NP-HA-laser/magnet 組、DOX 組、DOX-1aser 組、CuS-10NP-HA/D0X 組、CuS-10NP-HA/D0X-laser 組、CuS-1ONP-HA/DOX-laser/magnet 組的抑瘤率分別為 4.49%，26.82%，41.56%，43.85%，46.03%，68.75%，81.43%，87.68%ο結(jié)果表明，CuS-1ONP-HA/DOX-laser/magnet組的藥效顯著，當(dāng)給藥磁性中空介孔硫化銅及其藥物組合物在激光照射和外加磁場共同作用時，小鼠的瘤體積得到了明顯的抑制，說明CuS-1ONP-HA/DOX-laser/magnet腫瘤靶向給藥系統(tǒng)的化療、808nm激光熱療、磁靶向聯(lián)合可以顯著增強(qiáng)腫瘤的治療效果。
[0020]五、負(fù)載阿霉素的磁性中空介孔硫化銅組合物的磁共振成像實(shí)驗(yàn)
在小鼠的右上肢背部皮下接種S-180腹水瘤細(xì)胞，7天后測量腫瘤體積，取12只腫瘤體積彡100 mm3且腫瘤體積和體重相似的小鼠，將其隨機(jī)分為2組，每組6只，具體分組如下:生理鹽水組、CuS-10NP-HA/D0X組。對兩組小鼠腹腔注射0.04ml 3%戊巴比妥鈉進(jìn)行麻醉，固定后對兩組小鼠均采用靜脈給藥的方式，其中生理鹽水200 μ 1，2mg/ml的CuS-1ONP-HA/DOX生理鹽水溶液200 μ I。注射后24h對小鼠進(jìn)行T2WI磁共振成像。其中掃描參數(shù)為:橫斷位 SE-T2WI，TR4240ms，TE1108.47ms，F(xiàn)0V8cm，層厚(橫斷位 2_，冠狀位 3mm)，層間距 1_，矩陣256*256。在兩組小鼠的腫瘤區(qū)域的T2WI圖像上繪制大小一致的感興趣區(qū)ROI測量腫瘤實(shí)體部分信號強(qiáng)度(SIT)，取平均值，測量面積不小于6mm2。結(jié)果顯示CuS_10NP-HA/D0X組腫瘤區(qū)域的T2WI信號與對照組小鼠相應(yīng)區(qū)域的信號相比，信號明顯減低，MRI的效果明顯增強(qiáng)。
[0021]實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下突出的有益技術(shù)效果:
(I)本發(fā)明提供的磁性中空介孔硫化銅及其藥物組合物，具有優(yōu)良的生物相容性、水分散性和穩(wěn)定性，并保留了硫化銅的高效光熱治療活性，集熱療和化療為一體；
(2 )本發(fā)明選擇四氧化三鐵修飾硫化銅，既可以在藥物轉(zhuǎn)運(yùn)過程中提供磁靶向作用，又可以作為蓋帽劑，防止藥物的泄漏，并且在外加磁場的作用下，可以對藥物的釋放起到控釋的作用，同時四氧化三鐵可以進(jìn)行磁共振成像，在治療過程中可以進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測，為腫瘤的診斷和治療提供了新方向。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物，其特征在于，在中空介孔硫化銅納米粒子與巰基乙胺反應(yīng)得到的氨基化的硫化銅上負(fù)載抗腫瘤藥物，硫化銅表面靜電吸附上四氧化三鐵納米粒，經(jīng)酰胺鍵反應(yīng)在表面修飾上透明質(zhì)酸，成透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物；所述的四氧化三鐵和硫化銅的質(zhì)量含量比為1~8: 1，磁性中空介孔硫化銅的粒徑為50~300nm。2.權(quán)利要求1所述的透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物的制備方法，其特征在于，由以下步驟實(shí)現(xiàn): (1)、將0.7-0.8g的CuSO4.5H20溶解于180_220ml水中，攪拌，加入5_7g聚乙烯吡咯烷酮，反應(yīng)10~20min，加入1.1-1.3g氫氧化鈉，攪拌均勻，再滴加ll_13ml水合肼，攪拌5~10min，加入 1.2-1.4ml 硫酸銨，攪拌 lh，用超純水 12000-15000rpm (即 12000-15000r/min)離心5-10min水洗至中性，冷凍干燥48h，得中空介孔硫化銅納米顆粒； (2)、將中空介孔硫化銅納米粒90-110mg超聲分散于90-110ml超純水中，超聲10~30min，攪拌下加入180_220mg巰基乙胺，攪拌24h，12000-15000rpm離心5_10min得沉淀，沉淀加超純水復(fù)溶，再在12000-1500()rpm離心5_10min得沉淀，沉淀加超純水復(fù)溶，如此重復(fù)2~3遍，直至為中性，冷凍干燥，得氨基化中空介孔硫化銅復(fù)合物(CuS-NH2); (3)、合成四氧化三鐵納米粒:取0.8-0.9 g FeCljP 2.3-2.4 g FeCl 3攪拌下溶解于35-45ml水中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至80°C，緩慢滴加4_6ml氨水，油浴攪拌30min，加入質(zhì)量濃度0.5g.ml 1的檸檬酸1.8-2.2ml，升溫至95°C，反應(yīng)90min，攪拌下冷卻至室溫，透析除去未反應(yīng)物質(zhì)，冷凍干燥，即得水溶性四氧化三鐵納米粒； (4)、取將步驟(2)得到的氨基化中空介孔硫化銅復(fù)合物(CuS-NH2)4.5-5.5mg，分散于PH7-9的磷酸鹽緩沖液4.5-5.5ml中，冰浴下超聲10~30 min，與含有抗腫瘤藥物的磷酸鹽緩沖液混合，每3ml磷酸鹽緩沖液中含有9g抗腫瘤藥物，室溫?cái)嚢?4h，離心用水洗滌3次，探頭超聲分散于水中，冷凍干燥即得負(fù)載抗腫瘤藥物的氨基化硫化銅； (5)、將負(fù)載抗腫瘤藥物的氨基化硫化銅分散于18-22ml水中，攪拌下加入四氧化三鐵納米粒，室溫?cái)嚢?-48h，12000-15000rpm離心5_10min得沉淀，冷凍干燥，即得負(fù)載抗腫瘤藥物的磁性中空介孔硫化銅； (6)、將上述負(fù)載藥物的磁性中空介孔硫化銅超聲分散于18-22ml水中，加入用水溶液的透明質(zhì)酸180-220mg，攪拌反應(yīng)6_48h，即成透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物的制備方法，其特征在于，由以下步驟實(shí)現(xiàn): (1)、將0.75g的CuSO4.5H20溶解于200ml水中，攪拌，加入6.0g聚乙烯吡咯烷酮，反應(yīng)10~20min，加入1.2g氫氧化鈉，攪拌均勻后，用注射器滴加12ml水合肼，攪拌5~10min，最后加入1.29ml硫酸錢，攪拌lh，用超純水15000rpm離心5_10min水洗至中性，冷凍干燥48h，得到中空介孔硫化銅納米顆粒； (2)、將中空介孔硫化銅納米粒10mg探頭超聲分散于10ml超純水中，超聲10~30min，攪拌條件下加入200mg巰基乙胺，攪拌24h，15000rpm離心5_10min得沉淀，加超純水復(fù)溶，再離心，如此重復(fù)2~3遍，直至為中性，冷凍干燥，得到氨基化中空介孔硫化銅復(fù)合物(CuS-NH2)； (3)、合成四氧化三鐵納米粒:取0.86 g FeCljP 2.35 g FeCl 3攪拌下溶解于40ml水中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至80°C，用注射器緩慢滴加5ml氨水，油浴攪拌30min，之后加入質(zhì)量濃度0.5g.ml 1的梓檬酸2ml，升溫至95°C，反應(yīng)90min，攪拌下冷卻至室溫，透析除去未反應(yīng)物質(zhì)，冷凍干燥，即得水溶性四氧化三鐵納米粒； (4)、取氨基化中空介孔硫化銅復(fù)合物5mg，分散于5ml磷酸鹽緩沖液中，冰浴下探頭超聲10~30 min,與含有抗腫瘤藥物的磷酸鹽緩沖液混合，每3ml磷酸鹽緩沖液中含有9g抗腫瘤藥物，室溫?cái)嚢?4h，15000rpm離心5_10min用水洗滌3次，探頭超聲分散于水中，冷凍干燥即得負(fù)載抗腫瘤藥物的氨基化硫化銅； (5)、將負(fù)載抗腫瘤藥物的氨基化硫化銅分散于20ml水中，攪拌條件下加入分散于水中的四氧化三鐵，室溫?cái)嚢?4h，離心得沉淀，冷凍干燥，即得負(fù)載抗腫瘤藥物的磁性中空介孔硫化銅； (6)、將負(fù)載藥物的磁性中空介孔硫化銅探頭超聲分散于20ml水中，加入200mg透明質(zhì)酸水溶液，攪拌反應(yīng)24h，即得透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物。4.權(quán)利要求1所述的透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物在制備治療腫瘤藥物注射劑、口服劑或植入給藥劑中的應(yīng)用。5.權(quán)利要求1所述的透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，將透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物和藥學(xué)活性或藥理活性分子相結(jié)合制成納米載藥系統(tǒng)，所述的藥學(xué)活性或藥理活性分子為抗腫瘤藥物的阿霉素、紫杉醇、多烯紫杉醇、羥基喜樹堿、米托蒽醌。6.權(quán)利要求1所述的透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物在制備腫瘤光熱治療聯(lián)合化療、磁場遠(yuǎn)距離調(diào)控釋藥、磁共振成像藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物及其制備方法與應(yīng)用，可有效解決生物相容性好、磁靶向性強(qiáng)、毒副作用小，以提高腫瘤治療效果的問題，方法是，在中空介孔硫化銅納米粒子與巰基乙胺反應(yīng)得到的氨基化的硫化銅上負(fù)載抗腫瘤藥物，硫化銅表面靜電吸附上四氧化三鐵納米粒，經(jīng)酰胺鍵反應(yīng)在表面修飾上透明質(zhì)酸，成透明質(zhì)酸修飾的磁性中空介孔硫化銅的藥物組合物；所述的四氧化三鐵和硫化銅的質(zhì)量含量比為1~8︰1，磁性中空介孔硫化銅的粒徑為50~300nm，本發(fā)明操作方便，方法穩(wěn)定可靠，具有生物相容性好、磁靶向性強(qiáng)、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)，在腫瘤治療方面可發(fā)揮熱療、腫瘤診斷、磁場緩控釋藥等作用。
【IPC分類】A61P35/00, A61K31/704, A61K47/36, A61K41/00, A61K47/48, A61K49/00
【公開號】CN105056243
【申請?zhí)枴緾N201510431243
【發(fā)明人】馮倩華, 侯琳, 張振中, 張媛媛, 張紅嶺
【申請人】鄭州大學(xué)
【公開日】2015年11月18日
【申請日】2015年7月22日