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      一種可增強(qiáng)免疫功能的中藥復(fù)方組合物及其制備方法_3

      文檔序號(hào):9280642閱讀:來(lái)源:國(guó)知局
      制備方法,包括以下步驟:將鹿角霜、 龜甲、黨參、枸杞子和迭鞘石斛洗凈、切制并干燥,取600g鹿角霜凈料投入提取罐中,加水 提取3次,每次煎煮的時(shí)間分別為:30h、30h、20h,合并3次提取液,過(guò)濾,濾液濃縮至相對(duì) 密度為1. 1,得濃縮液B ;取600g龜甲凈料投入提取罐中,加水提取3次,每次24h,合并三 次提取液,過(guò)濾,濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 1,得濃縮液A ;取114g黨參、226g枸杞子凈藥 材,加水煎煮3次,煎煮時(shí)間分別為2h、2h、l. 5h,合并三次提取液,過(guò)濾,濾液濃縮至相對(duì)密 度為1. 1,得濃縮液C ;取400g石斛在60°C干燥處理使含水量為2%,置超微粉碎機(jī)中粉碎 30min,得石斛超微粉;合并上述各濃縮液,混勻,繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1. 3稠膏,加入石 斛超微粉,70°C下干燥,粉碎成細(xì)粉,即為本發(fā)明的提取干藥粉;或取上述濃縮液合并,醇沉 24h,過(guò)濾,濾液即為本發(fā)明的提取藥液。
      [0055] 實(shí)施例6 :
      [0056] -種本發(fā)明的增強(qiáng)免疫功能的中藥組合物的制備方法,包括以下步驟:將馬鹿 角、龜板、黨參、枸杞子和束花石斛洗凈、切制并干燥,取600g鹿角凈料投入提取罐中,加 水提取3次,提取時(shí)間分別為:30h、30h、20h,合并3次提取液,過(guò)濾,濾液濃縮至相對(duì)密度 為1. 2,得濃縮液B ;取600g龜板凈料投入提取罐中,加水提取3次,每次24h,合并三次提 取液,過(guò)濾,濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 2,得濃縮液A ;取114g黨參、226g枸杞子凈藥材,加 水煎煮3次,煎煮時(shí)間分別為2h、2h、I. 5h,合并三次提取液,過(guò)濾,濾液濃縮至相對(duì)密度為 1. 2,得濃縮液C ;取400g石斛鮮條,軟化后放入打漿機(jī)中打漿,再置膠體磨中細(xì)磨至渣均勻 一致,過(guò)80目篩濾機(jī),濾液與上述各濃縮液合并,混勻,繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1. 3稠膏, 60 °C下干燥,粉碎成細(xì)粉,即為本發(fā)明的提取干藥粉;或取上述濃縮液合并,醇沉24h,過(guò) 濾,濾液即為本發(fā)明的提取藥液。
      [0057] 實(shí)施例7 :
      [0058] 將上述各實(shí)施例中任何一提取干藥粉中加入140g淀粉,混勻,制粒,過(guò)篩,裝1000 粒膠囊,即為本發(fā)明的增強(qiáng)免疫功能的中藥組合物的膠囊劑。
      [0059] 實(shí)施例8 :
      [0060] 將上述各實(shí)施例中任何一提取干藥粉中加入乳糖100g,糊精500g,制粒,整粒,過(guò) 篩,制成1000 g顆粒,即為本發(fā)明的增強(qiáng)免疫功能的中藥組合物的顆粒劑。
      [0061] 實(shí)施例9:
      [0062] 將上述各實(shí)施例中任何一提取干藥粉中加入淀粉510g、糊精102g、微粉硅膠34g, 以90 %的乙醇為潤(rùn)濕劑制軟材,制粒,干燥,整粒,加羧甲基纖維素鈉50g,硬脂酸鎂4g,總 混,壓片,制成0. 3g/片規(guī)格的片劑,即為本發(fā)明的增強(qiáng)免疫功能的中藥組合物的片劑。
      [0063] 實(shí)施例10 :
      [0064] 將上述各實(shí)施例中任何一提取干藥液中加入0. 3%苯甲酸鈉,400ml蒸餾水,灌 裝,滅菌,制成1000 ml 口服液,即為本發(fā)明的增強(qiáng)免疫功能的中藥組合物的口服液。
      [0065] 增強(qiáng)免疫功能的實(shí)驗(yàn)研究
      [0066] 1)對(duì)小鼠免疫器官臟器指數(shù)的影響
      [0067] 取上述實(shí)施例1~6中任何一提取藥液,加水稀釋一倍,經(jīng)胃灌藥給小鼠,每日一 次,連續(xù)21d,處死動(dòng)物,立即解剖并分離脾臟、胸腺,用濾紙吸去表面水分后,電子分析天 平稱量濕重,按下列公式計(jì)算免疫器官指數(shù):脾重指數(shù)=脾質(zhì)量(mg)/體質(zhì)量X100%,胸 腺重指數(shù)=胸腺質(zhì)量(mg)/體質(zhì)量X100%,與對(duì)照組比較其差異性。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 12. 0軟件進(jìn)行分析,結(jié)果如表1所示:
      [0068] 表1對(duì)小鼠免疫器官臟器指數(shù)的影響
      [0070] 注:與空白對(duì)照比較,有顯著性差異(P〈0. 05)
      [0071] 由表1可知,灌胃給本發(fā)明的提取藥液0. 2ml/10g. d,21d后,與生理鹽水組比較, 本發(fā)明的提取藥液對(duì)小鼠的免疫器官脾臟、胸腺的生長(zhǎng)發(fā)育和免疫活性細(xì)胞的增值有明顯 促進(jìn)作用。
      [0072] 2)對(duì)小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響
      [0073] 取上述實(shí)施例1~6中任何一提取藥液,加水稀釋一倍,經(jīng)胃灌藥給小鼠,每日一 次,連續(xù)21(1,每次給藥后111,小鼠尾靜脈注射25%印度墨水2〇1]11/1^,于注射后11]1;[11、51]1;[11 分別從小鼠的眼眶靜脈叢中采血20 μ 1,溶于3ml的0. 1 %似0)3溶液中搖勻,靜置20min后 于紫外分光光度計(jì)上680nm下測(cè)定OD值,以0. 1 % NaCO3溶液為空白對(duì)照;將小鼠脫頸椎處 死后取小鼠肝、脾,用濾紙吸干血后稱重,按下述計(jì)算公式計(jì)算單位時(shí)間的廓清指數(shù)和吞噬 指數(shù)(α):廓清指數(shù)=(IgOD1-lgOD5V(t5-tj,吞噬指數(shù)(a) =KX體重八肝重+脾 重),統(tǒng)計(jì)藥物組與對(duì)照組的K、a值,并進(jìn)行t值測(cè)驗(yàn)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 12.0軟件進(jìn) 行分析,結(jié)果如表2所示:
      [0074] 表2對(duì)小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響
      [0076] 注:與空白對(duì)照比較,有顯著性差異(P〈0. 05)
      [0077] 由表2可知,灌胃給本發(fā)明提取藥液0. 2ml/10g. d,21d后,小鼠的廓清指數(shù)和吞噬 指數(shù)(a)相對(duì)于對(duì)照組,差異性顯著(P〈0. 05),即本發(fā)明的提取藥液能顯著的提高單核一 巨噬細(xì)胞的吞噬能力,從而增強(qiáng)機(jī)體免疫力。
      [0078] 比較中藥復(fù)方組合物與方中的5味單味藥材提取物的免疫調(diào)節(jié)作用
      [0079] (1)提取物的制備
      [0080] 鹿角提取物的制備:取500g鹿角凈料投入提取罐中,加水提取3次,提取時(shí)間分別 為:3011、3011、2011,合并3次提取液,過(guò)濾,濾液濃縮至相對(duì)密度為1.1,即得鹿角提取物。
      [0081] 龜板提取物的制備:取500g龜板凈料投入提取罐中,加水提取3次,每次24h,合 并三次提取液,過(guò)濾,濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 1,即得龜板提取物。
      [0082] 黨參提取物的制備:取114g黨參凈藥材,加水煎煮3次,煎煮時(shí)間分別為2h、2h、 I. 5h,合并三次提取液,過(guò)濾,濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 1,即得黨參提取物。
      [0083] 枸杞提取物的制備:取226g枸杞子凈藥材,加水煎煮3次,煎煮時(shí)間分別為2h、 2h、l. 5h,合并三次提取液,過(guò)濾,濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 1,即得枸杞提取物。
      [0084] 石斛提取物的制備:取500g石斛加水煎煮兩次,每次90min,合并煎液,過(guò)濾,濾液 濃縮至相對(duì)密度為1. 1,即得石斛提取物。
      [0085] 中藥復(fù)方組合物的制備:按上述提取方法,合并5味藥的提取液,混勻,濃縮至相 對(duì)密度為1. 1,即得中藥復(fù)方組合物。
      [0086] (2)含藥血清的制備
      [0087] 小鼠隨機(jī)分為6組,每組10只,實(shí)驗(yàn)組分別灌服中藥復(fù)方組合物、龜甲提取物、 鹿角提取物、黨參提取物、枸杞提取物、石斛提取物,對(duì)照組灌服生理鹽水,每天灌1次 (0. 5ml/只/次),連續(xù)7天,小鼠于末次灌Ih后摘除眼球取血,無(wú)菌分離血清,同組血清混 合后經(jīng)56°C、30min滅活處理,再用0. 45um微孔濾膜過(guò)濾除菌,置-20°C保存?zhèn)溆谩?br>[0088] (3)試驗(yàn)分組
      [0089] 含藥血清組分為7組,即復(fù)方組合物血清組、龜甲提取物血清組、鹿角提取物血清
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