大鼠60只，體重0. 35kg-0. 4kg，將60只大鼠隨機分為5組，每 組12只，分別為假手術(shù)組、模型組、低劑量組、中劑量組和高劑量組。用高脂飼料喂養(yǎng)，不限 攝水。假手術(shù)組進(jìn)行假手術(shù)，其余4組進(jìn)行單側(cè)腎臟結(jié)扎手術(shù)后用鏈脲佐菌素注射腹腔。 手術(shù)前大鼠禁食12h，注射戊巴比妥鈉溶液進(jìn)行麻醉，確認(rèn)麻醉后，假手術(shù)組大鼠切開皮膚 及肌層后再行縫合，其余組沿腎蒂結(jié)扎腎臟動靜脈及輸尿管。術(shù)后2周時，各組大鼠禁食 18h，假手術(shù)組大鼠一次性注射同等劑量的檸檬酸緩沖液，其余組一次性腹腔注射1%鏈脲 佐菌素溶液0. 55g/kg，具體給藥體積為5. 5ml/kg，注射后大鼠自由攝食攝水。造模完成72h 后，經(jīng)尾靜脈采血測血糖。造模成功標(biāo)準(zhǔn)：①空腹血糖彡16. 65mmol/L ;②尿糖強陽性；③尿 量大于對照組的50%，即模型成立。
[0035] 2、試驗方法 造模結(jié)束后，各組喂養(yǎng)1周后檢測各組大鼠空腹血糖，留取各組大鼠尿量，測量24h尿 蛋白量。然后，各組大鼠按如下劑量灌胃給予相應(yīng)的受試物：高、中、低劑量組分別灌胃本發(fā) 明實施例3制備得到的中藥組合物的高、中、低劑量，分別為0. 21g/kg · d、0. 63 g/kg · d和 1.26 g/kg*d;假手術(shù)組和模型組以等體積的蒸餾水灌胃。于給藥6周后采用葡萄糖氧化 酶法檢測大鼠空腹血糖、免疫凝膠擴散法測糖化血紅蛋白、代謝籠收集大鼠24h尿液，計算 24h尿量及24h尿蛋白量。
[0036] 3、試驗結(jié)果 表2各組糖尿病腎病大鼠血糖變化比較
注：與假手術(shù)組比較，< 〇. 01，與模型組比較，aP < 〇. 〇5，AAP < 0. 01。
[0037] 表3各組糖尿病腎病大鼠糖化血紅蛋白比較
注：與假手術(shù)組比較，**P < 〇. 01，與模型組比較，aP < 〇. 05。
[0038] 表4各組糖尿病腎病大鼠尿量變化的比較
注：與假手術(shù)組比較，**P < 0. 01，與模型組比較，aP < 0. 〇5，AAP < 0. 01。
[0039] 表5各組糖尿病腎病大鼠尿蛋白變化的比較
注：與假手術(shù)組比較，< 〇. 01，與模型組比較，aP < 〇. 〇5，AAP < 0. 01。
[0040] 4、結(jié)論 本實驗通過建立糖尿病腎病大鼠模型，模擬糖尿病腎病患者的患病情況，通過灌胃給 藥，得出本發(fā)明中藥組合物的治療效果。由表2得知，高中低劑量組的大鼠給藥后血糖值 明顯降低，并且與模型組相比，具有顯著性的差異，而模型組與假手術(shù)組比較，給藥前與給 藥后的血糖值均有極顯著的差異；由表3得知，給藥后，高中低劑量組的大鼠糖化血紅蛋白 與模型組的有顯著性的差異；由表4得知，高中低劑量組的大鼠給藥后尿量明顯降低，并且 與模型組相比，具有顯著性的差異，而模型組與假手術(shù)組比較，給藥前與給藥后的尿量均有 極顯著的差異；由表5得知，高中低劑量組的大鼠給藥后尿蛋白明顯降低，并且與模型組相 比，具有顯著性的差異，而模型組與假手術(shù)組比較，給藥前與給藥后的尿蛋白均有極顯著的 差異?？梢?，本發(fā)明中藥組合物可明顯降低糖尿病腎病大鼠的血糖值、糖化血紅蛋白、尿量 和尿蛋白，在治療糖尿病腎病方面具有顯著的療效，可作為治療糖尿病腎病的藥物使用。
[0041] 由于已經(jīng)通過以上較佳實施例描述了本發(fā)明，在本發(fā)明的精神和/或范圍內(nèi)，任 何針對本發(fā)明的替換/或組合來實施本發(fā)明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說都是顯而易見 的，且包含在本發(fā)明之中。
【主權(quán)項】
1. 一種治療糖尿病腎病的中藥組合物，其特征在于，所述中藥組合物包括以下重量份 數(shù)的制備原料：5-30份辣木葉總黃酮、1-18份二苯乙烯苷、1-10份人參皂苷RbU 1-10份人 參皂苷RgU 1-2份人參皂苷RcU 1-4份人參皂苷Re、1-4份銀杏內(nèi)酯、1-2份山奈酚和1-2份 槲皮素。2. 如權(quán)利要求1所述的治療糖尿病腎病的中藥組合物，其特征在于，所述中藥組合物 包括以下重量份數(shù)的制備原料：5份辣木葉總黃酮、1份二苯乙烯苷、1份人參皂苷Rbl、1份 人參皂苷RglU份人參皂苷RcUl份人參皂苷Re、l份銀杏內(nèi)酯、1份山奈酚和1份槲皮素。3. 如權(quán)利要求1所述的治療糖尿病腎病的中藥組合物，其特征在于，所述中藥組合物 包括以下重量份數(shù)的制備原料：30份辣木葉總黃酮、18份二苯乙烯苷、10份人參皂苷RbU 10份人參皂苷Rgl、2份人參皂苷Rd、4份人參皂苷Re、4份銀杏內(nèi)酯、2份山奈酚和2份槲 皮素。4. 如權(quán)利要求1所述的治療糖尿病腎病的中藥組合物，其特征在于，所述中藥組合物 包括以下重量份數(shù)的制備原料：20份辣木葉總黃酮、10份二苯乙烯苷、5份人參皂苷Rbl、5 份人參皂苷Rgl、l. 5份人參皂苷Rd、2份人參皂苷Re、2份銀杏內(nèi)酯、1. 5份山奈酚和1. 5份 槲皮素。5. 如權(quán)利要求1-4任一所述的治療糖尿病腎病的中藥組合物，其特征在于：所述中藥 組合物被制成膠囊劑、片劑、散劑、顆粒劑、口服液或丸劑。6. 如權(quán)利要求1-4任一所述的治療糖尿病腎病的中藥組合物，其特征在于，所述辣木 葉總黃酮的制備方法包括下述步驟： A :稱取辣木葉，干燥，粉碎，過45目篩，得到辣木葉粉； B :取步驟A得到的辣木葉粉，加入石油醚，在68°C下回流脫脂3次，每次6 h，過濾，去 濾液，將濾渣干燥，得干燥濾渣； C :往步驟B得到的干燥濾渣中加入70%乙醇，在微波功率600W下處理7min，超聲提取 2次，每次提取25min，過濾得到提取液，合并提取液，得辣木葉總黃酮粗提取液； D :將步驟C得到的粗提取液加入到AB-8型大孔吸附樹脂柱中，依次用蒸餾水和體積分 數(shù)分別為30%、50%、70%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫，以NaNO2-Al (NO3) 3-NaOH體系顯色檢測，在波 長為510nm下測定吸光度檢識，收集50%和70%的乙醇洗脫液，合并洗脫液，將洗脫液減壓 回收乙醇并濃縮至原體積的1/5,得濃縮液，將濃縮液置于60°C水浴中蒸干至相對密度為 1. 25的浸膏，干燥，得辣木葉總黃酮粉末。7. -種制備如權(quán)利要求1-4任一所述的治療糖尿病腎病的中藥組合物的方法，其特征 在于包括下述步驟：稱取二苯乙烯苷、人參皂苷RbU人參皂苷RgU人參皂苷RcU人參皂苷 Re、銀杏內(nèi)酯、山奈酚和槲皮素，加入初始原料8-12倍重量的水，浸泡12-24小時，回流煎煮 1-3小時，過濾，再加入初始原料3-6倍重量的水，回流煎煮1-3小時，過濾，得到濾液，合并 濾液，濃縮至50°C _60°C相對密度為1. 25-1. 35的中藥浸膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，與辣木葉總 黃酮混合，攪拌均勻，即得本發(fā)明中藥組合物。
【專利摘要】本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種治療糖尿病腎病的中藥組合物及其制備方法。該中藥組合物包括以下制備原料：辣木葉總黃酮、二苯乙烯苷、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rd、人參皂苷Re、銀杏內(nèi)酯、山奈酚和槲皮素。本發(fā)明的藥物組方合理，協(xié)同作用強，作為治療糖尿病腎病的藥物配伍使用，經(jīng)臨床驗證，取得了非常顯著的效果。
【IPC分類】A61K36/185, A61K31/352, A61K31/704, A61P13/12, A61P3/10
【公開號】CN104983759
【申請?zhí)枴緾N201510481693
【發(fā)明人】劉春同
【申請人】青島藍(lán)盛洋醫(yī)藥生物科技有限責(zé)任公司
【公開日】2015年10月21日
【申請日】2015年8月10日