一種絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物的制備方法及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種絲瓜絡(luò)提取物的制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 人體在氧化代謝的過程中會產(chǎn)生大量含氧自由基，自由基通過細胞運輸過程會破 壞其它分子的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細胞受損，使人體各預(yù)防細胞機能下降、衰老，可誘發(fā)癌癥、糖尿 病、心血管疾病、腎臟病、動脈硬化、缺血性心臟病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、眼睛疾病等百余種疾病。 研究表明，通過補充抗氧化物質(zhì)能夠保持機體自由基的產(chǎn)生與消除達到平衡，從而防止自 由基對細胞和組織的損傷，是預(yù)防各疾病的有效措施之一，食用功能性的抗氧化食品也是 一種既方便又有效的補充抗氧化劑的方法。
[0003] 絲瓜絡(luò)，即萌蘆科植物絲瓜（Luffacylindrical(L.)Rome)的干燥成熟果實的維 管束，具有通經(jīng)活絡(luò)、清熱解毒、利尿消腫等功效。絲瓜絡(luò)含有留醇、三萜、皂苷、黃酮、酚類、 蛋白質(zhì)、氨基酸及有機酸等成分。絲瓜絡(luò)在臨床上廣泛用于治療胸脅疼痛、腹痛、腰痛、睪丸 腫痛、肺熱咳嗽、婦女閉經(jīng)、乳汁不通、癰腫痔瘡、便血崩漏等疾病?，F(xiàn)代研究表明，絲瓜絡(luò)對 心肌缺血過程中的心肌具有保護作用。另外，絲瓜絡(luò)在降血脂、抑制體重增加、抗炎、鎮(zhèn)痛鎮(zhèn) 靜及抗過敏等方面也取得了良好的效果，但其抗氧化活性的研究在文獻中幾乎未見報道。 基于抗氧化活性與多種藥理作用相關(guān)，本發(fā)明提供了絲瓜絡(luò)的抗氧化活性提取物及其制備 方法，該提取物具有較強的清除DPPH自由基的能力，且FRAP試驗測定其具有較強的總抗氧 化能力，因此，本發(fā)明提供的絲瓜絡(luò)抗氧化提取物既可以作為從天然植物中獲得的抗氧化 劑在食品等領(lǐng)域應(yīng)用，也可以作為絲瓜絡(luò)的藥理活性提取物將來開發(fā)成新藥應(yīng)用于臨床。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明是要解決現(xiàn)有絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物的制備方法有有機溶劑殘留，安全 性差，且成本高的問題，提供一種絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物的制備方法及其用途。
[0005] 本發(fā)明絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：
[0006] -、取絲瓜絡(luò)藥材，加入10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分濃度為75 %的乙醇溶液，浸泡8~ 12h，超聲25~40min，過濾，分別收集固相物A和液相物A，將固相物A加入10倍質(zhì)量的質(zhì) 量百分濃度為75%的乙醇溶液中浸泡6~8h，超聲25~40min，過濾，收集液相物B，然后 將液相物A和液相物B混合，得到浸提液；
[0007] 二、將浸提液減壓濃縮得浸膏；
[0008] 三、將浸膏用蒸餾水溶解后上到聚酰胺色譜柱上，先用蒸餾水洗滌4個柱體積，再 用質(zhì)量濃度為30%的乙醇溶液洗脫4個柱體積，收集洗脫液，然后減壓濃縮洗脫液至干，得 到的固體即為絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物。
[0009] 上述絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物在制備抗氧化藥物和抗氧化食品中的用途。
[0010] 本發(fā)明的有益效果：
[0011] 本發(fā)明的制備方法中僅使用了水和乙醇，綠色環(huán)保、無有機溶劑殘留，且安全性 高。本發(fā)明方法采用聚酰胺色譜柱，與葡聚糖凝膠色譜等相比價格較低，降低了方法的成 本。提取方法采用了超聲提取法和冷浸法相結(jié)合，避免了加熱回流提取對活性成分的破壞， 提高了提取率，提取所得浸膏的收率多5%，抗氧化活性提取物的收率多0. 1%。聚酰胺柱 色譜具有富集效率高，可重復(fù)利用的優(yōu)點，降低了成本，具有可行性。
[0012] 本發(fā)明制備的絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物，通過對DPPH自由基清除試驗及FRAP法 測定其抗氧化能力試驗證明了該提取物具有優(yōu)良的抗氧化活性，可與藥物賦形劑制成適合 于臨床使用的抗氧化藥物或添加到食品中作為抗氧化食品添加劑使用。本發(fā)明的制備方法 中僅使用了水和乙醇，綠色環(huán)保、無有機溶劑殘留，且安全性高。提取方法采用了超聲提取 法，既避免了加熱回流提取對活性成分的破壞，又提高了提取率。聚酰胺柱色譜具有富集效 率高，可重復(fù)利用的優(yōu)點，降低了成本，具有可行性。
【附圖說明】
[0013] 圖1為FeSO^液標(biāo)準(zhǔn)曲線。
【具體實施方式】
[0014] 本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉【具體實施方式】，還包括各【具體實施方式】間的 任意組合。
【具體實施方式】 [0015] 一：本實施方式絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步 驟：
[0016] -、取絲瓜絡(luò)藥材，加入10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分濃度為75 %的乙醇溶液，浸泡8~ 12h，超聲25~40min，過濾，分別收集固相物A和液相物A，將固相物A加入10倍質(zhì)量的質(zhì) 量百分濃度為75%的乙醇溶液中浸泡6~8h，超聲25~40min，過濾，收集液相物B，然后 將液相物A和液相物B混合，得到浸提液；
[0017] 二、將浸提液減壓濃縮得浸膏；
[0018] 三、將浸膏用蒸餾水溶解后上到聚酰胺色譜柱上，先用蒸餾水洗滌4個柱體積，再 用質(zhì)量濃度為30%的乙醇溶液洗脫4個柱體積，收集洗脫液，然后減壓濃縮洗脫液至干，得 到的固體即為絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物。
[0019] 本實施方式的制備方法中僅使用了水和乙醇，綠色環(huán)保、無有機溶劑殘留，且安全 性高。提取方法采用了超聲提取法和冷浸法相結(jié)合，避免了加熱回流提取對活性成分的破 壞，且提高了提取率。分離過程中使用的聚酰胺柱色譜具有富集效率高，可重復(fù)利用的優(yōu) 點，降低了成本，適用于大規(guī)模生產(chǎn)。
【具體實施方式】 [0020] 二：本實施方式與一不同的是：步驟二所述浸膏的相 對密度為1. 10~1. 14。其它與一相同。
【具體實施方式】 [0021] 三：本實施方式與一或二不同的是：步驟二中減壓濃 縮得浸膏的溫度為50°C，即在50°C下進行減壓濃縮。其它與一或二相同。
【具體實施方式】 [0022] 四：本實施方式與一至三之一不同的是：步驟三中浸 膏與溶解所用的蒸餾水的體積比為1:1。其它與一至三之一相同。
【具體實施方式】 [0023] 五：本實施方式與一至四之一不同的是：步驟三中洗 脫的流速為5mL/min。其它與一至四之一相同。
【具體實施方式】 [0024] 六：本實施方式與一至五之一不同的是：步驟三中減 壓濃縮至干的溫度為60°C，即在60°C下進行減壓濃縮至干。其它與一至五之 一相同。
【具體實施方式】 [0025] 七：本實施方式與一至六之一不同的是：步驟三中所 述的柱體積是指柱床體積，即柱內(nèi)聚酰胺的體積。其它與一至六之一相同。
【具體實施方式】 [0026] 八：本實施方式絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物在制備抗氧化藥物和抗氧 化食品中的用途。
[0027] 本實施方式制備的絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物，通過對DPPH自由基清除試驗及 FRAP法測定其抗氧化能力試驗證明了該提取物具有優(yōu)良的抗氧化活性，可與藥物賦形劑制 成適合于臨床使用的抗氧化藥物或添加到食品中作為抗氧化食品添加劑使用。
[0028] 通過以下試驗驗證本發(fā)明的有益效果：
[0029] 試驗1、本試驗收集10批不同產(chǎn)地的絲瓜絡(luò)進行提取分離；
[0030] 本試驗絲瓜絡(luò)抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：
[0031] -、取200g絲瓜絡(luò)藥材，加10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分濃度為75%的乙醇溶液，浸泡 12h，超聲30min，過濾，分別收集固相物A和液相物A，將固相物A加入10倍質(zhì)量的質(zhì)量百 分濃度為75 %的乙醇溶液中浸泡8h，超聲30min，過濾，收集液相物B，然后將液相物A和液 相物B混合，得到浸提液；
[0032] 二、將浸提液減壓濃縮得浸膏；
[0033] 三、將浸膏用蒸餾水溶解后上到聚酰胺色譜柱上，先用蒸餾水洗滌4個柱體積，再 用30 %乙醇、75 %乙醇、95 %乙醇各洗脫4個柱體積，分別收集洗脫液，然后減壓濃縮30 % 乙醇洗脫液至干，得到3