伏立諾他用于制備免疫調(diào)節(jié)藥物的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，進(jìn)一步涉及物質(zhì)的新的醫(yī)藥用途，具體涉及伏立諾他 用于制備免疫調(diào)節(jié)藥物的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 免疫調(diào)節(jié)藥物泛指能夠?qū)γ庖呦到y(tǒng)微觀運(yùn)行狀態(tài)起到調(diào)節(jié)作用的一系列藥物。由 于以免疫系統(tǒng)微觀運(yùn)行狀態(tài)失衡為效應(yīng)的疾病類別很多，因此，通過藥物干預(yù)實(shí)現(xiàn)對(duì)免疫 系統(tǒng)的調(diào)節(jié)可能作為不同疾病的治療途徑。
[0003] 葡萄膜（Uvea)是眼球壁的中層，包擴(kuò)虹膜、睫狀體和脈絡(luò)膜三個(gè)富于血管和色素 的結(jié)構(gòu)。自身免疫性葡萄膜炎（Autoimmuneuveitis)是一組復(fù)雜的威脅視力的疾病，是全 球范圍內(nèi)導(dǎo)致視力喪失的主要原因之一。自身免疫性葡萄膜炎可以分為HLA-B27等位基 因相關(guān)性與非相關(guān)性兩類。前者男性居多，單眼發(fā)病，反復(fù)發(fā)作，病理所見為非肉芽腫性炎 癥。后者男女發(fā)病率相當(dāng)，呈現(xiàn)累及雙眼的慢性肉芽腫性炎癥，且常常伴隨血清陰性脊柱關(guān) 節(jié)?。⊿eronegativespondyloarthritis)、白塞氏?。˙ehcet'sdisease)、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎 (Reactivearthritis,RA)以及其他一些自身免疫相關(guān)疾病。
[0004] 現(xiàn)有技術(shù)中有研究表明，自身免疫性葡萄膜炎的主要效應(yīng)T細(xì)胞為CD4+Thl和 Thl7細(xì)胞，兩種T細(xì)胞亞群相互獨(dú)立，前者主要分泌干擾素y(Interferon-y，IFN-y)而 致病，并以此抑制Thl7細(xì)胞亞群的分化，而后者則通過IL-17誘導(dǎo)小鼠EAU的產(chǎn)生并阻礙 Thl細(xì)胞亞群的分化。由Thl或者Thl7介導(dǎo)的EAU的臨床表現(xiàn)不盡相同，在IRBP誘導(dǎo)的 小鼠EAU模型中，Thl7細(xì)胞占據(jù)了更為主導(dǎo)的地位。上述這些自身活化的T細(xì)胞將克隆增 殖，迀移至視網(wǎng)膜，破壞血-視網(wǎng)膜屏障（Blood-retinalbarrier,BRB)，并募集循環(huán)血液 中的單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及嗜酸性粒細(xì)胞等到達(dá)免疫炎癥反應(yīng)部位，這些炎性細(xì)胞通過 分泌腫瘤壞死因子（Tumornecrosisfactor-a，TNF-a)、一氧化氮合酶 2(Nitricoxide synthase-2,N0S-2)等炎性因子進(jìn)一步擴(kuò)大炎癥反應(yīng)，加強(qiáng)對(duì)光感受器層細(xì)胞的破壞。
[0005] 現(xiàn)有技術(shù)中，對(duì)于自身免疫性葡萄膜炎的主要藥物治療方法是運(yùn)用糖皮質(zhì)激素或 免疫抑制劑。但是局部或全身長(zhǎng)期應(yīng)用這類藥物會(huì)導(dǎo)致許多眼部或者全身并發(fā)癥。此外， 由于人類葡萄膜炎本身的異質(zhì)性，單一的阻斷某一種細(xì)胞因子并不適用于所有的病例。因 此，應(yīng)當(dāng)開發(fā)一種更有效、副作用更小的藥物，防止不可逆的視力損傷并促進(jìn)視力的恢復(fù)。
[0006] 伏立諾他屬于異羥肟酸類HDAC抑制劑，它主要抑制I類和II類HDAC，參與調(diào)節(jié) 前炎癥反應(yīng)和細(xì)胞增殖與分化，以及IV類HDAC。現(xiàn)有技術(shù)中，伏立諾他主要用于非小細(xì) 胞肺癌（Non-smallcelllungcancer)、多發(fā)性骨髓瘤（Multiplemyeloma，MM)、白血 病（Leukemia)、淋巴瘤（Lymphoma)以及大腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的抗腫瘤治療。它也是 首個(gè)被美國(guó)食品和藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)用于治療皮膚T細(xì)胞淋巴瘤（CutaneousTcell lymphoma)的HDAC抑制劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明旨在針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的技術(shù)缺陷，提供了伏立諾他用于制備免疫調(diào)節(jié)藥物的 應(yīng)用，從而為實(shí)現(xiàn)免疫系統(tǒng)運(yùn)行狀態(tài)的調(diào)節(jié)提供了一種新途徑。
[0008] 本發(fā)明解決的另一技術(shù)問題是確定了伏立諾他新的藥理性質(zhì)。
[0009] 本發(fā)明解決的再一技術(shù)問題是確定了伏立諾他新的醫(yī)藥用途
[0010] 本發(fā)明解決的又一技術(shù)問題是實(shí)現(xiàn)了對(duì)自身免疫性葡萄膜炎的治療。
[0011] 為實(shí)現(xiàn)以上技術(shù)目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
[0012] 伏立諾他用于制備免疫調(diào)節(jié)藥物的應(yīng)用。
[0013] 優(yōu)選的，所述免疫調(diào)節(jié)藥物是抑制STAT-1信號(hào)通路的藥物；在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu) 選的，是通過抑制STAT-1信號(hào)通路而抑制初始T細(xì)胞向Thl淋巴細(xì)胞分化的藥物；更優(yōu)的， 是通過抑制初始T細(xì)胞向Thl淋巴細(xì)胞分化而降低Thl細(xì)胞數(shù)量的藥物；最優(yōu)的，是通過降 低Thl細(xì)胞數(shù)量而降低IFN-y表達(dá)量的藥物。
[0014] 優(yōu)選的，所述免疫調(diào)節(jié)藥物是抑制STAT-3信號(hào)通路的藥物；在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu) 選的，是通過抑制STAT-3信號(hào)通路而抑制初始T細(xì)胞向Thl7淋巴細(xì)胞分化的藥物；更優(yōu) 的，是通過抑制初始T細(xì)胞向Thl7淋巴細(xì)胞分化而降低Thl7細(xì)胞數(shù)量的藥物；最優(yōu)的，是 通過降低Thl7細(xì)胞數(shù)量而降低IL-17表達(dá)量的藥物。
[0015] 優(yōu)選的，所述免疫調(diào)節(jié)藥物是上調(diào)⑶4+⑶25+Foxp3+的nTreg細(xì)胞數(shù)量的藥物；在 此基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)選的，是通過上調(diào)⑶4+⑶25+Foxp3+的nTreg細(xì)胞數(shù)量從而恢復(fù)T淋巴細(xì) 胞各亞群比例平衡。
[0016] 優(yōu)選的，所述免疫調(diào)節(jié)藥物是提升⑶4+⑶3+⑶62L+的T細(xì)胞數(shù)量的藥物。
[0017] 優(yōu)選的，所述免疫調(diào)節(jié)藥物是抑制NF-kBP65表達(dá)的藥物；在此基礎(chǔ)上優(yōu)選的， 是通過抑制NF-kBP65的表達(dá)，從而抑制其對(duì)TNF-a轉(zhuǎn)錄的促進(jìn)作用，進(jìn)而抑制TNF-a 表達(dá)量的藥物；更優(yōu)的，是通過抑制TNF-a表達(dá)量從而緩解巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的藥物。
[0018] 優(yōu)選的，所述免疫調(diào)節(jié)藥物是上調(diào)緊密連接蛋白claudin-5表達(dá)量的藥物；在此 基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)選的，是通過上調(diào)緊密連接蛋白claudin-5表達(dá)量從而修復(fù)血視網(wǎng)膜屏障 損傷的藥物。
[0019] 在以上任一項(xiàng)技術(shù)方案基礎(chǔ)上優(yōu)選的，所述免疫調(diào)節(jié)藥物是自身免疫疾病治療藥 物；更優(yōu)的，所述自身免疫疾病是自身免疫性葡萄膜炎。
[0020] 本發(fā)明所述的免疫調(diào)節(jié)藥物是指對(duì)免疫系統(tǒng)微觀運(yùn)行狀態(tài)具有調(diào)節(jié)作用的藥物， 進(jìn)一步可以是具有上述藥理作用的藥物。因此所述藥物的適應(yīng)癥可以通過某病癥的病理效 應(yīng)是否落入到上述藥理作用范圍來(lái)進(jìn)行界定。也就是說(shuō)，當(dāng)某一疾病的發(fā)病過程中其免疫 系統(tǒng)的某一病理現(xiàn)象屬于上述藥物可調(diào)節(jié)的內(nèi)容，那么應(yīng)當(dāng)認(rèn)為上述藥物適用于該疾病的 治療。
[0021] 本發(fā)明通過大量實(shí)驗(yàn)確定了伏立諾他的新性質(zhì)，這些新性質(zhì)包括：伏立諾他可 抑制STAT-1信號(hào)通絡(luò)，從而抑制初始T細(xì)胞向Thl淋巴細(xì)胞分化，進(jìn)而降低Thl細(xì)胞數(shù) 量，進(jìn)而降低IFN-y表達(dá)量；伏立諾他可抑制STAT-3信號(hào)通路，從而抑制初始T細(xì)胞向 Thl7淋巴細(xì)胞分化，進(jìn)而降低Thl7細(xì)胞數(shù)量，進(jìn)而降低IL-17表達(dá)量；伏立諾他可上調(diào) ⑶4+⑶25+Foxp3+的nTreg細(xì)胞數(shù)量；伏立諾他可提升⑶4 +⑶3+⑶62L+的T細(xì)胞數(shù)量的藥 物；伏立諾他可抑制NF-kBP65的表達(dá)，從而抑制其對(duì)TNF-a轉(zhuǎn)錄的促進(jìn)作用，進(jìn)而抑制 TNF-a表達(dá)量，進(jìn)而緩解巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)；伏立諾他還可以上調(diào)緊密連接蛋白claudin-5 的表達(dá)量，從而修復(fù)血視網(wǎng)膜屏障損傷。
[0022] 基于以上性質(zhì)，確定了伏立諾他新的醫(yī)藥用途，具體來(lái)說(shuō)可以用于，以上述任一免 疫系統(tǒng)現(xiàn)象為病理效應(yīng)的疾病的治療，其治療機(jī)理是通過對(duì)上述免疫系統(tǒng)現(xiàn)象的調(diào)節(jié)來(lái)實(shí) 現(xiàn)的。并進(jìn)一步確定了其用于自身免疫性葡萄膜炎治療藥物的用途，實(shí)驗(yàn)表明伏立諾他對(duì) 自身免疫性葡萄膜炎療效確切，具有全新的治療通路且無(wú)副作用，具有良好的應(yīng)用前景。
【附圖說(shuō)明】
[0023] 圖1是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠眼底圖像。
[0024] 圖2是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠臨床評(píng)分結(jié)果。
[0025] 圖3是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠視網(wǎng)膜HE染色圖像。
[0026] 圖4是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠組織學(xué)評(píng)分結(jié)果。
[0027] 圖5是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠EB血管灌注造影視網(wǎng) 膜鋪片。
[0028] 圖6是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠免疫組織化學(xué)染色圖 像。
[0029] 圖7是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠緊密連接蛋白轉(zhuǎn)錄水 平比較圖。
[0030] 圖8是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠輔助T淋巴細(xì)胞亞群分 布情況圖。
[0031] 圖9是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠炎性細(xì)胞因子和信號(hào) 轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白表達(dá)水平比較圖。
[0032] 圖10是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠視網(wǎng)膜內(nèi)巨噬細(xì)胞分 布圖。
[0033] 圖11是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠視網(wǎng)膜內(nèi)表達(dá)p65蛋 白的巨細(xì)胞分布圖。
[0034] 圖12是本發(fā)明實(shí)施例中對(duì)照組小鼠和伏立諾他治療組小鼠視網(wǎng)膜內(nèi)p65蛋白表 達(dá)水平比較圖。
[0035] 在以上附圖中，帶有"control"字樣的是對(duì)照組圖像，帶有"vorinostat"字樣的 是伏立諾他治療組圖像。
【具體實(shí)施方式】
[0036] 以下將對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】進(jìn)行詳細(xì)描述。為了避免過多不必要的細(xì)節(jié)，在 以下實(shí)施例中對(duì)屬于公知的結(jié)構(gòu)或功能將不進(jìn)行詳細(xì)描述。
[0037] 以下實(shí)施例中所使用的近似性語(yǔ)言可用于定量表述，表明在不改變基本功能的情 況下可允許數(shù)量有一定的變動(dòng)。因此，用"大約"、"左右"等語(yǔ)言所修正的數(shù)值不限于該準(zhǔn) 確數(shù)值本身。在一些實(shí)施例中，"大約"表示允許其修正的數(shù)值在正負(fù)百分之十（10%)的 范圍內(nèi)變化，比如，"大約