有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料的制備方法及產(chǎn)品的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于及材料領(lǐng)域，具體涉及有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料的制備方法，還涉及該方法制得的產(chǎn)品。
【背景技術(shù)】
[0002]女性盆腔臟器脫垂是一種常見(jiàn)病，國(guó)內(nèi)發(fā)病率約為40%并且逐年增加，已成為嚴(yán)重影響中老年婦女健康和生活質(zhì)量的主要婦科問(wèn)題。臨床目前廣泛使用的聚丙烯合成材料作為婦科盆底補(bǔ)片，該補(bǔ)片雖然療效確切，但具有順應(yīng)性差、組織侵蝕性強(qiáng)、感染率高等缺點(diǎn)，并易導(dǎo)致性交痛等相關(guān)并發(fā)癥。2014年，國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授權(quán)的盆底補(bǔ)片復(fù)合生物材料的制備方法及其產(chǎn)品(專(zhuān)利號(hào):ZL201210153430.8)公布了一種利用超高壓的方法，將天然材料復(fù)合到合成材料表面的一種方法，但該方法需要使用特殊設(shè)備，操作復(fù)雜，成本較高，限制了規(guī)?；a(chǎn)和使用。
[0003]因此，急需一種成本較低的盆底補(bǔ)片復(fù)合生物材料，且操作簡(jiǎn)單，不需要特殊設(shè)備，便于規(guī)?；a(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]有鑒于此，本發(fā)明的目的之一在于提供有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料的制備方法，操作簡(jiǎn)單，不需要特殊設(shè)備，易于規(guī)?；a(chǎn)；本發(fā)明的目的之二在于提供由上述方法制得的有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料，即具有聚丙烯材料的力學(xué)性質(zhì)，又具有脫細(xì)胞基質(zhì)的組織相容性。
[0005]為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
[0006]有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料的制備方法，將多巴胺活化的聚丙烯網(wǎng)片浸沒(méi)于脫細(xì)胞基質(zhì)溶液中，然后加入溶解有EDC和NHS的MES緩沖液鍍膜反應(yīng)，得有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料；所述脫細(xì)胞基質(zhì)溶液為含有脫細(xì)胞基質(zhì)的MES緩沖液
[0007]1、將多巴胺活化的聚丙烯網(wǎng)片浸沒(méi)于脫細(xì)胞基質(zhì)溶液中，然后加入溶解有EDC和NHS的MES緩沖液鍍膜反應(yīng)，得有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料；所述脫細(xì)胞基質(zhì)溶液為含有脫細(xì)胞基質(zhì)的MES緩沖液，其中EDC的全稱(chēng)是N-(3-dimethylaminopropyl)-N ‘-ethylcarbodiimide hydrochloride (1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺)，NHS 的全稱(chēng)是N-hydroxy-succinimide (NHS, N.輕基丁二酰亞胺)。
[0008]優(yōu)選的，所述多巴胺活化是在濃度為0.1?5mg/ml的多巴胺Tris-HCl溶液中避光浸泡18?24小時(shí)；更優(yōu)選的，所述多巴胺活化是在濃度為2mg/ml的多巴胺溶液中避光浸泡18?24小時(shí)，所述多巴胺溶液的溶劑為1mM Tris-HCl緩沖液，pH為8.5。
[0009]優(yōu)選的，所述脫細(xì)胞基質(zhì)溶液的濃度為0.1?I ;更優(yōu)選的，所述脫細(xì)胞基質(zhì)溶液的濃度為0.5mg/ml，pH為5.5。
[0010]更優(yōu)選的，所述加入溶解有EDC和NHS的MES緩沖液后，EDC和NHS的終濃度分別為 20mM 和 50mM。
[0011]進(jìn)一步優(yōu)選的，所述鍍膜反應(yīng)為4 °C避光反應(yīng)48h。
[0012]本發(fā)明中所述脫細(xì)胞基質(zhì)可以采用現(xiàn)有技術(shù)的其他方法制得，優(yōu)選的，取動(dòng)物組織，剪成塊，用水沖洗后進(jìn)行消毒，然后進(jìn)行脫脂，再浸入醋酸溶液中溶脹，最后進(jìn)行勻漿，得勻漿液；將所得勻漿液用胃蛋白酶酶解；然后用氯化鈉鹽析，經(jīng)離心后收集沉淀，得脫細(xì)胞基質(zhì)。
[0013]優(yōu)選的，所述消毒是用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的新潔爾滅，消毒至少15分鐘；
[0014]所述脫脂為將動(dòng)物組織浸入脫脂液中，在溫度為4°C，攪拌至少16小時(shí)；所述脫脂液是乙醇:異丙醇:水體積比為7:4:89的混合物；
[0015]所述溶脹是加入相當(dāng)于動(dòng)物組織1-10倍重量的醋酸溶液，在溫度為4°C條件下，浸泡24小時(shí)；
[0016]所述酶解是加入相當(dāng)于勻漿液體積10倍的醋酸溶液和相當(dāng)于勻漿液重量1%的胃蛋白酶，在溫度為4°C條件下，處理48小時(shí)；
[0017]所述鹽析中氯化鈉的終濃度為2mol/L，鹽析時(shí)間為2小時(shí)。
[0018]優(yōu)選的，所述醋酸溶液是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%的醋酸溶液。
[0019]更優(yōu)選的，所述動(dòng)物組織為豬去粘膜層膀胱或豬去皮下組織皮膚。
[0020]2、由所述方法制備的有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料。
[0021]本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明公開(kāi)了有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料的制備方法，采用生物鍍膜方法獲得，所制備的復(fù)合材料表面鍍膜均勻，既具有聚丙烯材料的力學(xué)性質(zhì)，又具有脫細(xì)胞基質(zhì)的組織相容性好，植入后無(wú)明顯的炎癥反應(yīng)，且制作過(guò)程不需專(zhuān)業(yè)設(shè)備、生產(chǎn)成本低，易于規(guī)?；a(chǎn)，有望拓展該復(fù)合材料在再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用。
【附圖說(shuō)明】
[0022]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和有益效果更加清楚，本發(fā)明提供如下附圖:
[0023]圖1為有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料表面SEM分析(A:鍍膜前，500 X ；B:鍍膜前，20000X ;C:鍍膜后，500X ;D:鍍膜后，20000X)。
[0024]圖2為有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料相容性試驗(yàn)(A:聚丙烯網(wǎng)片，植入后4周；B:有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料)。
【具體實(shí)施方式】
[0025]下面將結(jié)合附圖，對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。
[0026]實(shí)施例1
[0027]有機(jī)-無(wú)機(jī)核鞘結(jié)構(gòu)復(fù)合生物材料的制備方法，具體包括以下步驟:
[0028](I)制備脫細(xì)胞組織基質(zhì)
[0029]取豬的新鮮膀胱，用自來(lái)水清洗干凈，然后去表面粘膜層，得豬真皮組織；
[0030]將所得豬真皮組織用剪刀剪成小塊，用純水沖洗3遍，然后用消毒液浸泡15分鐘，其中消毒液為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1 %新潔爾滅；
[0031]將豬真皮組織浸入脫脂液中，置于溫度為4°C條件下，磁力攪拌16小時(shí)進(jìn)行脫脂，得脫脂豬真皮組織；其中脫脂液為乙醇:異丙醇:水按體積比為7:4:89混合；
[0032]將所得脫脂