一種抗腫瘤的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種抗腫瘤的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用，具體涉及葡磷酰胺組 合物及其制備方法和應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 胰腺癌是一種比較常見(jiàn)的惡性腫瘤，占全部惡性腫瘤的2%。胰腺有內(nèi)分泌和外 分泌兩種細(xì)胞，來(lái)自?xún)?nèi)分泌細(xì)胞的癌叫內(nèi)分泌癌，來(lái)自外分泌細(xì)胞的癌叫外分泌癌，二者惡 性程度差異很大。內(nèi)分泌癌臨床比較少見(jiàn)，這種胰腺癌惡性程度不高，患者術(shù)后存活時(shí)間較 長(zhǎng)。外分泌癌多數(shù)預(yù)后效果較差，臨床上90~95%的外分泌癌是導(dǎo)管細(xì)胞來(lái)源的胰腺癌， 這種"導(dǎo)管胰腺癌"惡性程度極高，早期診斷率低，療效欠佳，預(yù)后差等特點(diǎn)，患者確診后一 年死亡率高達(dá)95~98%。
[0003] 葡磷酰胺是異磷酰胺氮芥（IPM)連接于P-D-葡萄糖形成的化合物，屬于細(xì)胞毒 性烷化劑，具有重要的實(shí)驗(yàn)和臨床抗腫瘤活性。葡磷酰胺結(jié)構(gòu)為：
[0004]
[0005] 葡磷酰胺極易溶于水和醇（彡200mg/mL)，可溶于乙腈、丙酮，但不易溶于極性較 小的有機(jī)溶劑，如乙酸乙酰酯，乙酸乙酯，己烷及植物油。對(duì)熱很不穩(wěn)定，因此該化合物通常 要在2-8°C冷藏保存。葡磷酰胺在水溶液條件下更不穩(wěn)定，溶液放置24小時(shí)后效價(jià)損失超 過(guò)10%，降解生成無(wú)效的副產(chǎn)物。葡磷酰胺是一種新型細(xì)胞毒類(lèi)藥物，是由異磷酰胺氮芥與 0 -D-葡萄糖通過(guò)糖苷鍵相連而成。細(xì)胞對(duì)于葡磷酰胺的攝取是由一種鈉依賴(lài)性葡萄糖跨 膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和其他可能的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)。對(duì)于腫瘤患者，癌細(xì)胞代謝率升高，葡萄糖跨膜轉(zhuǎn) 運(yùn)蛋白（GLUT)高度表達(dá)，從而使葡磷酰胺具有良好選擇性。葡磷酰胺在鈉依賴(lài)性的葡萄糖 跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SAATl的作用下轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，然后在葡萄糖苷酶作用下，釋放異磷酰 胺氮芥而發(fā)揮抗胰腺癌的活性。
[0006] 葡磷酰胺體內(nèi)活性代謝物異磷酰胺氮芥（Palifosfamide)對(duì)腫瘤抑制作用是異 環(huán)磷酰胺{I&X? )的10-30倍。比環(huán)磷酰胺抗癌活性更強(qiáng)；與多柔比星聯(lián)合用藥比單用多 柔比星可使無(wú)進(jìn)展生存期（PFS)由4. 4個(gè)月增加至7. 8個(gè)月，緩解率提高1.5倍。葡磷酰 胺與環(huán)磷酰胺相比，前者吸收好，腫瘤組織濃度高，對(duì)胰腺癌細(xì)胞有更強(qiáng)的細(xì)胞毒活性。原 因在于癌細(xì)胞要生存，需要依賴(lài)葡萄糖，而由于癌細(xì)胞消化葡萄糖所產(chǎn)生的能量不到普通 細(xì)胞的15%，需要通過(guò)負(fù)載更多的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（GLUTl)完成葡萄糖從細(xì)胞外轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì) 胞內(nèi)的過(guò)程。正常細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞中葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白含量有很大懸殊，使得含有葡萄糖 基的葡磷酰胺比環(huán)磷酰胺在葡萄糖跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白高表達(dá)的癌細(xì)胞中具有更高的選擇性，任 何影響葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)的因素都將影響葡磷酰胺的效應(yīng)。通過(guò)正電子發(fā)射斷層掃描顯示大多胰 腺癌患者都有氟脫氧葡萄糖增加表達(dá)，這些發(fā)現(xiàn)也證實(shí)葡磷酰胺被胰腺癌細(xì)胞優(yōu)先攝取， 產(chǎn)生藥理學(xué)活性。不同的體外試驗(yàn)，包括荷瘤模型、毛細(xì)管瓊脂模型，葡磷酰胺對(duì)動(dòng)物和人 體腫瘤細(xì)胞（包括新移植的腫瘤細(xì)胞）顯示出明顯的細(xì)胞毒性。
[0007] 在體內(nèi)試驗(yàn)中，包括人體腫瘤細(xì)胞移植的裸鼠，葡磷酰胺對(duì)乳腺癌、小細(xì)胞癌、非 小細(xì)胞肺癌、黑色素瘤及其它腫瘤細(xì)胞在抗腫瘤活性方面顯劑量依賴(lài)性。鼠L1210\P-388 白血病及B16型黑素瘤模型能長(zhǎng)期生存和治療，葡磷酰胺提高了耐環(huán)磷酰胺P-388型白血 病動(dòng)物的生存期。
[0008] 與異環(huán)磷酰胺不同，葡磷酰胺在體外直接產(chǎn)生細(xì)胞毒性，這種細(xì)胞毒性能被跨膜 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體抑制劑（如果樹(shù)根皮精、根皮素）等調(diào)節(jié)，表明葡磷酰胺也是這種轉(zhuǎn)運(yùn)體的底 物。相應(yīng)的，葡磷酰胺在體內(nèi)的抗腫瘤活性取決于葡磷酰胺中P-D-葡磷酰胺異構(gòu)體的濃 度，葡磷酰胺衍生物P-L-葡磷酰胺（D-23380)和a-D-葡磷酰胺是沒(méi)有抗腫瘤活性的。正 常細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞中葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)的不同，導(dǎo)致葡磷酰胺在抗腫瘤方面的選擇性。
[0009] 葡磷酰胺是異環(huán)磷酰胺的類(lèi)似化合物，代謝產(chǎn)生異磷酰胺。與葡磷酰胺相比，異環(huán) 磷酰胺由初級(jí)代謝產(chǎn)物4-羥基異環(huán)磷酰胺代謝為環(huán)磷酰胺，而開(kāi)環(huán)互變異構(gòu)體4-羥基異 環(huán)磷酰胺自然消除會(huì)釋放出有毒代謝產(chǎn)物丙烯醛。由于葡磷酰胺不經(jīng)過(guò)4-羥基異環(huán)磷酰 胺代謝，因此不會(huì)產(chǎn)生丙烯醛。因此，葡磷酰胺的神經(jīng)毒性和致出血性也將更低。
[0010] 葡磷酰胺臨床最嚴(yán)重的不良反應(yīng)是腎毒性，對(duì)大鼠進(jìn)行單次和重復(fù)給藥后，葡磷 酰胺可誘導(dǎo)腎臟副作用。在1348或2697mg/kg的劑量下，分別單次靜脈輸注1小時(shí)或6小 時(shí)，經(jīng)處理大鼠的腎臟中鑒別出多個(gè)目標(biāo)：近曲小管（刷狀緣酶喪失、尿磷排泄增加、血管 變性）、集合管（核固縮、攝入嗜酸性粒細(xì)胞、多核細(xì)胞、肥大/增生）、尿道上皮（肥大/增 生）和內(nèi)髓部間隙（水腫）。腎毒性是阻礙葡磷酰胺臨床應(yīng)用的主要原因。主要表現(xiàn)為腎 小管酸中毒（類(lèi)似于范可尼綜合征），與血清肌酐增加和肌酐清除率（CrCl)下降有關(guān)，腎損 害嚴(yán)重者發(fā)展為腎衰竭、腎病綜合。
[0011] 顯然葡磷酰胺在治療腫瘤方面具有巨大的應(yīng)用前景，但鑒于其仍存在嚴(yán)重的腎臟 毒性，雖然美國(guó)、日本、德國(guó)、印度等國(guó)研發(fā)人員經(jīng)歷了多年的創(chuàng)造性工作，但目前國(guó)內(nèi)外尚 未有產(chǎn)品能夠通過(guò)相關(guān)國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門(mén)批準(zhǔn)上市，尚達(dá)不到用于臨床疾病治療的技 術(shù)要求。
[0012] 有鑒于此，特提出本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 本發(fā)明目的是提供一種抗腫瘤的藥物組合物，該組合物包括1)用于臨床胰腺癌 治療高度選擇性的葡萄糖偶聯(lián)藥物，具體為葡磷酰胺。2)具有抵抗腎毒性的腫瘤抑制藥劑， 具體為環(huán)磷酰胺。
[0014] 本發(fā)明為胰腺癌患者提供了一種高效低毒的抗腫瘤的藥物組合物，使葡磷酰胺作 為優(yōu)良的抗胰腺癌藥物能夠在臨床推廣應(yīng)用，為胰腺癌患者帶來(lái)福音。所述抗腫瘤的藥物 組合物具體為含有葡磷酰胺和環(huán)磷酰胺的藥物組合物。葡磷酰胺與環(huán)磷酰胺均為抗腫瘤 藥物，葡磷酰胺比環(huán)磷酰胺具有更強(qiáng)的抗胰腺癌活性。一方面，發(fā)明人通過(guò)實(shí)驗(yàn)驚喜的發(fā) 現(xiàn)，將葡磷酰胺與環(huán)磷酰胺合用，會(huì)產(chǎn)生更好的細(xì)胞毒效果，這是由于兩者合用產(chǎn)生協(xié)同效 果造成的。葡磷酰胺衍生物包括P-D-葡磷酰胺、P-L-葡磷酰胺及a-D-葡磷酰胺，其中 0 -L-葡磷酰胺及a-D-葡磷酰胺是沒(méi)有抗腫瘤活性的，體內(nèi)的抗腫瘤活性取決于葡磷酰 胺中-D-葡磷酰胺異構(gòu)體的濃度，-D-葡磷酰胺在大多數(shù)的生物樣品中較穩(wěn)定，但在小 腸、胰腺和尿樣等中不穩(wěn)定，降解半衰期分別為I.lh、14. 4h和15.lh。血藥濃度分析顯示， 單獨(dú)應(yīng)用葡磷酰胺后血液中P-L-葡磷酰胺或a-D-葡磷酰胺濃度明顯高于應(yīng)用本發(fā)明所 述腫瘤的藥物組合物。可能是環(huán)磷酰胺能夠抑制P-D-葡磷酰胺的構(gòu)型轉(zhuǎn)化。另一方面， 環(huán)磷酰胺（CTX)做為廣譜抗腫瘤藥物，同時(shí)也作為治療難治性腎病的首選藥物，對(duì)于胰腺 癌患者，胰腺功能本身分解糖原釋放能量的作用顯著減弱，如果腎功能損害嚴(yán)重，排泄系統(tǒng) 處于紊亂狀態(tài)，將會(huì)加速病人的病情。本發(fā)明所述藥物組合物中環(huán)磷酰胺與葡磷酰胺聯(lián)合 應(yīng)用協(xié)同抑制癌細(xì)胞同時(shí)，參考藥代與藥動(dòng)學(xué)確定給藥方案，小劑量的環(huán)磷酰胺還能夠預(yù) 防腎損害的發(fā)生，降低腎病綜合征的發(fā)生率，提高了腎病綜合征的臨床完全緩解率。研究顯 示，本發(fā)明所述藥物組合物中葡磷酰胺在相同劑量下腎毒性發(fā)生率明顯降低，從而有利于 臨床根據(jù)患者病情提高臨床劑量，增強(qiáng)抗癌效果，在降低毒性的作用下，呈現(xiàn)治療作用的協(xié) 同。
[0015] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0016] -種抗腫瘤的藥物組合物，其活性成分為葡磷酰胺和環(huán)磷酰胺。
[0017] 具體地說(shuō)，一種抗腫瘤的藥物組合物，按重量份計(jì)，含有葡磷酰胺10~100份，環(huán) 磷酰胺〇. 01~5份。
[0018] 所述抗腫瘤的藥物組合物，按重量份計(jì)，優(yōu)選含有葡磷酰胺20~90份，環(huán)磷酰胺 〇. 1~4份；更優(yōu)選含有葡磷酰胺30~80份，環(huán)磷酰胺1~3份；最優(yōu)選含有葡磷酰胺70 份，環(huán)磷酰胺2份。
[0019] 優(yōu)選地所述葡磷酰胺為0 -D-葡磷酰胺。
[0020] 所述抗腫瘤的藥物組合物為凍干粉針劑。
[0021] 所述抗腫瘤的藥物組合物中：所述重量份可以是yg、mg、g、kg等醫(yī)藥領(lǐng)域公知的 重量單位，也可以是其倍數(shù)，如1/10、1/100、10倍、100倍等。
[0022] 所述抗腫瘤的藥物組合物的凍干粉針劑處方為：以1000支計(jì)，葡磷酰胺 300-3000g;環(huán)磷酰胺 0? 3-150g;注射用水 1500-315000g。
[0023] 優(yōu)選地，所述抗腫瘤的藥物組合物的凍干粉針劑處方為：以1000支計(jì)，葡磷酰胺 1000 g;環(huán)磷酰胺28. 6g;注射用水9000g。
[0024] 本發(fā)明還提供上述抗腫瘤的藥物組合物的制備方法，包括以下步驟：