一種具有良好物理及抑菌性能的茶多酚根管封閉劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于口腔材料技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種根管封閉劑，尤其涉及一種具有良好物 理及抑菌性能茶多酚根管封閉劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 根管治療是牙髓及根尖周疾病最有效的治療方法，目前根管治療的成功率為 53%_95%，如何繼續(xù)提高根管治療的成功率仍是國內(nèi)外學(xué)者的研究熱點(diǎn)。根管治療失敗的 原因是多方面的，例如根管系統(tǒng)的復(fù)雜、治療過程中操作不當(dāng)?shù)?，研究表明最主要原因是?生物因素，頑固不易清除的細(xì)菌導(dǎo)致了根管治療的失敗。根管治療失敗的主要原因是微生 物因素，抑制白色念珠菌和糞腸球菌的生長對于降低根管治療的失敗率有重要意義。盡管 根管封閉劑中加抗生素有較好的抑菌效果，但近年來抗生素的濫用引起了細(xì)菌耐藥等許多 生物安全問題，所以尋找一種抑菌性能良好的天然藥物作為根管封閉劑的添加物是很重要 的。
[0003] 氧化鋅丁香油根管封閉劑是一種具有抑菌性能的根管封閉劑，但是其在臨床以及 體外研究中表現(xiàn)出了一定的細(xì)胞毒性(其毒性主要來源于其固化后所釋放出來的丁香油 酚)，因此給其臨床應(yīng)用帶來限制。
[0004] 茶多酸（TeaPolyphenols,TP)是茶葉中多酸類化學(xué)物質(zhì)的總稱，是茶葉中有保 健功能的主要成份之一，具有去除口臭、促進(jìn)口腔潰瘍愈合、抗口腔輻射傷害等作用，同時(shí) 茶多酚能夠抑制口腔多種致病菌的生長。有研究表明茶多酚對于根管內(nèi)的白色念珠菌、糞 腸球菌等生物膜的形成有抑制作用。但是將茶多酚加入根管封閉劑中，研制出一種新型的 茶多酸根管封閉劑尚未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種具有良好物理及抑菌性能茶多酚根管封閉劑的制備方 法。
[0006] -、茶多酚根管封閉劑的制備 本發(fā)明的茶多酚根管封閉劑，是在氧化鋅丁香油封閉劑中加入茶多酚混合均勻而得。 其中茶多酚與氧化鋅的質(zhì)量百分比為〇. 25-1%、99. 75-99% ;茶多酚封閉劑中茶多酚的濃度 為 2. 5-10g/L。
[0007] 二、茶多酚根管封閉劑的性能測試 1.抑菌性能的測定 采用瓊脂擴(kuò)散法，指示菌為白色念珠菌（Canit/iaa辦icans,Ca辦icans)ATCC10231、奠腸球菌（i^terococci/61 /'aecaJis,A/"aecaJidATCC29212、金黃色葡萄球菌 {Staphylococcusaureus,S.aureus)klCC25923 {Escherichiacoli,E.coll) ATCC25922標(biāo)準(zhǔn)菌株（西北民族大學(xué)國家民委口腔微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供）。在lOOmLBHI培養(yǎng)基滅菌后冷卻至45°C時(shí)混入菌液10yL(CFUlxl06/ml)，倒入培養(yǎng)皿中待凝固后用 打孔器均勻打孔。按照順時(shí)針方向依次在打下的孔中加入不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的茶多酚根管封 閉劑，直至與培養(yǎng)基表面平齊，以氧化鋅根管封閉劑做陰性對照；平板置于37 °C孵箱培養(yǎng) 24h。按照十字交叉法用電子尺測量抑菌圈直徑。
[0008] 不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)根管封閉劑的抑菌作用如圖1所示，其中Blank為陰性對照組(氧 化鋅丁香油根管封閉劑）；A、B、C、D分別代表茶多酚的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 25%、0. 5%、1%和2%。 統(tǒng)計(jì)分析后各組封閉劑抑菌圈大小和組間差異如圖2所示（*表示/<0. 05)。抑菌圈直徑： Blank〈A〈B〈C〈D;其中Ca辦icaas和方./"aecaJisBlank與A以及 51ayrei/61Blank與A，A 與B組間相比無顯著差異（P>0. 05)，其它組間兩兩比較均有顯著性差異（P〈0. 05)。
[0009] 上述抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，0. 25%的茶多酚封閉劑抑制白色念珠菌和糞腸球菌的能 力與對照組無顯著差異，當(dāng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)增加到0. 5% (5g/L)時(shí)才有顯著性差異，表明茶多 酚的抑菌能力與濃度呈正相關(guān)；1%、1. 5%的茶多酚封閉劑對金黃色葡萄球菌的抑制作用非 常強(qiáng)，與空白組、0. 25%、0. 5%有顯著差異；此外，0. 25%的封閉劑即對大腸桿菌表現(xiàn)出較強(qiáng) 的抑制作用。因此，本發(fā)明制備的茶多酚根管封閉劑對指示菌具有良好的抑制作用，而且 0. 5%、1%和1. 5%的封閉劑對指示菌的抑制作用明顯優(yōu)于空白組和0. 25%。
[0010] 2.流動(dòng)性的測定 采用ISO6878:2001的方法，輸送0.05mL(±0.005mL)封閉劑置于玻璃板中心， 180s(±5s)后將第二塊玻璃板和100g(±2g)的重物塊壓在上面。lOmin后取下重物塊并 且測量所壓封閉劑試片直徑。每個(gè)封閉劑試片測量3次，精確到0. 001mm。
[0011] 各組封閉劑流動(dòng)性大小和組間差異如圖3所示，流動(dòng)性大?。築lank>A>B>C>D; Blank與A，A與B組間相比無顯著性差異（P>0. 05)，其他組間兩兩比較均有顯著性差異 (P〈0. 05) 〇
[0012] 臨床上根管充填要求封閉劑容易進(jìn)入細(xì)小不規(guī)則的側(cè)副管，實(shí)現(xiàn)充分嚴(yán)密的充 填，因此封閉劑應(yīng)該具有良好的流動(dòng)性。本研究結(jié)果顯示，加入茶多酚后封閉劑的流動(dòng)性隨 茶多酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增大而減小，這可能是因?yàn)椴瓒喾拥拇嬖谠龃罅瞬牧系恼吵矶?，在相?的載荷下含茶多酚較少的封閉劑容易形成直徑較大的平面，具有更好的流動(dòng)性，可阻止微 生物及代謝產(chǎn)物進(jìn)入根管，防止細(xì)菌的再次感染導(dǎo)致根管治療的失敗。
[0013] 3?薄膜厚度的測定 采用ISO6878:2001的方法，測量相接觸的兩玻璃平板的厚度。輸送 0.05mL(±0.005mL)封閉劑，將其置于一片玻璃板的中心，再于中央放上第二塊玻璃板。從 調(diào)和開始180s(± 10s)時(shí)用加荷裝置對玻璃平板頂部垂直施加150N的載荷，確保封閉劑完 全充滿兩玻璃板之間。lOmin后測量兩玻璃板連同封閉劑薄膜的厚度，分別測量3次，取其 平均值作為玻璃板及封閉劑薄膜的總厚度，通過計(jì)算帶封閉劑和不帶封閉劑的玻璃板厚度 的差值，得出薄膜厚度。每個(gè)封閉劑試片測量3次，精確到1ym。
[0014] 各組封閉劑薄膜厚度大小和組間差異如圖4所示，薄膜厚度大小： Blank〈A〈B〈C〈D;所有組間兩兩比較均有顯著性差異（P〈0. 05)。
[0015] 減少根管治療中微滲漏的發(fā)生是提高根管治療成功率的一個(gè)重要途徑，封閉劑薄 膜厚度過大會(huì)使牙膠與根管壁之間的間隙增加，降低根管封閉劑的粘結(jié)性，增加微滲漏的 機(jī)會(huì)。本研究結(jié)果顯示，封閉劑薄膜厚度隨茶多酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加而增厚，可能與茶多酚是 一種混合物質(zhì)有關(guān)，其成分大小不一，與氧化鋅混合后微粒間距增加，薄膜厚度相應(yīng)增大。 根據(jù)ISO6878:2001的標(biāo)準(zhǔn)，膜厚度應(yīng)不大于50ym。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，茶多酚封閉劑的薄膜 厚度滿足國家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。
[0016] 4.收縮性的測定 采用ISO6878:2001的方法，調(diào)和2g材料稍超充于模具中，固定5min后，放入相對濕 度為95%-100%，溫度為37°C(±1°C)的環(huán)境中。1天后取出模具，在P600的濕砂紙上磨平 試樣兩端。去除模具后測量其高度，精確到10ym。后將其貯存在37°C(±1°C)的蒸餾水 中30d，再次測量試樣高度，精確到10ym。計(jì)算試樣高度的變化與原高度的百分比，完成3 次上述測量，其平均值作為材料的收縮性。
[0017] 各組封閉劑收縮性大小和組間差異如圖5所示，收縮性大小：Blank〈A〈B〈C〈D; Blank與A組間相比無顯著性差異（P>0. 05)，其他組間兩兩比較均有顯著性差異（P〈0. 05)。
[0018] 封閉劑的收縮性過大也會(huì)造成微滲漏，增加根管再感染的機(jī)會(huì)。本研究結(jié)果顯示， 封閉劑的收縮性隨茶多酚的質(zhì)量分?jǐn)?shù)增加而增大，而且2%的茶多酚封閉劑收縮最為明顯， 原因在于氧化鋅和茶多酚微粒之間的作用力不如氧化鋅本身強(qiáng)，導(dǎo)致材料固化后在去離子 水中稍有溶解，產(chǎn)生收縮。根據(jù)ISO6878:2001的標(biāo)準(zhǔn)封閉劑收縮性應(yīng)不大于1.0%。
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