穿心蓮內(nèi)酯衍生物在制備治療炎癥性腸病藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種穿心蓮內(nèi)酯衍生物在制備治療炎癥性腸 病例如潰瘍性結(jié)腸炎的藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 穿心蓮內(nèi)酯（Andrographolide,Andro)是中藥穿心蓮中的主要有效成分，其結(jié)構(gòu) 如下所示。穿心蓮在亞洲國家，包括中國、印度、日本、韓國等廣泛用于治療炎癥性疾病，包 括風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、咽喉炎、腹瀉、細(xì)菌和病毒感染[Chin.Med.J. (Engl) 1991，104:770 - 775 ; J.Nat.Prod. 1993, 56:995 - 999 ；Clin.Exp.Pharmacol.Physiol. 1996,23:675 - 678 ； Clin.Exp.Pharmacol.Physiol. 2000, 27:358 - 363 ;Br.J.Pharmacol. 2002, 35:399 - 406]。 穿心蓮內(nèi)酯能夠減輕炎癥、發(fā)熱、細(xì)菌和病毒感染性疾病的臨床癥狀[J.Bacteri ol.2001， 183:7126-7134]。
[0003]
[0004] 穿心蓮內(nèi)酯
[0005]Chiou等[Br.J.Pharmcol. 2009, 129:1553-1560]研究認(rèn)為穿心蓮內(nèi)酯在 RAW264. 7細(xì)胞中通過降低誘導(dǎo)型NO合酶（iNOS)蛋白表達(dá)抑制NO合成，阻止從頭合成和通 過加速降解、降低iNOS蛋白穩(wěn)定性。Shen等[Br.J.Pharmacol. 2002, 135:399-406]闡明了 穿心蓮內(nèi)酯在嗜中性粒細(xì)胞抑制炎癥反應(yīng)的機(jī)理是通過調(diào)節(jié)PKC依賴的途徑阻止或部分 阻止活性氧（ROS)的產(chǎn)生，并下調(diào)Mac-I高表達(dá)。Xia[J.Immunol. 2004, 173:4207-4217]的 研究發(fā)現(xiàn)穿心蓮內(nèi)酯抑制NF-KB活性。Hidalgo等[Br.J.Pharmacol. 2005, 144:680-686] 關(guān)于穿心蓮內(nèi)酯抗炎機(jī)理研究發(fā)現(xiàn)穿心蓮內(nèi)酯通過抑制NF-KB與DNA的結(jié)合而發(fā)揮抗炎 作用，進(jìn)而降低前炎癥蛋白如C0X-2等的表達(dá)。
[0006] 前期本發(fā)明人通過化學(xué)合成制備穿心蓮內(nèi)酯和硫辛酸的偶合物，即穿心蓮內(nèi)酯衍 生物AL-I(如下所示）。
[0007]
[0008] 本發(fā)明人在深入研究AL-I的作用機(jī)理中證實(shí)，在體外應(yīng)用AL-I和Andro分別與 GSH反應(yīng)，顯示在反應(yīng)前60分鐘AL-I與GSH巰基結(jié)合速率是Andro的7倍，證明AL-I比 Andro更快和更強(qiáng)地與GSH的半胱氨酸巰基結(jié)合[Molecules. 2012, 17 (1):728-739]。然 后在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，通過抑制NF-KB的活性，AL-I具有保護(hù)MPP+誘導(dǎo)的SH-SY5Y 和小鼠原代神經(jīng)元細(xì)胞以及IL-I和IFN-y誘導(dǎo)的胰島RIN-m細(xì)胞的作用[Pharmacol BiochemBehav. 2014, 122:191-202JTranslMed. 2009, 7:62];動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)AL-I 通過抑制NF-KB的活性改善MPTP誘導(dǎo)的帕金森小鼠的各行為指標(biāo)[PharmacolBiochem Behav. 2014, 122:191-2022]，并且也顯著地改善2型糖尿病大鼠的胰島素抵抗并抑制高 糖誘導(dǎo)的RIN-m細(xì)胞p65和IKBa的磷酸化水平[BrJPharmacol. 2015,doi: 10. 1111/ bph. 13118];因此AL-I適用于作為抗癌藥物或治療具有耐藥性的腫瘤；作為抗微生物藥 物，包括細(xì)菌和病毒感染藥物；作為抗糖尿病藥物。本發(fā)明人的研究還發(fā)現(xiàn)AL-I在制備預(yù) 防和治療神經(jīng)退行性疾病尤其是帕金森病的藥物中的應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明在深入探討穿心蓮內(nèi)酯衍生物AL-I的作用基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)AL-I可以通過減 少結(jié)腸組織MPO的含量，減少炎癥細(xì)胞因子TNF-a、IL-6和IL-I 的表達(dá)，抑制C0X-2和 核轉(zhuǎn)錄因子NF-KB的表達(dá)，激活PPAR-y的表達(dá)，從而阻止炎癥相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，改 善炎癥狀態(tài)。因此本發(fā)明可使用AL-I治療潰瘍性結(jié)腸炎，研究證明它能顯著改善潰瘍性 結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸黏膜的損傷、減輕結(jié)腸炎癥狀的作用。這是前期研究未發(fā)現(xiàn)的AL-I在治療 疾病方面的新用途。
[0010] 潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerativecolitis,UC)是一種病因尚不明確的慢性非特異性腸 道炎癥性疾病，病變通常先累及直腸，逐漸向全結(jié)腸蔓延，表現(xiàn)為結(jié)腸黏膜和黏膜下層連續(xù) 性、彌漫性炎癥。其發(fā)病機(jī)制迄今仍未完全明了，目前一般認(rèn)為是多因素相互作用的結(jié)果， 主要包括環(huán)境、遺傳、感染和免疫因素等。2014年最新研究證實(shí)，根據(jù)世界各個(gè)地區(qū)不同， 每年UC的發(fā)病率約為0. 5-31. 5/10萬人。該病病因復(fù)雜，病程漫長(zhǎng)，治愈難度大，常反復(fù)發(fā) 作，并且有癌變的可能。因此，深入研究UC的發(fā)病機(jī)制和治療措施，對(duì)于防治UC具有重要 臨床意義和社會(huì)價(jià)值。
[0011] 目前，UC的發(fā)病機(jī)制尚不十分明確，認(rèn)為與氧化應(yīng)激、炎癥、細(xì)胞凋亡有關(guān)。因此， 具有抗氧化、抗炎及抗凋亡活性化合物有可能具炎性結(jié)腸保護(hù)作用，能延緩潰瘍性結(jié)腸炎 的病程。臨床上UC的常規(guī)治療藥物主要有三大類：氨基水楊酸類、腎上腺皮質(zhì)激素類和免 疫抑制劑；第一類藥物服藥周期較長(zhǎng)，患者依從性差，病情易反復(fù)；而糖皮質(zhì)激素及免疫抑 制劑不良反應(yīng)較多，易產(chǎn)生依賴或不耐受。因此本發(fā)明無疑提供了一種全新的用于治療潰 瘍性結(jié)腸炎的方法和新的藥物。
[0012] 本發(fā)明的目的在于提供一種穿心蓮內(nèi)酯衍生物的新用途，即穿心蓮內(nèi)酯衍生物 AL-I在預(yù)防和治療炎癥性腸病中的應(yīng)用，特別是預(yù)防和治療潰瘍性結(jié)腸炎中的應(yīng)用。
[0013] 本發(fā)明的目的還在于提供所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物AL-I在用于制備用于預(yù)防和治 療炎癥性腸病的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 本發(fā)明提供了AL-I治療潰瘍性結(jié)腸炎的機(jī)理在于清除自由基、抑制NF-kB信號(hào) 通路的激活和C0X-2的表達(dá)，激活PPAR-Y的表達(dá)，進(jìn)而阻止炎癥相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)， 改善炎癥狀態(tài)。
[0015] 所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物AL-I可與可用藥物載體制成各種劑型；所述劑型包括片 劑、顆粒劑、針劑、粉劑、膠囊劑、懸浮劑。
[0016] 所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物制備的預(yù)防和治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物可按各種制劑的 常規(guī)工藝制備。在藥物制備中使用的可藥用的賦形劑和添加劑包括無毒的可相容的填料、 粘合劑、崩解劑、緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑、潤(rùn)滑劑、矯味劑、增稠劑、著色劑、乳化劑或穩(wěn)定 劑。
[0017] AL-I可以制成多種劑型，包括固體劑型，半固體劑型，液體制劑和氣霧劑 (Remington?sPharmaceuticalSciences,MackPublishingCompany(1995)，Philadelph ia，PA, 19thed)。這幾類劑型中的具體劑型包括片劑、丸劑、糖錠劑、顆粒劑、凝膠劑、膏劑、 溶液劑、栓劑、注射劑、吸入劑以及噴霧劑。這些劑型既能用于局部或全身給藥又能用于速 釋或緩續(xù)給藥，此類藥物的給藥方式有很多種，除了上述方式，還有口腔給藥、面頰給藥、直 腸給藥、腹膜給藥、腹膜內(nèi)給藥、皮表給藥、皮下給藥和氣管內(nèi)給藥等。
[0018] 當(dāng)AL-I注射給藥時(shí)，可以用水溶性或脂溶性的溶劑將此類化合物配制成溶液劑， 懸濁劑和乳劑。脂溶性溶劑具體包括植物油及類似油類，合成脂肪酸甘油酯，高級(jí)脂肪酸酯 以及乙二醇酯（proyleneglycol)。這類化合物更易溶于Hank's溶液，Ringer's溶液或 者生理鹽水。
[0019] 當(dāng)AL-I口服給藥時(shí)，可以采用常用技術(shù)將其與藥學(xué)可接受的賦形劑制成復(fù)合物。 這些賦形劑可以將這些化合物制成多種可以被病人劑型，如片劑、丸劑、混懸劑、凝膠劑等。 口服制劑的配制有多種方法，如先把化合物和固體賦形劑混勻，充分研磨混合物，添加適當(dāng) 的輔料，加工處理成顆粒。可以用于制成口服劑型的輔料包括：糖類如乳糖、蔗糖、甘露醇或 山梨醇；纖維素類如玉米淀粉、小麥淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、西黃薯膠、甲基纖維素、羥甲基 纖維素（hydroxyproylmethyl-cellulose)、羧甲基纖維素納、聚乙稀吡略酮等。
[0020] 本發(fā)明涉及AL-I也可以制成噴霧劑，此種劑型是通過一個(gè)加壓器和一個(gè)噴霧器 或者一個(gè)干粉吸入裝置而實(shí)現(xiàn)的。可以用作噴射器里合適的噴射劑如二氯二氟甲烷、氟三 氯甲燒、二氯四氟乙燒、二氧化碳和二甲醚等。氣霧劑給藥的劑量可