質(zhì)子泵抑制劑在制備治療肝細胞肝癌藥物中的應用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及質(zhì)子泵抑制劑的新用途，尤其涉及質(zhì)子泵抑制劑在制備抗肝細胞癌藥物中的應用。
【背景技術(shù)】
[0002]肝細胞癌是常見的惡性腫瘤，居我國惡性腫瘤發(fā)生率的第四位。肝細胞癌惡性程度高，病情發(fā)展快，預后差，平均生存期6-8月，其死亡率占我國惡性腫瘤的第二位，僅次于肺癌。由于肝細胞癌對臨床上使用的化療藥物均不敏感，目前臨床上治療肝細胞癌有效的方法仍然是外科手術(shù)治療。但由于肝細胞癌病情發(fā)展快，大多數(shù)患者就診時由于較差的肝功能情況、基礎(chǔ)的肝臟疾病或遠處轉(zhuǎn)移的出現(xiàn)，已經(jīng)不適宜進行外科手術(shù)治療。即使少數(shù)能進行外科手術(shù)治療的病人，手術(shù)后仍然具有較高的復發(fā)率。而且，目前對肝細胞癌手術(shù)后的復發(fā)仍無有效的治療方法。近年來，隨著腫瘤細胞分子生物學研究的進展，人們在研究針對肝細胞癌的分子靶向治療。開發(fā)了以索拉非尼(Sorafenib)為代表的一系列以酪氨酸激酶受體為治療靶點的藥物。目前，索拉非尼(是血管內(nèi)皮生長因子、血小板源生長因子、表皮生長因子和胰島素生長因子等多種激酶的抑制劑)已經(jīng)被美國FDA批準作為肝細胞癌的治療。但廣泛的臨床試驗研究發(fā)現(xiàn)，與安慰劑相比，索拉非尼延長病人的生存期僅僅3月。而且，索拉非尼價格昂貴。因此，對于具有可怕預后的肝細胞癌，尋找其有效的治療藥物仍然是迫切需要的。
[0003]研究表明肝細胞癌的發(fā)生是一個復雜的過程，累及了很多細胞分子信號的改變和基因的改變，很多因素共同作用最終導致了肝細胞癌的發(fā)生發(fā)展。不管惡性腫瘤是由什么原因引起以及它發(fā)生的機制如何，大量的證據(jù)表明腫瘤細胞的酸性微環(huán)境在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。腫瘤細胞通常生長于低氧微環(huán)境，而且具有高糖酵解活性，會導致產(chǎn)生大量酸性代謝產(chǎn)物。但研究表明腫瘤細胞是處于細胞外偏酸而細胞內(nèi)偏堿的微環(huán)境。這就需要腫瘤細胞能及時的排除細胞內(nèi)產(chǎn)生的酸到細胞外以維持有利于腫瘤細胞生長、侵襲、轉(zhuǎn)移的細胞外酸性微環(huán)境。在腫瘤細胞有四種主要的細胞PH調(diào)節(jié)機制:鈉氫交換體、碳酸氫鹽轉(zhuǎn)運劑、質(zhì)子-乳酸根共輸體和質(zhì)子泵。而質(zhì)子泵Vacuolar H+-ATPase (V-ATPase)被認為是在腫瘤細胞中重要的PH調(diào)節(jié)機制。
[0004]質(zhì)子泵抑制劑能有效的抑制胃粘膜壁細胞的H+-K+-ATPase。第一個質(zhì)子泵抑制劑奧美拉唑(Omeprazole)由瑞典阿斯利康公司開發(fā)在1988年首先應用于臨床治療消化性潰瘍，隨后各國相繼開發(fā)了蘭索拉唑(Lansoprazole)、泮托拉唑(Pantoprazole)、雷貝拉唑(Rabeprazole)、埃索美拉唑(Esomeprazole)、艾普拉唑(Iaprazole)等。由于這類藥物能抑制胃粘膜壁細胞的H+-K+-ATPase，從而有效的抑制胃酸分泌，目前臨床上已經(jīng)廣泛用于胃酸相關(guān)性疾病(如消化性潰瘍、胃食道反流病等)的治療。我們的研究發(fā)現(xiàn)質(zhì)子泵抑制劑除了抑制質(zhì)子泵H+-K+-ATPase外，也能有效的抑制質(zhì)子泵V-ATPase。
[0005]但迄今為止，未發(fā)現(xiàn)質(zhì)子泵抑制劑在抗肝細胞癌藥物中的應用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供質(zhì)子泵抑制劑在制備治療肝細胞肝癌藥物中的應用。
[0007]本發(fā)明提出質(zhì)子泵抑制劑能有效的抑制肝細胞癌細胞的增殖和生長，促進肝細胞癌細胞的凋亡，可以用于制備治療肝細胞癌的新的藥物。
[0008]本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的:
1.本發(fā)明通過細胞實驗的結(jié)果顯示質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑抑制了人肝細胞癌細胞的增殖和生長；
2.通過動物模型實驗的結(jié)果顯示質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑抑制了人肝細胞肝癌細胞在肝臟內(nèi)的生長，抑制了化學物質(zhì)誘導的小鼠肝細胞癌的發(fā)生。
[0009]3.通過進一步的細胞實驗的結(jié)果顯示質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑明顯的誘導了人肝細胞癌細胞的凋亡。
[0010]因此，本發(fā)明提出了質(zhì)子泵抑制劑在制備治療肝細胞肝癌藥物中的應用的技術(shù)方案。
[0011]本發(fā)明的技術(shù)效果是:本發(fā)明發(fā)現(xiàn)質(zhì)子泵抑制劑能有效地抑制肝細胞癌細胞的增殖和生長，抑制肝細胞癌的發(fā)生，誘導肝細胞癌細胞的凋亡。質(zhì)子泵抑制劑是可以應用于制備能有效治療肝細胞癌的藥物，而質(zhì)子泵抑制劑在制備抗肝細胞癌藥物中的用途屬于首次公開，而且其在對于抑制人肝細胞癌細胞的增殖和生長方面有意想不到的作用，因此具備了突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步。
【附圖說明】
[0012]圖1展示了質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑?qū)θ烁渭毎┘毎鸋印G2、SMMC7721、Huh7、SK-HEP-1、PLC/PRF/5、MHCC-9H、MHHCC-97L 和 HCCLM3 細胞增殖的影響。
[0013]圖2展示了質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑?qū)Ω渭毎┘毎寺⌒纬赡芰蜕L曲線的影響。
[0014]圖3展示了質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑?qū)θ说母渭毎┘毎鸖MMC7721細胞在小鼠體內(nèi)生長和對小鼠肝細胞癌發(fā)生的影響。
[0015]圖4展示了質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑?qū)Ω渭毎┘毎鸖MMC7721和!fepG2凋亡的影響。
【具體實施方式】
[0016]下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
[0017]實施例1:
本發(fā)明所涉及的質(zhì)子泵抑制劑片劑的制備:
取質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑或其它質(zhì)子泵抑制劑400g，加入制備片劑的常規(guī)輔料(食用淀粉)100g，混勻，并用常規(guī)壓片機制備成片劑1000片。
[0018]實施例2:
本發(fā)明所涉及的質(zhì)子泵抑制劑膠囊劑的制備: 取質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑或其它質(zhì)子泵抑制劑400g，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料(食用淀粉)100g，混勻，并裝膠囊制備成膠囊劑1000粒。
[0019]實施例3:本發(fā)明所涉及的質(zhì)子泵抑制劑丸劑的制備:
取質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑或其它質(zhì)子泵抑制劑400g，加入制備丸劑的常規(guī)輔料(食用淀粉)100g，混勻，制備成丸劑1000丸。
[0020]實施例:4:
本發(fā)明所涉及的質(zhì)子泵抑制劑注射液的制備:
取質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑或其它質(zhì)子泵抑制劑0.5g,加入2ml無菌的溶液制備成泮托拉唑或其它質(zhì)子泵抑制劑注射液。
[0021]下面通過藥效學實驗來進一步說明質(zhì)子泵抑制劑在抗肝細胞癌藥物中的活性。
[0022]實驗例1:質(zhì)子泵抑制劑對人的肝細胞癌細胞增殖的影響:
我們選用了 8株人的肝細胞癌細胞株，分別在體外與不同劑量的質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑(P)培養(yǎng) 24、48 和 72 小時，通過 MTT【(4，5-Dimethylthiazol_2-yl) -2, 5-diphenyltetrazolium bromide, 3- (4, 5-二甲基噻唑-2)-2, 5-二苯基四氮唑溴鹽】方法分析不同劑量的泮托拉唑在與這些細胞作用不同時間后對這些肝細胞癌細胞增殖的影響。MTT方法是一種常用檢測細胞存活和增殖的方法，已廣泛用于大規(guī)模