量達 到340g，再加入滑石粉18g，硬脂酸鎂2g混合均勻，裝入膠囊，制成1000粒。
[0061] 實施例11片劑的制備
[0062] 制備方法：將按實施例1制法得到的中藥提取物100g加入乳糖使其重量達到 4088，再加入淀粉5(^，輕丙纖維素4(^，混合均勾，用75%乙醇制粒，干燥，整粒，加入28硬 脂酸鎂混合均勻，壓片，制成1000片。
[0063] 實施例12顆粒劑的制備
[0064] 制備方法：將按實施例1制法得到的中藥提取物100g加入乳糖使其重量達到 630g，甘露醇70g混合均勻，用75%乙醇制粒，干燥，整粒、制成450袋。
[0065] 實施例13中藥提取物八周灌胃給藥毒性試驗
[0066] 1、方法：選用健康Wistar大鼠，雌雄各半，分別為空白對照組（灌胃給予等體積蒸 餾水）、中藥提取物1組[按實施例1制備，水混懸后灌胃，劑量分別為3. 0g/kg/d(相當(dāng)于 約藥材150g/kg/d)]、中藥提取物2組[按實施例4制備，水混懸后灌胃，劑量分別為3. 0g/ kg/d(相當(dāng)于約藥材150g/kg/d)]。每組40只Wistar大鼠，雌雄各20只，每日灌胃一次， 每周給藥7天，連續(xù)8周。試驗期間對大鼠的外觀、行為、體重、攝食量等各項指標(biāo)進行檢 測，并分別于給藥結(jié)束和恢復(fù)期結(jié)束進行血液學(xué)及血液生化學(xué)各項指標(biāo)檢測和病理組織學(xué) 檢查。
[0067] 2、結(jié)果：8周灌胃給予中藥提取物，各劑量組大鼠活動正常，行為活潑，被毛光潤， 所有體征與對照組比較未見差別和異常改變。各組動物攝食量與同期對照組比較，未見毒 理學(xué)意義的異常變化。對體重?zé)o負(fù)面影響。血液學(xué)和血液生化學(xué)指標(biāo)與同期對照組比較， 均未見毒理學(xué)意義的異常改變。各組動物器官組織均無肉眼可見的病理改變。各組間所有 臟器重量及臟器系數(shù)亦均無毒理學(xué)意義的異常變化。所有鏡檢臟器均未發(fā)現(xiàn)與藥物相關(guān)的 病理改變?；謴?fù)期未見延遲性毒性反應(yīng)，亦未見與藥物有關(guān)的延遲性病理改變。結(jié)果表明， 本發(fā)明中藥提取物具有較大的安全空間，可以長期安全使用。
[0068] 實施例14中藥提取物對氫溴酸東莨菪堿致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙模型的藥效評價
[0069] 1、方法：將經(jīng)過篩選合格的健康KM小鼠隨機分為5組，即正常組、模型組、骨碎補 水提物組（劑量l〇〇mg*kg\制法為：取骨碎補干燥藥材用5倍量水浸泡過夜，加熱回流提 取2h，過濾，收集濾液，藥渣再用3倍量水提取兩次，合并濾液，減壓干燥，粉碎即得）、中藥 提取物1組（劑量l〇〇mg*kg\按實施例1方法制備）、中藥提取物2組（劑量100mg*kg\ 按實施例4的方法制備），每組12只。各組均采用灌胃給藥，給藥體積為10ml?kg\每天 一次，連續(xù)14天。待各組給藥9天后開始進行Morris水迷宮訓(xùn)練，2次/天。末次給藥1 小時后除正常組腹腔注射生理鹽水外，其余各組均腹腔注射3mg?kg1的氫溴酸東莨菪堿， 20min后進行水迷宮測試，方法為保持站臺位置不變自動攝像系統(tǒng)將記錄小鼠尋找到站臺 的時間（潛伏期）和游泳路徑（總路程），設(shè)置300s為最大潛伏期，300s后將自動停止記 錄。
[0070] 2、結(jié)果：結(jié)果如表1所示。
[0071] 表1藥物對氫溴酸東莨菪堿致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙模型水迷宮測試結(jié)果(X±s)
[0072]
[0073]注：與模型組相比，*P〈0. 05, #P〈0. 01。
[0074] 表1結(jié)果表明，和正常組相比，模型組小鼠潛伏期和總路程均有顯著增加，有顯著 性差異（P〈〇. 05)。骨碎補水提物組有減少小鼠找到安全平臺的潛伏期和總路程的趨勢，但 與模型組比較沒有顯著性差異（P> 0. 05)。中藥提取物1和2組能明顯減少小鼠找到安全 平臺的潛伏期和總路程，與模型組比較均有極顯著性差異（P〈〇. 01)，作用明顯優(yōu)于骨碎補 水提物組。表明本發(fā)明中藥提取物對氫溴酸東莨菪堿致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙模型有較好的預(yù) 防作用，說明該中藥提取物對阿爾茨海默病引起的學(xué)習(xí)記憶障礙有預(yù)防作用，而且作用明 顯優(yōu)于骨碎補水提物組。
[0075] 實施例15中藥提取物對APPswe轉(zhuǎn)基因小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙模型的藥效評價
[0076] 1、藥物處理：取健康成年昆明種小鼠10只，為正常組，APPswe轉(zhuǎn)基因小鼠40只， 隨機均分為4組，分別為模型組、骨碎補水提物組（劑量100mg?kg\制法為：取骨碎補干 燥藥材用5倍量水浸泡過夜，加熱回流提取2h，過濾，收集濾液，藥渣再用3倍量水提取兩 次，合并濾液，減壓干燥，粉碎即得）、中藥提取物1組（劑量l〇〇mg?kg\按實施例1方法 制備）、中藥提取物2組（劑量100mg?kg\按實施例4的方法制備）。各組均采用灌胃給 藥，給藥體積為l〇ml?kg\每天一次，正常組、模型組灌胃給予等量的蒸餾水，共4周。
[0077] 2、指標(biāo)測定
[0078] 2. 1Morris水迷宮實驗
[0079] 取正常及模型小鼠，進行定向航行實驗共進行7d。每天訓(xùn)練分上、下午兩段進行， 每段訓(xùn)練2次，訓(xùn)練時隨機選擇一個入水點，將小鼠面向池壁放入水中，觀察并記錄小鼠尋 找并爬上平臺所需時間（潛伏期）。4次訓(xùn)練分別從不同的入水點入水，如果小鼠在120s 內(nèi)未找到平臺，將其引至平臺穩(wěn)定l〇s，潛伏期記錄為120s，每次訓(xùn)練間隔60s。記錄每只小 鼠潛伏期的平均值。然后把站臺去掉，記錄2min內(nèi)小鼠穿越站臺位點的次數(shù)，記為穿越次 數(shù)。
[0080] 2. 2 腦組織中S0D，MA0, N0, MAD，Na+-K+-ATPase含量的測定
[0081] 于"水迷宮實驗項下"記憶功能測定結(jié)束后次日，脫頸椎處死動物，在冰臺上快 速取出小腦組織并置于滅菌后冰生理鹽水中漂洗，除去血跡，濾紙拭干，精確稱重后，將小 腦組織迅速浸入9倍量冷生理鹽水中，用勻漿器在冰浴中充分碾磨，制成10%腦組織勻 漿，以3000r?min1離心10min，取上清液待用。按試劑盒說明書測定S0D，MA0,N0,MAD， Na+-K+-ATPase活性。
[0082] 3、結(jié)果
[0083] 3. 1中藥提取物對APPswe轉(zhuǎn)基因小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響
[0084] 由表2可見，和正常組比較，模型組小鼠學(xué)習(xí)記憶潛伏時間明顯延長，平臺象限游 泳時間降低，穿越次數(shù)減少，有極顯著性差異（P〈〇. 01)。骨碎補水提物組有減少模型小鼠學(xué) 習(xí)記憶潛伏時間、使平臺象限游泳時間及穿越次數(shù)增加的趨勢，但與模型組比較沒有顯著 性差異（P> 〇. 05)。中藥提取物1和2組能明顯減少模型小鼠學(xué)習(xí)記憶潛伏時間，同時使 平臺象限游泳時間及穿越次數(shù)明顯增加，與模型組比較均有極顯著性差異（P〈〇. 01)，作用 明顯優(yōu)于骨碎補水提物組。表明本發(fā)明中藥提取物對阿爾茨海默病引起的學(xué)習(xí)記憶障礙有 治療作用，而且作用明顯優(yōu)于骨碎補水提物組。
[0085] 表2中藥提取物對衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶功能影響（n= 10,X±：s)
[0086]
[0087] 注：與模型組比較，*P〈0. 05 ;**P〈0. 01。
[0088] 3. 2中藥提取物對模型小鼠腦組織SOD，MAO,NO,MAD，Na+-K+_ATPase活性的影響
[0089] 由表3可見，模型組小鼠腦內(nèi)SOD、NO、Na+-K+_ATPase活性明顯降低，MDA含量增 加、MA0活性增高，與正常組比較有極顯著性差異（P〈0. 01);骨碎補水提物組有升高模型小 鼠腦內(nèi)S0D、N0、Na+-K+-ATPase活性、降低MDA含量和MA0活性的趨勢，與模型組比較沒有 顯著性差異（P> 〇. 05);中藥提取物1和2組能明顯升高阿爾茨海默病小鼠腦內(nèi)S0D、N0、 Na+-K+-ATPase活性、降低MDA含量和MA0的活性，與模型組比較有極顯著性差異（P〈0. 01)。
[0090] 表3中藥提取物對衰老小鼠腦組織中SOD、MAO、NO、MDA、Na+-K+-ATPase含量影響 (n= 10,X±s)
[0091]
[0092] 注：與模型組比較，*P〈0. 05 ;**P〈0. 01。
[0093] APPswe轉(zhuǎn)基因小鼠腦組織中S0D、N0、Na+-K+-ATPase活性較低，MDA含量增加、MAO 活性增強，中藥提取物可增強APPswe轉(zhuǎn)基因小鼠腦組織中S0D、N0、Na+-K+-ATPase活性，降 低MDA含量，抑制MA0活性，證實了本發(fā)明中藥提取物通過增強APPswe轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)抗 氧化能力，發(fā)揮治療阿爾茨海默病的作用，而且作用明顯優(yōu)于骨碎補水提物組。
[0094