用于治療腫瘤的兩親性綴合物納米顆粒及制備方法、應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術領域，特別涉及一種用于治療腫瘤的兩親性綴合物納米顆粒及制備方法、應用。
【背景技術】
[0002]化療是一種治療腫瘤的重要方法。但是，許多化療藥物存在水溶性較差、生物利用度低、體內(nèi)分布不合理、體內(nèi)循環(huán)半衰期短以及毒副作用大等缺點。這些缺點極大的限制了化療藥物的臨床應用。近年來，隨著納米科技的發(fā)展，人們開發(fā)了各種各樣的載體用于化療藥物的輸送，如脂質體(Nat.Rev.Drug Discov.，2005, 4，145-160.)、膠束(Adv.Drug Deliv.Rev.，2001，47，113-131.)、蛋白(Small, 2009，5，1706-1721.)、金屬納米粒子(Adv.Drug Deliv.Rev., 2008, 60, 1307-1315.)以及無機納米粒子(Angew.Chem.1nt.Ed.，2007，46，7548-7558.)等。這些載體的使用，能使納米輸送體系通過增強滲透和滯留效應(EPR 效應)(Angew.Chem.1nt.Ed.，2014，53，12320-12364.；CancerRes.，1986，46，6387-6392.)被動聚集于腫瘤組織中，從而延長化療藥物的體內(nèi)循環(huán)時間，提高其生物利用度。此外，對載體表面修飾靶向性小分子或抗體等之后，可使納米給藥體系具有更強的靶向性(Adv.Drug Deliv.Rev.，2004，56，1649-1659.)。然而，載體的使用卻帶來了新的問題，如線粒體損傷、炎癥、氧化應激反應以及血小板聚集等(FASEBJ.，2005，19，311-330.)。并且，納米載體將藥物輸送到癌細胞內(nèi)后，其自身需要通過肝臟等器官排出體外，有可能引起肝臟等器官發(fā)生炎癥或引起一些其它病癥。這些納米輸送體系的構筑過程非常復雜，包括載體的合成與組裝、靶向分子的修飾和純化等，使得制得的產(chǎn)品批次之間質量往往不可控(Nano Lett.，2010，10，3223-3230.)，嚴重的限制了納米輸送體系的臨床應用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明目的在于提供一種用于治療腫瘤的兩親性綴合物納米顆粒，以解決現(xiàn)有技術中的抗腫瘤藥物采用納米尺寸的物質作為載體，這些納米尺寸的載體將藥物輸送到癌細胞內(nèi)后，其自身需要通過肝臟等器官排出體外，有可能引起肝臟等器官發(fā)生炎癥或引起一些其它病癥的技術性問題。
[0004]本發(fā)明的另一目的在于提供上述的兩親性綴合物納米顆粒的制備方法。
[0005]本發(fā)明的再一目的在于提供上述的兩親性綴合物納米顆粒的用途。
[0006]本發(fā)明目的通過以下技術方案實現(xiàn):
[0007]—種用于治療腫瘤的兩親性綴合物納米顆粒，包括由親水性的糖酰肼與含羰基的疏水性抗腫瘤藥物脫水縮合而成的兩親性綴合物。
[0008]優(yōu)選地，所述納米顆粒的粒徑小于300納米。
[0009]—種如上述的用于治療腫瘤的兩親性綴合物納米顆粒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟:
[0010]a.將親水性的糖酰肼與含羰基的疏水性抗腫瘤藥物進行脫水縮合反應，得到兩親性綴合物；
[0011]b.將所述兩親性綴合物溶解在有機溶劑中，在室溫下將其滴入水中，通過透析除去有機溶劑，得到兩親性綴合物的納米顆粒水溶液；或將所述兩親性綴合物溶解在有機溶劑中，通過旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑形成薄膜，加入水后進行超聲，得到兩親性綴合物的納米顆粒水溶液。
[0012]優(yōu)選地，所述超聲的功率為100-600W，所述超聲的時間為l-10min。
[0013]優(yōu)選地，所述步驟a進一步包括:
[0014]將含有親水性的糖酰肼的有機溶液滴加入含有羰基的疏水性抗腫瘤藥物的有機溶液中，于室溫下攪拌反應，得到兩親性綴合物。
[0015]優(yōu)選地，所述有機溶液含有二甲基亞砜或甲醇。
[0016]優(yōu)選地，所述親水性的糖酰肼選自葡萄糖酰肼、半乳糖酰肼、核糖酰肼、乳糖酰肼、麥芽糖酰肼、麥芽三糖酰肼、異麥芽三糖酰肼的其中一種。
[0017]優(yōu)選地，所述含羰基的疏水性抗腫瘤藥物選自阿霉素、柔紅霉素、阿柔比星、阿柔比星B、表阿霉素、伊達比星、吡柔比星、紫杉醇、多西他賽、福美坦、埃博霉素的其中一種。
[0018]優(yōu)選地，步驟b中的有機溶劑選自N，f - 二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、四氫呋喃、乙腈、甲醇中的一種。
[0019]上述的用于治療腫瘤的兩親性綴合物納米顆粒在制備治療腫瘤的藥物中的應用。
[0020]與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明有以下有益效果:
[0021]1、本發(fā)明的兩親性綴合物在水中可以自組裝形成納米顆粒，自身即可完成疏水性抗腫瘤藥物的輸送，避免了再引入其它載體帶來的毒副作用，通過腫瘤組織的EPR效應和/或半乳糖殘基的主動靶向作用(如糖不含半乳糖殘基，則僅通過腫瘤組織的EPR效應)，使得更多的兩親性綴合物納米顆粒能被輸送到腫瘤組織中。
[0022]2、本發(fā)明的兩親性綴合物納米顆粒由于具有細胞毒性的疏水性抗癌藥物分子隱藏在納米膠束的內(nèi)核中，納米膠束的外殼是生物相容的糖類分子，當納米粒子到達弱酸性的腫瘤組織后才釋放出抗癌藥物分子，可減少了抗腫瘤藥物帶來的毒副作用。
【附圖說明】
[0023]圖1為實施例1合成的乳糖-阿霉素綴合物的化學結構式；
[0024]圖2為實施例1合成的乳糖-阿霉素綴合物的IH NMR譜圖；
[0025]圖3為實施例1合成的乳糖-阿霉素綴合物的13C NMR譜圖；
[0026]圖4為實施例1制備的乳糖-阿霉素綴合物納米顆粒的流體力學直徑數(shù)據(jù)分布圖；
[0027]圖5為實施例1制備的乳糖-阿霉素綴合物納米顆粒的透射電鏡照片；
[0028]圖6為實施例2合成的葡萄糖-阿霉素綴合物的化學結構式；
[0029]圖7為實施例2合成的葡萄糖-阿霉素綴合物的IH NMR譜圖；
[0030]圖8為實施例2合成的葡萄糖-阿霉素綴合物的13C NMR譜圖；
[0031]圖9為實施例2制備的葡萄糖-阿霉素綴合物納米顆粒的流體力學直徑數(shù)據(jù)分布圖；
[0032]圖10為實施例2制備的葡萄糖-阿霉素綴合物納米顆粒的透射電鏡照片；
[0033]圖11為實施例3合成的乳糖-表阿霉素綴合物的化學結構式；
[0034]圖12為實施例4合成的乳糖-紫杉醇綴合物的化學結構式；
[0035]圖13為實施例5合成的葡萄糖-紫杉醇綴合物的化學結構式；
[0036]圖14為實施例6合成的乳糖-多西他賽綴合物的化學結構式；
[0037]圖15為實施例7合成的半乳糖-阿柔比星綴合物的化學結構式；
[0038]圖16為實施例8合成的麥芽糖-柔紅霉素綴合物的化學結構式；
[0039]圖17為實施例9合成的核糖-福美坦綴合物的化學結構式；
[0040]圖18為實施例10合成的麥芽三糖-埃博霉素綴合物的化學結構式；
[0041]圖19為實施例11合成的異麥芽三糖-伊達比星綴合物的化學結構式；
[0042]圖20為實施例12合成的異麥芽三糖-吡柔比星綴合物的化學結構式；
[0043]圖21為實施例1中制備的乳糖-阿霉素綴合物納米顆粒對腫瘤細胞生長抑制作用的不意圖。
【具體實施方式】
[0044]以下結合實施例及附圖對本發(fā)明作詳細說明。具體實施例均以本發(fā)明的技術方案為前提進行實施，包括詳細的實施方式和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護范圍不限于下述實施例。
[0045]實施例1
[0046]將鹽酸阿霉素(500.0毫克)溶解在10毫升二甲基亞砜中形成鹽酸阿霉素溶液，將乳糖酰肼(643.8毫克)溶解在10毫升二甲基亞砜中形成乳糖酰肼溶液然后逐滴加入上述的鹽酸阿霉素溶液中，在氮氣保護下室溫攪拌反應0.5小時。減壓蒸餾除去二甲基亞砜，混合物用乙腈和水為梯度洗脫，經(jīng)反相柱分離得到深紅色粉末狀產(chǎn)物乳糖-阿霉素綴合物(250.0毫克)，產(chǎn)率為32.4%。
[0047]本實施例合成的乳糖-阿霉素綴合物的化學結構式如圖1所示。本實施例制得的綴合物的IH NMR和13C NMR譜圖分別如圖2和圖3所示，測試溶劑為DMS0_d6ο 譜圖 2 中各質子峰的歸屬如下:δ (ppm):11.68 (s, 1H, NH)，8.02 (br, 2H, NH2)，7.90-7.76 (m, 2H, CH)，7.64-7.53 (d, J = 7.59Hz, 1H, CH)，6.15-5.96 (br, OH)，5.65-4.42 (br, OH)，5.35-5.26 (m, 1H, CH)，5.08-5.01 (m, 1H, CH)，4.48 (s, 2H, CH2)，4.28 (m, IH，CH)，4.2