荔枝皮多酚在制備降低肝臟低密度脂蛋白膽固醇的藥物或保健品中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于荔枝的醫(yī)藥用途技術領域，尤其涉及荔枝皮多酚在制備降低肝臟低密 度脂蛋白膽固醇的藥物或保健品中的應用。
【背景技術】
[0002] 非酒精性脂肪性肝病是指除酒精和其他明確的損肝因素所致的，以彌漫性肝細胞 大泡性脂肪變?yōu)橹饕±肀憩F(xiàn)的遺傳-代謝-病理臨床綜合征，具有影響全身多系統(tǒng)、病程 持續(xù)進展的特點。非酒精性脂肪性肝的發(fā)病機制極為復雜，比較認可的是二次打擊學說，初 次打擊是胰島素抵抗，二次打擊主要指各種原因所致的氧化應激及脂質過氧化損傷。脂肪 肝的形成和脂代謝障礙有著密切關系：肝細胞中甘油三酯（TG)、極低密度脂蛋白的合成與 排出不平衡是形成脂肪肝的主要原因。當進入肝臟的脂肪量超過肝臟的脂質和氧化能力， 或肝臟合成低密度脂蛋白障礙，肝臟合成的內(nèi)源性TG就不能以脂蛋白的形式進出肝臟，則 在肝細胞內(nèi)外堆積形成脂肪肝。目前，臨床上尚無完全有效的藥物治療非酒精性脂肪性肝， 僅僅能夠改善胰島素抵抗，維護機體內(nèi)環(huán)境脂質代謝、能量代謝和抗氧化物的平衡，促使機 體保持在適應性反應階段，延緩、阻止脂肪性肝病的病情進展?，F(xiàn)階段藥物治療主要針對不 同病因進行診治，如：對高血脂脂肪肝患者使用降脂藥物，對糖尿病性脂肪肝患者使用降糖 藥。
[0003] 荔枝為無患子科常綠植物的果實，主產(chǎn)于我國廣東、廣西、福建等地，目前我國荔 枝年產(chǎn)量約160萬噸，占世界荔枝總產(chǎn)量80%以上。在荔枝的深加工過程中產(chǎn)生了約40% 鮮果質量的果皮和果核廢棄物，大量荔枝果皮作為大宗農(nóng)產(chǎn)品廢棄物至今未能得到有效開 發(fā)和利用。研宄表明，荔枝果皮中含有大量的多酚類化合物，實驗證明多酚類物質具有抗氧 化、抗腫瘤、預防心血管疾病、延緩衰老等多種生物活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明要解決的技術問題是提供荔枝皮多酚在制備降低肝臟低密度脂蛋白膽固 醇的藥物或保健品中的應用，以用于治療非酒精性脂肪肝和肝臟脂肪堆積等相關肝病。
[0005] 為解決上述技術問題，本發(fā)明采用以下技術方案：荔枝皮多酚在制備降低肝臟低 密度脂蛋白膽固醇的藥物或保健品中的應用。
[0006] 藥物或保健品用于預防或治療肝臟脂肪堆積。
[0007] 藥物或保健品用于預防或治療非酒精性脂肪肝。
[0008] 藥物或保健品用于預防或治療酒精性脂肪肝。
[0009] 降低肝臟低密度脂蛋白膽固醇的藥物或保健品，含治療有效量的荔枝皮多酚和輔 料。
[0010] 荔枝皮多酚來自荔枝果皮醇提物。
[0011] 荔枝果皮醇提物按以下方法制備：取新鮮荔枝果皮，用80%乙醇室溫浸泡2次，過 濾，合并濾液，減壓濃縮濾液，濾除葉綠素及蠟質后繼續(xù)濃縮得浸膏，浸膏冷凍干燥后得到 干浸膏。
[0012] 荔枝果皮醇提物按以下方法制備：取新鮮荔枝果皮6. 68Kg，用6倍量80 %乙醇室 溫浸泡2次，每次7天，過濾，合并濾液，減壓濃縮濾液，濾除蠟質及葉綠素后繼續(xù)濃縮得浸 膏650g ;取浸膏550g加水充分溶解后，采用S印hadex LH-20柱層析，0 - 100% MeOH進行 梯度洗脫，20 %為一個梯度，每一梯度2L及50 %、60 %的丙酮各2L，每份收集250mL，經(jīng)硅膠 薄層層析跟蹤檢測，合并相近流份，50°C以下旋轉蒸發(fā)儀真空減壓至干的浸膏。
[0013] 上述藥物或保健品為口服劑型。
[0014] 口服劑型為膠囊劑、片劑或顆粒劑。
[0015] 發(fā)明人通過大量實驗發(fā)現(xiàn)，來自荔枝果皮的荔枝皮多酚可有效降低肝臟膽固醇、 肝臟甘油三酯、肝臟低密度脂蛋白膽固醇，從而有效地減少肝臟中脂肪堆積，可用于治療非 酒精性脂肪肝等相關肝病。
【附圖說明】
[0016] 圖1是荔枝皮多酚（荔枝果皮醇提物）提取分離的工藝流程圖。
[0017] 圖2各組小鼠肝臟照片，圖中：A空白組，B模型組，C陽性組，D荔枝皮多酚低劑量 組，E荔枝皮多酚高劑量組。
[0018] 圖3各組小鼠肝臟HE染色照片（HEX 100)，圖中：A空白組，B模型組，C陽性組，D 荔枝皮多酚低劑量組，E荔枝皮多酚高劑量組。
【具體實施方式】
[0019] 1.實驗材料與方法
[0020] I. 1藥品和試劑
[0021] 新鮮的荔枝果皮：2013年7月購于廣西桂林市雁山區(qū)，經(jīng)鑒定為無患子科荔枝 (litchi chinensis)的果皮；辛伐他汀片：廣東彼迪藥業(yè)有限公司，批號20141002 ;總膽 固醇（TC)、甘油三酯（TG)、高密度脂蛋白膽固醇（HDLC)、低密度脂蛋白膽固醇（LDLC)測定 試劑盒：長春匯力；超氧化物歧化酶（SOD)、丙二醛（MDA)、谷丙轉氨酶（ALT)、谷草轉氨酶 (AST)、血糖（FBG)、胰島素（INS)測定試劑盒：南京建成；其余試劑均為國產(chǎn)分析純。
[0022] L 2 儀器
[0023] TGL-16R型高速冷凍離心機，珠海黑馬公司；RT-9100型半自動生化分析儀，深圳 雷杜生命科學股份有限公司；MK3型全自動酶標儀，賽默飛世爾（上海）儀器有限公司；電 子天平，梅特樂-托利多儀器上海有限公司。
[0024] 1. 3實驗動物及飼料
[0025] 昆明小鼠，SPF級，體重18_22g，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供。生產(chǎn) 許可證號：SCXK(湘）2009-0004。基礎飼料，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供。生 產(chǎn)證號：SCXK (湘）2009-0009。
[0026] 1. 4荔枝皮多酚的制備
[0027] 取新鮮荔枝果皮6. 68Kg，用6倍量80%乙醇室溫浸泡2次，每次7天，過濾，合并 濾液，減壓濃縮濾液，濾除蠟質及葉綠素后繼續(xù)濃縮得浸膏650g ;取浸膏550g加水充分溶 解后，米用36卩]^(1611^-20柱層析（8〇11；[.(1.\54011，0-100%]\160!1，20%為一個梯度，每 一梯度2L及50 %、60 %的丙酮各2L)進行梯度洗脫，每份收集250mL，經(jīng)硅膠薄層層析跟蹤 檢測，合并相近流份，50°C以下旋轉蒸發(fā)儀真空減壓至干的浸膏。具體工藝流程參見圖1。
[0028] 研宄表明，荔枝果皮各部位的多酚含量存在著差異，提取物經(jīng)過S印hadex LH-20 柱層析純化后，其多酚類成分主要集中在Fr. 3、Fr. 4和Fr. 5這三個部位中，總酚含量都達 到40 %以上，其中Fr. 3的總酚含量44. 02 %，F(xiàn)r. 4的總酚含量46. 53 %，F(xiàn)r. 5的總酚含量 52. 48%，說明S印hadex LH-20對多酚類成分具有較好的富集作用。合并Fr. 3、Fr. 4和Fr. 5 這三個部位的干浸膏用于以下活性實驗，測得合并后的干浸膏多酚含量45.62% (其中以 鎖狀多聚體多酚為主，接近90%，小分子多酚含量只有11.02