甘草次酸在制備抗輻射產(chǎn)品中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥、食品、飲料等技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)是涉及甘草次酸的新用途，即 甘草次酸在制備抗輻射產(chǎn)品中的新應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著核技術(shù)廣泛應(yīng)用于軍事、科技、醫(yī)療和生產(chǎn)中，人們與各種射線接觸的機(jī)會(huì)日 益增多，遭受輻射損傷的可能性也越來(lái)越大。輻射作用于生物體時(shí)，引起電離并產(chǎn)生自由 基，進(jìn)而發(fā)生一系列的生物化學(xué)反應(yīng)，改變細(xì)胞膜的通透性，攻擊DNA、RNA和蛋白質(zhì)大分 子，導(dǎo)致細(xì)胞喪失正常的功能。人體中的淋巴細(xì)胞對(duì)電離輻射最為敏感，其他依次為性腺細(xì) 胞、增殖的骨髓細(xì)胞、腸上皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞、肝細(xì)胞等。因此，輻射對(duì)人體的損傷主要表現(xiàn) 在免疫系統(tǒng)、造血系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)。對(duì)抗輻射藥物的研制雖然經(jīng)過(guò)幾十年的不懈努力，發(fā)現(xiàn) 了一些有效藥物，但現(xiàn)在可使用的抗輻射藥物仍較少，包括雌激素如尼爾雌醇和含硫化合 物氨磷汀，但副作用較多。含硫輻射防護(hù)劑表現(xiàn)出了較好的預(yù)防作用，但其毒副作用明顯， 只有在達(dá)到中毒劑量時(shí)才顯示出抗福射活性。
[0003] 天然產(chǎn)物含有結(jié)構(gòu)多樣的化學(xué)成分，其中許多具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化和清除自由 基等作用，能夠通過(guò)多靶點(diǎn)減緩輻射對(duì)人體的損傷，并且具有毒副作用小的優(yōu)點(diǎn)，成為輻射 防護(hù)藥物研究的熱點(diǎn)。天然產(chǎn)物中的活性成分黃酮類(lèi)、多糖類(lèi)和皂苷類(lèi)等對(duì)受到輻射的動(dòng) 物和人細(xì)胞具有良好的防護(hù)作用。（參考文獻(xiàn)：趙璐等，天然活性成分抗輻射作用的研究進(jìn) 展，藥學(xué)服務(wù)與研究，2012; 12 (2) :86-89.)
[0004] 甘草（Glycyrrhiza)是多年生草本植物，屬豆科甘草屬，以根及根莖入藥，是我 國(guó)傳統(tǒng)中草藥，性平，味甘，具有補(bǔ)脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、調(diào)和諸藥的功 效；有抗氧化、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力等多種藥理學(xué)活性。甘草中所含主要藥理學(xué)活性物質(zhì)是甘 草酸及其鹽（即甘草甜素），以及在體內(nèi)的水解活性成分甘草次酸和甘草黃酮等成分。甘 草次酸（817〇71'1'1161:;[11；^3(^(1，64)，屬五環(huán)三砲類(lèi)化合物，別名0-甘草亭酸 ；30-輕 基-11-氧-12-齊墩果烯-30酸，相對(duì)分子量為470. 68,具有抗炎、抗組胺、抗腫瘤和降血糖 等多種生物學(xué)作用，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式（I )所示：
[0005]
[0006] 申鍵等報(bào)道了甘草醇總提取物不同劑量照射后灌胃給藥對(duì)不同輻射劑量的小 鼠均具有明顯的保護(hù)作用（申鍵，等，甘草提取物抗輻射效應(yīng)的研究，內(nèi)蒙古大學(xué)學(xué)報(bào)， 2015,46(1) :75-80.)。王亞南等報(bào)道了甘草酸單銨鹽對(duì)微波輻射造成的機(jī)體功能失衡 有一定的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與清除自由基、提高機(jī)體抗氧化能力有關(guān)（王亞南，等， 甘草酸單銨鹽對(duì)微波輻射大鼠血液損傷防護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究，世界中西醫(yī)結(jié)合雜志， 2013, 8(5) :445-447)。
[0007] 目前尚無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道甘草次酸與輻射防護(hù)相關(guān)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于提供甘草次酸的新用途，具體是甘草次酸在制備抗輻射產(chǎn)品中 的應(yīng)用。
[0009] 本發(fā)明通過(guò)大量篩選抗輻射作用的植物提取物和單體過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)了甘草次酸具 有抗輻射作用，并且發(fā)現(xiàn)甘草次酸的抗輻射作用強(qiáng)于甘草醇總提取物、甘草水總提取物、甘 草酸（甘草皂苷）和甘草黃酮的作用。本發(fā)明顯示將甘草次酸提前給予將要接受輻射的細(xì) 胞或動(dòng)物，可以提高細(xì)胞存活率和減少細(xì)胞凋亡，增加小鼠的生存率和改善輻射小鼠小腸 組織損傷，表明甘草次酸具有抗輻射損傷作用。
[0010] 本發(fā)明提供了甘草次酸在制備抗輻射產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0011] 本發(fā)明所述的抗輻射產(chǎn)品，為預(yù)防或治療輻射損傷的藥物、保健食品、保健飲料 等。
[0012] 本發(fā)明所述的藥物，為甘草次酸作為唯一活性成份或包含甘草次酸的藥物組合 物。
[0013] 本發(fā)明所述的藥物中，甘草次酸的含量為>50% wt%，最優(yōu)為多98% wt%。
[0014] 本發(fā)明所述的藥物中，甘草次酸按常規(guī)藥劑學(xué)可以制成各種劑型，所述的劑型包 括片劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑、膏劑、貼劑或注射劑等中的一種或 多種，采取口服、外用、注射（包括靜脈注射、靜脈滴注、肌肉注射或皮下注射等中的一種或 多種）等中的一種或多種給藥途徑進(jìn)行輻射及其直接相關(guān)疾病的預(yù)防、保護(hù)或治療。
[0015] 本發(fā)明所述的輻射，為核輻射、電離輻射等。
[0016] 本發(fā)明經(jīng)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，甘草次酸可以提高γ射線輻射后細(xì)胞和動(dòng)物 的存活率，減少γ射線引起的細(xì)胞凋亡，改善輻射小鼠小腸組織的病變，說(shuō)明甘草次酸具 有抗輻射保護(hù)作用。
[0017] 本發(fā)明提供了一種新的天然產(chǎn)物能夠通過(guò)多靶點(diǎn)減緩輻射對(duì)人體的損傷，并且具 有毒副作用小的優(yōu)點(diǎn)；甘草次酸將成為一種新型的輻射防護(hù)藥物。本發(fā)明也為預(yù)防或治療 輻射損傷提供了新的手段。
【附圖說(shuō)明】
[0018] 圖1.甘草次酸對(duì)6°Co輻射C57小鼠后生存率的影響。
[0019] 圖2.甘草次酸對(duì)6°Co輻射C57小鼠后腸道損傷的病理組織學(xué)觀察，其中A為OGy， B為4Gy，C為4Gy+甘草次酸。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 現(xiàn)結(jié)合實(shí)施例和附圖，對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)描述，但本發(fā)明的實(shí)施不僅限于此。
[0021] 本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得或可按文獻(xiàn)方法制備。
[0022] 除非另外說(shuō)明，否則百分比和份數(shù)按重量計(jì)算。
[0023] 實(shí)施例1.甘草次酸對(duì)輻射引起細(xì)胞損傷的保護(hù)作用
[0024] I. 1實(shí)驗(yàn)材料
[0025] 甘草次酸，購(gòu)自大連美侖生物技術(shù)有限公司。
[0026] 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株（HUVEC)購(gòu)自中科院上海細(xì)胞庫(kù)。
[0027] 1. 2實(shí)驗(yàn)方法
[0028] I. 2. IMTT法檢測(cè)甘草次酸對(duì)輻射所致細(xì)胞損傷的保護(hù)作用
[0029] 實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組（未接受輻射、未給藥）、模型組（接受輻射、未給藥）、給藥組（接 受輻射、給藥）。
[0030] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HUVEC細(xì)胞以1.0 X IO5Ail的密度接種于96孔板中，每孔100 μ L， 接種24h后待細(xì)胞全部貼壁，換成無(wú)血清的DMEM培養(yǎng)基繼續(xù)孵育8h進(jìn)行平衡，平衡后將各 孔中DMEM培養(yǎng)基移除，對(duì)照組和模型組換成正常細(xì)胞培養(yǎng)液、給藥組加入100 μ L含有終濃 度10 μ M的化合物（甘草次酸、甘草酸、甘草黃酮）的細(xì)胞培養(yǎng)液，共同孵育24h后，一次性 給予20Gy6°C〇- γ射線輻射，繼續(xù)培養(yǎng)24h，MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率。
[0031] 1. 2. 2流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
[0032] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HUVEC細(xì)胞以1.0 XlOVml的密度接種于6孔板中，每孔2ml，24h 細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)后，平衡8h，移除DMEM，給藥組加入2ml含有終濃度10 μ M甘草次酸的細(xì)胞培 養(yǎng)液，共同孵育24h后，一次性給予20Gy6°C〇- γ射線輻射，繼續(xù)培養(yǎng)24h后，消化細(xì)胞并離 心收集，按Annexin V -PI凋