含有硫化和非硫化聚陰離子多糖的藻類提取物及其應(yīng)用
【專利說明】含有硫化和非硫化聚陰離子多糖的藻類提取物及其應(yīng)用
[0001] 本發(fā)明涉及一種含有硫化和非硫化聚陰離子多糖的藻類提取物、一種制備藻類提 取物的方法及其治療性和預(yù)防性應(yīng)用。
[0002] 石莼種（石莼目，綠藻門）是在潮間帶或前灘區(qū)域發(fā)現(xiàn)的豐富藻類。它們移居在 堅硬的基質(zhì)上，利用附著盤固定，但有些種類也形成自由移動的生存形式。石莼藻類是生長 迅速的藻類，且對于空間和營養(yǎng)的吸收伺機(jī)而動。在富含營養(yǎng)的沿海水域以及瀉湖中可以 特別觀察到其在水柱中的生長，其中石莼種以"綠潮"（Fletcher，1996)的形式增殖。通常 大量的生長和大串（植物），因此，在其堆積時會產(chǎn)生有害氣體（Morand和Briand，1996)。 直至現(xiàn)在，這樣的生物量鮮有附加價值，除了用作肥料（Maz6等，1993,Cuomo等，1995)、 生產(chǎn)甲烷（Briand和Morand，1997)、作為人類食品消費（P6rez，1997)或作為造紙的基料 (Nicolucci和Monegato, 1993)以外的利用途徑或許可以提供將其特殊性質(zhì)利用至最佳的 可能性。
[0003]目前，綠藻的利用基本基于為開發(fā)將綠藻作為非需要品去除的新路徑而提供可能 性的應(yīng)用。預(yù)期的應(yīng)用路徑涉及到生物氣（Briand和Morand1997，Morand和Briand1999， Morand等，2006)、生物材料（生物塑料）（Chiellini等，2008)、生物可降解杯子（Sassi 等，2008)、紙張和用于打包的硬紙板（Nicolucci&Monegata等，1993)、充電納米復(fù)合物 (Demais等，2006a，2006b)的生產(chǎn)，動物營養(yǎng)學(xué)：動物的無毒飼料（Demais等，2006)、養(yǎng)魚業(yè) 的偏好因素（DeBose等，2008，KutGuroy等，2007)以及化妝品（表面活性劑）（Ranson等， 2008)〇
[0004] 這些藻類中含有的聚多糖的化學(xué)及理化性質(zhì)使得它們在人類和動物消費領(lǐng) 域的制藥、化學(xué)、養(yǎng)魚業(yè)和農(nóng)業(yè)中作為新功能性和生物學(xué)活性聚合物的引人注目的候 選者（RobicA,等，CarbohydratePolymers77(2009)206-216;LahayeMRobicA， BiomacromoleculesVol8No. 6,2007)。
[0005] 根據(jù)這些方面之一，本發(fā)明涉及一種從石莼目的藻類中的提取物，尤其是從石莼 種類的綠藻中的提取物，含有硫化和非硫化的聚陰離子聚多糖，其大小小于等于50KDa。
[0006] 具體地，本發(fā)明所述藻類提取物聚多糖含有甘露糖和/或阿拉伯糖。更具體地，所 述聚多糖含有至少〇. 005%的甘露糖和/或至少0. 005%的阿拉伯糖（以基于藻類提取物 干物質(zhì)總重量的重量計），特別地，至少0. 01 %的甘露糖和/或至少0. 01 %的阿拉伯糖。更 進(jìn)一步具體地，所述多聚體含有的甘露糖的量在〇. 01-0. 20%的范圍內(nèi)，和阿拉伯糖的量在 0. 01-0. 5%的范圍內(nèi)（以基于藻類提取物干物質(zhì)總重量的重量計），特別地，甘露糖的量在 0.03-0. 15%的范圍內(nèi)，和阿拉伯糖的量在0.01-0. 2%的范圍內(nèi)。
[0007] 具體地，所述聚多糖還含有：
[0008]-半乳糖；
[0009]-葡萄糖；
[0010] -鼠李糖；
[0011 ] _木糖；和
[0012] _葡萄糖醛酸。
[0013] 更具體地，所述聚多糖含有：
[0014] -0? 05-0. 5%的半乳糖，特別為 0? 1-0. 4% ;
[0015] -0.005-0. 05 % 的葡萄糖，特別為 0.01-0. 03 % ;
[0016] -2-15%的鼠李糖，特別為5-10% ;
[0017] -0.1-1%的木糖，特別為0.3-0.7%;和
[0018] -1-7%的葡萄糖醛酸，特別為1-5% ;
[0019] 以基于藻類提取物干物質(zhì)的總重量的重量計。
[0020] 因此，本發(fā)明藻類提取物的一個例子可含有：
[0021] -甘露糖；
[0022]-阿拉伯糖；
[0023] -半乳糖；
[0024] -葡萄糖；
[0025] -鼠李糖；
[0026] _木糖；和
[0027] _葡萄糖醛酸。
[0028] 對于本發(fā)明藻類提取物的一個更具體的例子可作如下描述，含有：
[0029] -0? 01-0. 20% 的甘露糖，特別為 0? 03-0. 15% ;
[0030] -0? 01-0. 5%的阿拉伯糖，特別為 0? 01-0. 2% ;
[0031] -0? 05-0. 5%的半乳糖，特別為 0? 1-0. 4% ;
[0032] -0? 005-0. 05 % 的葡萄糖，特別為 0? 01-0. 03% ;
[0033] -2-15%的鼠李糖，特別為5-10% ;
[0034] -0.1-1%的木糖，特別為0.3-0.7%;和
[0035] -1-7%葡萄糖醛酸，特別為1-5% ;
[0036] 以基于藻類提取物干物質(zhì)的總重量的重量計。
[0037] 本發(fā)明藻類提取物的另一個更具體的例子可含有：
[0038]-0.09% 的甘露糖；
[0039] -0.1 %的阿拉伯糖；
[0040] -0.3 %的半乳糖；
[0041]-0.02% 的葡萄糖；
[0042] -8.1 %的鼠李糖；
[0043] -0.5 %的木糖；和
[0044] -2. 6 %的葡萄糖醛酸；
[0045] 以基于藻類提取物干物質(zhì)的總重量的重量計。
[0046] 更具體地，本發(fā)明藻類提取物含有硫化和非硫化的聚陰離子聚多糖，其大小小于 40、30、20或15KDa。更具體地，本發(fā)明藻類提取物的硫化和非硫化聚陰離子聚多糖的大小 小于等于15KDa。
[0047] -道爾頓（Da)是一重量單位，其定義為等于碳12原子質(zhì)量的十二分之一，該質(zhì)量 大致通過數(shù)種同位素的混合物（主要為碳12和碳13,除了與任何碳原子一樣的6個質(zhì)子以 外，還各自具有6個和7個中子）估算。一道爾頓非常精準(zhǔn)地等于一個氫原子的質(zhì)量，其精 確值為1.〇〇794amu(原子質(zhì)量單位）。千道爾頓（KDa)等于lOOODa.
[0048]在本發(fā)明范圍內(nèi)，以kDa提及的質(zhì)量通過本領(lǐng)域技術(shù)人員通常采用的任何方法測 得，尤其是本發(fā)明藻類提取物中硫化和非硫化的聚陰離子多糖的質(zhì)量可通過只允許預(yù)定大 小分子通過的膜超濾來辨別。
[0049] "石莼種類的綠藻"指的是來自于石莼目下石莼科家族石莼種組下的綠藻。尤其是 以下種類和亞種：魚棲臺石藥（Ulvaacanthophora)、阿南德氏石藥（Ulvaanandii)、窄葉 石藥（Ulvaangusta)、阿氏石藥（Ulvaarasakii)、阿莫里加石藥（Ulvaarmoricana)、綠 石藥（Ulvaatroviridis)，薄葉石藥（Ulvaattenuata)，貝特石藥（Ulvabeytensis)，雙 面石藥（Ulvabifrons)，短柄石藥（Ulvabrevistipitata)，球石藥（Ulvabulbosa)，緬甸 石藥（Ulvaburmanica)，柔石藥（Ulvabyssoides)，加州石藥（Ulvacalifornica)，蝶形 石藥（Ulvachaetomorphoides)，格石藥（Ulvaclathrata)，渥紅石藥（Ulvacoccinea)， 扁石藥（Ulvacompressa)，族石藥（Ulvaconglobata)，羊角石藥（Ulvacornucopiae)，角 石藥（Ulvacornuta)，科夫龍石藥（Ulvacovelongensis)，厚石藥（Ulvacrassa)，厚膜石 藥（Ulvacrassimembrana)，拱石藥（Ulvacurvata)，常石藥（Ulvadactylifera)，據(jù)齒石 藥（Ulvadenticulata)，秀剛石藥（Ulvaelegans)，艾米氏石藥（Ulvaelminthoides)， 腸形石藥（Ulvaenteromorpha)，直石藥（Ulvaerecta)，寬石藥（Ulvaexpansa)，帶石 藥（Ulvafasciata)，窗石藥（Ulvafenestrata)，曲石藥（Ulvaflexuosa)，膠石藥（Ulva gelatinosa)，雙生石藥（Ulvageminoidea)，巨石藥（Ulvagigantea)，大石藥（Ulva grandis)，亨德石藥（Ulvahendayensis)，勾石藥（Ulvahookeriana)，霍克石藥（Ulva hopkirkii)，印氏石藥（Ulvaindica)，細(xì)長石藥（Ulvaintestinalis)，類細(xì)長石藥（Ulva intestinaloides)，絞石藥（Ulvaintricata)，管狀石藥（Ulvaintybacea)，加 唾石藥 (Ulvajavanica)，科林石藥（Ulvakylinii)，萬石藥（Ulvalactuca)，萬葉石藥（Ulva lactucaefolia)，亮綠石藥（Ulvalaetevirens)，朗吉石藥（Ulvalaingii)，線石藥（Ulva linearis)，舌石藥（Ulva lingulata)，鏈?zhǔn)帲║lva linkiana)，林氏石藥（Ulva linza)， 里皮石藥（Ulva lippii)，濱海石藥（Ulva litoralis)，海岸石藥（Ulva littorea)，裂 石藥（Ulva lobata)，滑石藥（Ulva lubrica)，鑲邊石藥（Ulva marginata)，微球石藥 (Ulva micrococca)，米亞塔石藥（Ulva myriotrema)，那不勒斯1石藥（Ulva neapolitana)， 線蟲石藥（Ulva nematoidea)，歐尼石藥（Ulva ohnoi)，橄石藥（Ulva olivacea)，橄欖 石藥（Ulva olivaceum)，太平洋石藥（Ulva pacifica)，匙形石藥（Ulva papenfussii)， 奇形石藥（Ulva paradoxa)，小石藥（Ulva parva)，微小石藥（Ulva parvula)，潘騰石 藥（Ulva patengensis)，狹帶石藥（Ulva percursa)，孑L石藥（Ulva pertusa)，菲氏石藥 (Ulva phyllosa)，拍石藥（Ulva popenguinensis)，韭葉石藥（Ulva porrifolia)，闊石 藥（Ulva procera)，深石藥（Ulva profunda)，游石藥（Ulva prolifera)，假曲石藥（Ulva pseudocurvata)，假林氏石藥（Ulva pseudolinza)，剛石藥（Ulva pulchra)，紫絲石藥 (Ulva purpurascens)，奎隆石藥（Ulva quilone