混合均勻
[0049]1.3漿液制備:
[0050]稱取適量解凍后的I型膠原蛋白，加入到973ml上述乙酸溶液中，根據(jù)I型膠原蛋白含水量計(jì)算I型膠原蛋白用量，控制I型膠原蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3%，攪拌1-2小時(shí)，形成膠原乙酸溶脹液。
[0051]稱取0.1Og硫酸軟骨素加入27ml上述乙酸溶液中，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笥?.22 μ m的濾膜過濾除菌，利用蠕動(dòng)泵將其緩慢加入至已攪拌均勻的膠原乙酸溶脹液中，形成膠原-硫酸軟骨素衆(zhòng)液。
[0052]2空氣抽取
[0053]將攪拌后漿液加入抽濾瓶中，開啟真空泵不時(shí)輕搖抽濾瓶，抽至漿液內(nèi)無氣泡。
[0054]3冷凍干燥
[0055]3.1將抽氣除泡的膠原-硫酸軟骨素漿液250ml倒入不銹鋼凍干盤中，倒入后的厚度為5_±0.5mm,經(jīng)過預(yù)凍,抽真空,梯度冷凍升溫等步驟進(jìn)行冷凍干燥。
[0056]3.2將冷凍干燥后的膠原-硫酸軟骨素海綿利用壓膜機(jī)壓制為厚度Imm的膠原復(fù)合薄膜。
[0057]3.3兩層膠原復(fù)合薄膜之間均勻的噴涂漿液后，將兩片膜粘貼在一起，進(jìn)行第二次真空冷凍干燥。
[0058]4真空高溫交聯(lián)
[0059]將第二次真空冷凍干燥后的復(fù)合薄膜包裹一層鋁箔紙，置于高溫真空干燥箱中，真空環(huán)境下90°C交聯(lián)36h。
[0060]5環(huán)氧乙烷滅菌
[0061]將交聯(lián)后的薄膜切割不同規(guī)格，雙層包裝后，利用環(huán)氧乙烷滅菌。
[0062]實(shí)施例2
[0063]本發(fā)明的口腔生物膜的制備方法，其制包括以下步驟:
[0064]1.漿液制備
[0065]1.1原料解凍:
[0066]I型膠原蛋白自冷凍室取出，解凍。
[0067]1.2乙酸溶液制備:
[0068]取2_6ml乙酸至100ml錐形瓶加無菌水至1000ml,混合均勻；
[0069]1.3漿液制備:
[0070]稱取適量解凍后的I型膠原蛋白，加入到865ml上述乙酸溶液中，根據(jù)I型膠原蛋白含水量計(jì)算I型膠原蛋白用量，控制I型膠原蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%，攪拌1-2小時(shí)，形成膠原乙酸溶脹液。
[0071]稱取0.5g硫酸軟骨素加入135ml上述乙酸溶液中，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笥?.22 μ m的濾膜過濾除菌，利用蠕動(dòng)泵將其緩慢加入至已攪拌均勻的膠原乙酸溶脹液中，形成膠原-硫酸軟骨素衆(zhòng)液。
[0072]2空氣抽取
[0073]將攪拌后漿液加入抽濾瓶中，開啟真空泵不時(shí)輕搖抽濾瓶，抽至漿液內(nèi)無氣泡。
[0074]3冷凍干燥
[0075]3.1將抽氣除泡的衆(zhòng)液250ml倒入不銹鋼凍干盤中，倒入后的厚度為5mm±0.5mm,
經(jīng)過預(yù)凍，抽真空，梯度冷凍升溫等步驟進(jìn)行冷凍干燥。
[0076]3.2將冷凍干燥后的膠原-硫酸軟骨素海綿利用壓膜機(jī)壓制為厚度2mm的I型膠原蛋白月吳。
[0077]3.3兩層I型膠原蛋白膜之間均勻的噴涂漿液后，將兩片膜粘貼在一起，二次冷凍干燥。
[0078]4真空高溫交聯(lián)
[0079]將二次冷凍干燥后的復(fù)合薄膜包裹一層鋁箔紙，置于高溫真空干燥箱中，真空環(huán)境下110°C交聯(lián)24h。
[0080]5環(huán)氧乙烷滅菌
[0081]將交聯(lián)后的薄膜切割不同規(guī)格，雙層包裝后，利用環(huán)氧乙烷滅菌。
[0082]通過上述具體實(shí)施例提供的口腔生物膜的制備方法可以快速的得到口腔生物膜，本發(fā)明制作出的口腔生物膜具有以下優(yōu)點(diǎn):(1)采用牛跟腱為基材，經(jīng)過除雜、清洗、酸堿鹽及生物學(xué)處理，提取的高純度膠原蛋白制作而成，具有良好的組織相容性，適宜可控的降解吸收性，低抗原性，良好的可塑性和力學(xué)性能。
[0083](2)采用兩次真空冷凍干燥的方式的膠原-硫酸軟骨素復(fù)合膜，為致密薄膜狀材料，具有良好的力學(xué)性能，便于臨床操作及使用要求。
[0084](3)用于口腔科手術(shù)后，其三維多孔結(jié)構(gòu)為損傷組織的修復(fù)提供了組織工程支架，有利于細(xì)胞的侵入及分化生長，可誘導(dǎo)缺損組織的修復(fù)再生，其特定的厚度可以有效的阻止軟組織的長入。
[0085]本發(fā)明不局限于上述最佳實(shí)施方式，任何人在本發(fā)明的啟示下都可得出其他各種形式的產(chǎn)品，但不論在其形狀或結(jié)構(gòu)上作任何變化，凡是具有與本申請相同或相近似的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種口腔生物膜制備方法，其特征在于，包括下述步驟: 將I型膠原蛋白加入到0.2% -0.6%的乙酸溶液中配置成膠原乙酸溶脹液； 在配置好的膠原乙酸溶脹液中加入硫酸軟骨素，攪拌配置成膠原-硫酸軟骨素衆(zhòng)液； 將攪拌均勻的膠原-硫酸軟骨素漿液倒入不銹鋼凍干盤中，置于真空冷凍干燥機(jī)中進(jìn)行第一次真空冷凍干燥； 將第一次真空冷凍干燥后的膠原-硫酸軟骨素漿液利用壓膜機(jī)壓制成膠原復(fù)合薄膜； 在兩層膠原復(fù)合薄膜中噴涂一層膠原-硫酸軟骨素漿液，放入到真空冷凍干燥機(jī)內(nèi)進(jìn)行第二次真空冷凍干燥； 將第二次真空冷凍干燥后的膠原復(fù)合薄膜進(jìn)行高溫真空交聯(lián)； 將交聯(lián)后的膠原復(fù)合薄膜進(jìn)行環(huán)氧乙烷滅菌，得到膠原-硫酸軟骨素復(fù)合口腔生物膜。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的口腔生物膜制備方法，其特征在于，所述I型膠原蛋白為從牛跟腱中提取的I型膠原蛋白，在加入到0.2% -0.6%的乙酸溶液中時(shí)，控制I型膠原蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)在0.3% -0.8%之間，在15°C _25°C溫度下以每分鐘16000r_20000r高速攪拌，配制成膠原乙酸溶脹液。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的口腔生物膜制備方法，其特征在于，在所述配置好的膠原乙酸溶脹液中加入硫酸軟骨素時(shí)，控制硫酸軟骨素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)在0.01% -0.05%之間，10C -20°C下以每分鐘16000r-20000r高速攪拌，配制成膠原-硫酸軟骨素漿液。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的口腔生物膜制備方法，其特征在于，在將攪拌均勻的膠原-硫酸軟骨素衆(zhòng)液倒入不銹鋼凍干盤中時(shí)，倒入后的厚度為5_±0.5_。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的口腔生物膜制備方法，其特征在于，在將膠原-硫酸軟骨素漿液進(jìn)行真空冷凍干燥時(shí)，采用梯度冷卻的方式進(jìn)行冷卻。6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的口腔生物膜制備方法，其特征在于，所述經(jīng)壓膜機(jī)壓制成的膠原復(fù)合薄膜的厚度為l_3mm。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的口腔生物膜制備方法，其特征在于，所述高溫真空交聯(lián)為在900C -110°C的高溫真空干燥箱中進(jìn)行高溫真空交聯(lián)。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的口腔生物膜的制備方法，其特征在于，所述的交聯(lián)方式為物理交聯(lián)，交聯(lián)時(shí)間為24-36h。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種口腔生物膜制備方法，該制備方法包括將I型膠原蛋白加入到乙酸溶液中制成膠原乙酸溶脹液；在其中加入硫酸軟骨素，攪拌配置成膠原-硫酸軟骨素漿液；將其真空冷凍干燥；之后壓制成膠原復(fù)合薄膜；在兩層膠原復(fù)合薄膜中噴涂膠原-硫酸軟骨素漿液，并進(jìn)行真空冷凍干燥；之后再高溫真空交聯(lián)；交聯(lián)后滅菌得到膠原-硫酸軟骨素復(fù)合口腔生物膜。本發(fā)明的有益效果為：采用本方法制作的口腔生物膜具有良好的組織相容性，適宜可控的降解吸收性，低抗原性，良好的可塑性和力學(xué)性能。用于口腔科手術(shù)，其三維多孔結(jié)構(gòu)為損傷組織的修復(fù)提供了組織工程支架，有利于細(xì)胞的侵入及分化生長，可誘導(dǎo)缺損組織的修復(fù)再生，其特定的厚度可以有效的阻止軟組織的長入。
【IPC分類】A61L27/56, A61L27/58, A61L27/48
【公開號】CN104922732
【申請?zhí)枴緾N201410101451
【發(fā)明人】康承桂, 董會, 劉永霞
【申請人】北京天新福醫(yī)療器材有限公司
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2014年3月19日