gè)呈蘑菇狀的四聚體糖蛋白，具有水解唾液酸的活性。成熟 的流感病毒以出芽的方式脫離宿主細(xì)胞之后，病毒表面的血凝素會(huì)經(jīng)由唾液酸受體與宿主 細(xì)胞膜保持聯(lián)系，需要由神經(jīng)氨酸酶將唾液酸水解，切斷病毒與宿主細(xì)胞的最后聯(lián)系，使病 毒能順利從宿主細(xì)胞中釋放，繼而感染下一個(gè)宿主細(xì)胞。因此神經(jīng)氨酸酶也成為流感治療 藥物的一個(gè)作用靶點(diǎn)，針對(duì)此酶設(shè)計(jì)的奧司他韋（達(dá)菲類）是最著名的抗流感藥物之一。H 可分為17個(gè)亞型（Hl~H17)，N有10個(gè)亞型（NI~N10)。其中僅H1N1、H2N2、H3N2主要 感染人類，其它許多亞型的自然宿主是多種禽類和動(dòng)物。其中對(duì)禽類危害最大的為H5、H7 和H9亞型毒株。一般情況下，禽流感病毒不會(huì)感染鳥類和豬以外的動(dòng)物。但1997年香港 首次報(bào)道發(fā)生18例H5N1人感染禽流感病例，其中6例死亡，引起全球廣泛關(guān)注。1997年以 后，世界上又先后幾次發(fā)生了禽流感病毒感染人的事件。具有高致病性的H5N1、H7N7、H7N9、 H9N2等禽流感病毒，一旦發(fā)生變異而具有人與人的傳播能力，會(huì)導(dǎo)致人禽流感流行，預(yù)示 著禽流感病毒對(duì)人類已具有很大的潛在威脅。
[0007] 由于流感病毒抗原極易變異，常規(guī)疫苗目前尚不能及時(shí)有效地預(yù)防流感暴發(fā)與流 行，因此抗流感病毒藥物研宄在流感治療中具有重要意義。已應(yīng)用和正在研宄的抗流感病 毒藥物有金剛烷胺類藥物、流感病毒神經(jīng)氨酸苷酶抑制劑、流感病毒受體阻斷劑和抗流感 病毒反義寡核苷酸等。金剛烷胺和金剛乙胺是常用臨床治療藥物，但對(duì)B型流感無效，易產(chǎn) 生耐藥性并具有神經(jīng)毒性；流感病毒神經(jīng)氨酸苷酶抑制劑，如奧司他韋是目前最為有效的 抗流感病毒一線藥物；流感病毒受體阻滯劑具有明顯的抗病毒作用、抗流感病毒反義寡核 苷酸體外實(shí)驗(yàn)證明能特異性抑制病毒復(fù)制，有可能成為新一代抗流感特效藥，但它們尚處 于研宄階段。
[0008] 淫羊藿苷，中文別名為淫羊藿戒，英文名為Icariin、Icariln、Ieariline，英文化 學(xué)名是 3-[(6-Deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)oxy]-7-(beta_D-glucopyranosy-loxy) -5_hydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-8-(3-methyl-2-buten_l-yl)-4H-1-benzopyran_4-〇 ne，化學(xué)分子式是=C33H4tlO15。天然的淫羊藿苷存在于小檗科淫羊藿屬（E.pimedium)植物 中，主要分布于北溫帶，世界上常見的淫羊藿屬植物有23種，中國有13種，例如：淫羊藿 (E.brevicornum)，箭葉淫羊藿（E. sagitatum)，朝鮮淫羊藿（E. icoroanum)等。中國專利申 請(qǐng)CN1535976A詳細(xì)地描述了從淫羊藿屬植物中提取純化淫羊藿甙的方法。從淫羊藿屬植 物的干燥莖葉中提取，純化后的淫羊藿苷為淡黃色針狀結(jié)晶粉末。