雷公連提取物在制備抗心肌缺血缺氧產(chǎn)品中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及雷公連提取物在制備抗心肌缺血缺氧產(chǎn)品中的應(yīng)用，屬于藥材活性成 分應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 心肌缺血性疾病是心血管疾病中的一個焦點，心肌缺血缺氧也是心肌梗死和缺血 性心臟病等共同的病理基礎(chǔ)。心肌供血供氧不足導(dǎo)致心肌代謝紊亂，能量供應(yīng)不足，心肌收 縮功能下降，血液輸出量降低，進而影響整個機體的功能，乃至引起心肌細胞死亡。因此，對 于心血管疾病特別是心肌缺血缺氧的臨床研宄和實驗研宄普遍得到重視。
[0003] 心肌缺血缺氧屬于中醫(yī)"胸痹"、"卒心痛"等范疇，其主要臨床表現(xiàn)類似于急性冠 狀動脈綜合征（ACS)。ACS是由急性心肌梗死所產(chǎn)生的一組危重的臨床綜合征。傳統(tǒng)中醫(yī) 認為"人年四十，陰氣自半"，心肌缺血缺氧是由臟腑虛弱，冷熱風(fēng)邪侵襲手少陰經(jīng)所致。臨 床上近年來多見于中老年人，病在心，與脾和肝腎三臟有關(guān)。腎氣已虛，鼓動血脈運行之力 不足，機體內(nèi)已有血行遲緩，聚濕生痰，瘀而不通之勢，這是本病發(fā)生的前提和基礎(chǔ)，治療多 以活血化瘀，行氣止痛為主要治則進行辨證，并取得了良好的臨床療效。
[0004] 雷公連為天南星科雷公連屬下的一個種，是中國的特有植物。附生藤本。莖較細 弱，粗3~5_，借氣生根緊貼于樹干上，節(jié)間長3~5cm。莖葉可入藥，治風(fēng)濕、跌打、心絞 痛。目前尚未有將雷公連用于抗心肌缺血缺氧產(chǎn)品中的相關(guān)研宄報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供雷公連提取物在制備抗心肌缺血 缺氧產(chǎn)品中的應(yīng)用，可將雷公連提取物制成抗心肌缺血缺氧的藥物或保健品。
[0006] 為了實現(xiàn)上述目標，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：
[0007] 雷公連提取物在制備抗心肌缺血缺氧產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0008] 前述應(yīng)用中，所述雷公連提取物為從雷公連藥材中提取得到，其中有機酸含量為 1%~30%，生物堿含量為40%~70%。
[0009] 前述應(yīng)用中，所述雷公連提取物是這樣制備的：將雷公連藥材分別用95%、75%、 50%的乙醇各浸泡3~5次，每次6~24h，至顏色變淺后，合并浸泡液，回收乙醇，得到乙 醇提取物；將乙醇提取物置于70°C水浴中揮發(fā)至無醇味，依次用0. 5~2倍體積的石油醚、 0. 5~2倍體積的乙酸乙醋分別萃取3~5次，再用0. 5~3倍體積的正丁醇萃取3~6 次，取正丁醇萃取液進行減壓回收至無醇味，得正丁醇萃取物，用水溶解后，上大孔樹脂柱， 先用蒸餾水洗，至洗出液無色后，再用8~15倍柱體積的50%乙醇以2~3倍柱體積/h的 速度洗脫，收集乙醇洗脫液，將洗脫液減壓濃縮，置于60°C水浴中揮發(fā)至干膏狀，再于60°C 減壓干燥，即得。
[0010] 前述雷公連提取物的應(yīng)用中，所述產(chǎn)品是以雷公連提取物為活性成分，加入藥用 載體或賦形劑制成的藥物或保健品制劑。
[0011] 具體的應(yīng)用方法如：取雷公連提取物，加入膠囊劑常用輔料，混勻，烘干，滅菌，裝 入膠囊，包裝，制成膠囊劑。
[0012] 或者取雷公連提取物，加適量的增溶劑，研磨，加入少量水稀釋，混勻，加入矯味劑 和防腐劑，混勻，加水至規(guī)定量，過濾，混勻，分裝，滅菌，制成口服液。
[0013]或者取雷公連提取物，加入片劑常用輔料，混勻，制粒，干燥，壓片，制成片劑。
[0014]或者取雷公連提取物，加入顆粒劑常用輔料，制粒，干燥，整粒，制成顆粒劑。
[0015]或者取雷公連提取物，加入滴丸基質(zhì)，混勻，滴制成丸，即得滴丸劑。
[0016]前述雷公連提取物的應(yīng)用中，所述產(chǎn)品是將雷公連提取物與其它藥用活性成分組 合，加入藥用載體或賦形劑制成的藥物組合物或保健品制劑。
[0017]為了驗證雷公連提取物抗心肌缺血缺氧作用效果，申請人進行了一系列試驗研 宄，具體如下：
[0018] 一、試劑準備及實驗分組
[0019]雷公連提取物的制備：將雷公連藥材分別用95%、75%、50%的乙醇各浸泡3~5 次，每次6~24h，至顏色變淺后，合并浸泡液，回收乙醇，得到乙醇提取物；將乙醇提取物置 于70°C水浴中揮發(fā)至無醇味，依次用0. 5~2倍體積的石油醚、0. 5~2倍體積的乙酸乙酯 分別萃取3~5次，再用0. 5~3倍體積的正丁醇萃取3~6次，取正丁醇萃取液進行減壓 回收至無醇味，得正丁醇萃取物，用水溶解后，上大孔樹脂柱，先用蒸餾水洗，至洗出液無色 后，再用8~15倍柱體積的50%乙醇以2~3倍柱體積/h的速度洗脫，收集乙醇洗脫液， 將洗脫液減壓濃縮，置于60°C水浴中揮發(fā)至干膏狀，再于60°C減壓干燥，即得雷公連提取 物。
[0020] 其余試劑：復(fù)方丹參片（通化方大藥業(yè)股份有限公司）；鹽酸異丙腎上腺素注射液 (ISO,上海和豐制藥有限公司，規(guī)格：2mL:Img每支）；鈉石灰；烏拉坦（上海恒遠科技有限 公司），臨用前配成20%溶液；凡士林（購于貴州芝林大藥房）。
[0021] 昆明種小鼠，6~8周齡，體重18~22g，雌雄各半，重慶騰鑫生物技術(shù)有限公司提 供，動物合格證號：（渝）2007-007,分籠飼養(yǎng)于貴陽中醫(yī)學(xué)院藥理實驗室。BL-420S生物機 能實驗系統(tǒng)（成都泰盟科技有限公司）。
[0022] 將健康昆明種小鼠48只，雌雄各半，體重18~22g，隨機分為四組，每組12只。分 別編號為空白對照組、雷公連提取物高劑量組（給藥劑量為0. 〇12g/kg)、雷公連提取物低 劑量組（給藥劑量為〇. 〇〇6g/kg)和陽性藥復(fù)方丹參片對照組（給藥劑量為0. 483g/kg)。 灌胃量為〇.lmL/10g，空白對照組給予等量蒸餾水灌胃，每日兩次，連續(xù)給藥7d。
[0023] 二、雷公連提取物對ISO致小鼠心肌急性缺血心電圖T波的影響
[0024] 于末次給藥40min后，用20%烏拉坦0.2111171(^腹腔注射麻醉，待小鼠麻醉 后，仰臥固定于鼠臺上，記錄正常心電圖（II導(dǎo)聯(lián)），待心電圖穩(wěn)定后，小鼠腹腔注射 ISO(0. 04mL/10g)，記錄注射后3min內(nèi)T波平均高度，以PR段為基線測量，取平均值，并與 缺血前心電圖比較，T波抬高程度作為心肌缺血程度指標。結(jié)果如表1所示。
[0025] 表1雷公連提取物對ISO致小鼠心肌急性缺血心電圖T波的影響（I±s)
[0026]
[0027] 注：與空白組比較，*P< 0? 05,**P< 0? 01
[0028] 由表1可知，各組小鼠腹腔注射ISO后，小鼠ST-T段均出現(xiàn)改變，T波顯著高聳， 雷公連提取物高劑量組和低劑量組均能顯著抑制心肌ST-T的抬高（P< 0. 05)。
[0029] 三、雷公連提取物對小鼠常壓耐缺氧能力的影響
[0030] 于末次給藥40min后將小鼠放入底部鋪有IOg鈉石灰的250mL廣口瓶中，在瓶口 涂抹凡士林以保證廣口瓶密閉，蓋上瓶蓋后開始計時，觀察小鼠表現(xiàn)，記錄小鼠從蓋上廣口 瓶蓋到停止呼吸所用時間。結(jié)果如表2所示。
[0031] 表2雷公連提取物對小鼠常壓耐缺氧能力的影響（^ ±s)
[0032]
[0033] 注：與空白組比較，*P< 0? 05,**P< 0? 01
[0034] 由表2可知，與空白對照組比較，雷公連提取物高劑量組和低劑量組均能顯著提 高正常小鼠常壓耐缺氧能力，延長小鼠存活時間（P< 0. 01)。
[0035] 四、雷公連提取物對ISO致小鼠急性心肌缺血常壓耐缺氧能力的影響
[0036] 于末次給藥40min后，小鼠皮下注射IS0(0. 04mL/10g)，皮下注射ISO15min后將 小鼠放入底部鋪有IOg鈉石灰的250mL廣口瓶中，在瓶口涂抹凡士林以保證廣口瓶密閉，蓋 上瓶蓋后開始計時，觀察小鼠表現(xiàn)，記錄小鼠從蓋上廣口瓶蓋到停止呼吸時間。結(jié)果如表3 所示。
[0037] 表3雷公連提取物對ISO致小鼠急性心肌缺血常壓耐缺氧能力的影響（^ ±s)
[0038]
[0039]注：與空白組比較，*P< 0? 05,**P< 0? 01
[0040] 由表3可知，鹽酸異丙腎上腺素能明顯提高小鼠的耗氧量，導(dǎo)致小鼠耐缺氧能力 下降，存活時間縮短。與空白對照組比較，雷公連提取物高劑量組和低劑量組能明顯提高小 鼠ISO致急性心肌缺血常壓耐缺氧能力，延長小鼠存活時間（P< 0. 05)。
[0041] 五、雷公連提取物對小鼠斷頭缺血缺氧喘息時間的影響
[0042] 于末次給藥40min后，用大剪刀在小鼠耳根部快速剪頭，立即用秒表開始計時，記 錄小鼠從斷頭后到張口喘息停止的喘息次數(shù)和時間。結(jié)果如表4所示。
[0043] 表4雷公連提取物對小鼠斷頭缺血缺氧喘息時間的影響（[土s)
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