齲齒的無創(chuàng)傷治療用的木瓜蛋白酶牙科用凝膠組合物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及特別是使用手工用于牙齒中腐爛的牙本質(zhì)的軟化的化學(xué)組合物的齲 齒的無創(chuàng)傷治療。
【背景技術(shù)】
[0002] 根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO)，90 %的人口患有齲齒并且80 %不愿意去牙醫(yī)診所，因 為他們害怕局部麻醉和由渦輪機（鉆孔機）產(chǎn)生的聲音，同時將技術(shù)描述為消極的并且高 度排斥，因為他們認為噪音、振動和壓力為全面牙齒修復(fù)的障礙。
[0003] 手工去除齲齒組織的技術(shù)看來成了對所有年齡的患者提供更大的安慰的選擇。對 關(guān)于該問題的文獻和臨床病例進行一些研究后，選擇性的手工去除齲齒組織時協(xié)同工作的 特定酶的作用是驚人的，由此提高技術(shù)并且使患者和牙醫(yī)二者更容易接受。
[0004] 從70年代開始，幾位研究者基于健康的牙齒結(jié)構(gòu)的最大保留原則，提出去除齲齒 的不同組成的制劑。
[0005]在 1975 年，Habib等人（HabibC.M.，KronmanJ.，GoldmanM?，用 GK-IOl(N-氯甘氨酸）的膠原和輕脯氨酸改變治療的化學(xué)評價。Pharmacol.Ther. Dent.，v. 2, 209-215, 1975)開始該方法，其通過使用具有非特異性蛋白水解作用的5 %次 氯酸鈉去除腐爛的牙齒組織。然而，次氯酸鈉對于口腔組織是有毒的、刺激的試劑，為此，以 解決所述不便為目的，提出了包括將甘氨酸、氯化鈉和氫氧化鈉添加至5%次氯酸鈉中的方 案。改進的制劑稱為GK-101并且由N-單氯甘氨酸組成（GoldmanM.，KronmanJ.H.;對去 除齲齒的化學(xué)機械手段的初步報道。J.Am.Dent.Assoc. 1976 ;93 (6) : 1149-53)。即使這使 得該方法比單獨的次氯酸鹽更有效，但其去除齲齒組織較慢。此外，該方法不包括進行填充 的粘接的牙科材料，因此渦輪機的使用對于成形窩洞的形狀仍是必需的。
[0006] 向包含N-單氯甘氨酸的制劑中添加氨基丁酸，由此獲得以名稱Caridex銷售的 組合物（SchutzbankS.G.，GalainiJ.，KronmanJ.H.，GoldmanM.，ClarkeR.E.A.GK-101 和GK101E在齲齒去除中的效果的體外研究的對比。J.Dent.Res. 1978;57:861-864)。即 使當Caridex破壞銅齒的牙本質(zhì)膠原更有效時，Caridex也具有一定的臨床限制，其中我們 可以提到：其具有較高的成本、其需要具有泵的大容器、其需要大量溶液、其加熱期間存在 幾個問題并且具有短的保質(zhì)期（BeeleyJ.A.,YipH.K.,StevensonA.G?，化學(xué)機械銅齒去 除：技術(shù)的回顧和最新進展。Br.Dent.J. 2000 ;188:427-430)。
[0007] 為了使其更有效且更容易處理，該Caridex凝膠發(fā)展為Carisolv體系，所述 Carisolv體系包括兩種試劑：具有三種不同氨基酸：賴氨酸、亮氨酸和谷氨酸的溶液的 羧甲基纖維素系凝膠；第二組分為0.5 %次氯酸鈉溶液。盡管實現(xiàn)了保留健康的牙齒 組織并且減少旋轉(zhuǎn)工具的使用的優(yōu)點（EricsonD.，Zi_ermanM.，RaberH.，Gotrik B.,BornsteinR.，ThorellJ.;銅齒的化學(xué)機械去除的新方法的功效和安全性的臨床評 價。CariesRes. 1999 ;33:171-177)，但Carisolv的使用不能系統(tǒng)化，因此由于如需要強化 訓(xùn)練和專業(yè)記錄以及需要特定工具（這增加該方案的成本）等使用困難，使得其應(yīng)用限制 在小部分人。
[0008] 以使用于去除齲齒的該化學(xué)機械系統(tǒng)的使用全球化為目的，凝膠類制品在2003 年投放市場，該制品的主成分為木瓜蛋白酶，類似于人類胃蛋白酶的從木瓜獲得的酶。
[0009] 該制品由兩位研究者，圣保羅大學(xué)和大都會桑托斯（UniversitiesofSaoPaulo andMetropolitanadeSantos)的兒童牙科教授SandraKalilBussadori博士和來自制 藥公司F6rmula& Farmdcia的MdrciaBougasMiziara博士在巴西創(chuàng)造，并且給出商 品名Papacarie0
[0010]Papacarie包括作為活性成分的木瓜蛋白酶、氯胺T、羧甲基纖維素、氯化鈉、 對羥基苯甲酸甲酯、氫氧化鈉、色料和足量的蒸餾水，從而完成制劑（W02005020946A1)， 后來用由木瓜蛋白酶、氯胺T、果膠、聚乙二醇、丙二醇和著色劑組成的凝膠來改進 (TO2014016644A1)。
[0011] 木瓜蛋白酶從生長在如巴西、印度、錫蘭、南非和夏威夷等熱帶國家的綠色成熟木 瓜番木瓜的葉子和果實的膠乳中提取。
[0012] 木瓜蛋白酶為具有殺菌、抑菌和抗炎特性，專門對牙齒壞死組織起作用的蛋白水 解酶，這是因為其不包含抑制木瓜蛋白酶的蛋白水解作用的血漿抗蛋白酶a1-抗胰蛋白 酶。由于此，壞死組織的軟化發(fā)生，從而在保留健康組織的同時，清創(chuàng)部分分解的膠原纖維， 這是由于其未脫礦并且不具有任何暴露的膠原纖維。
[0013] 用于Papacarie制劑的另一組分為氯胺。氯胺由具有用于根管沖洗的殺菌和消毒 性的氯和銨組成。氯胺為腐爛的牙本質(zhì)的額外化學(xué)軟化劑，從而因為氫鍵被破壞而影響膠 原的第二和/或第四結(jié)構(gòu)，這使得腐爛組織的去除更容易。當通過使用掃描電子顯微鏡和 維氏顯微硬度檢查氯胺的效果時，觀察到氯胺的使用導(dǎo)致腐爛的牙本質(zhì)的外層中的開口牙 本質(zhì)小管。
[0014] 氯胺為通常危害人體健康的組分。氯胺攝入人體后的幾分鐘可患有惡心、發(fā)紺、循 環(huán)性虛脫、口吐白沫和呼吸衰竭。在進行透析的患者中水容器中的氯胺導(dǎo)致高鐵血紅蛋白 血癥和溶血。當吸入氯胺時，還導(dǎo)致支氣管痙攣。
[0015] 由于Papacarie的各組分，使得Papacarie實現(xiàn)了使銅齒的去除更容易與高抗菌 性的協(xié)同作用并且不使用特定的牙科工具。
[0016]Papacarie的主要優(yōu)點為需要較少的手工壓力、對介入的專業(yè)人士引起較少的疲 倦和對患者方面引起較少的敏感性。
[0017] 該凝膠特別推薦用于以下情況：在幼兒、兒童、青少年和/或恐懼癥的成年人或者 具有特別需求的患者中降低牙髓暴露的風險的無癥狀的深齲齒損壞；根齲的去除；牙周病 治療時齒根面的化學(xué)機械處理，使得牙結(jié)石或牙垢的去除和齒根隔離更容易；以及由于其 可接受的成本使得用于公共衛(wèi)生。
[0018] 沒有提到禁忌癥。無數(shù)研究顯示，沒有由于凝膠與口腔組織的直接接觸引起的刺 激。然而，存在不應(yīng)該施用Papacarie的一定狀況：當有與慢性感染過程相一致的癥狀如 瘺、自發(fā)性疼痛或叩診疼痛時，在具有可能改變宿主的免疫反應(yīng)的系統(tǒng)性疾病如糖尿病、血 液惡質(zhì)病等的患者中。
[0019] 該制品必須在適當冷卻下保存并且為了在室溫下施用必須在使用前十五分鐘從 冰箱中取出。
[0020] 專利申請AR號P20120101629,公開號為AR085779A1中描述了基于木瓜蛋白酶 和果膠的另一凝膠。該文獻的權(quán)利要求1的目的是去除齲齒組織的化學(xué)牙科制劑、用于齲 齒或齲齒組織去除的所述化學(xué)牙科制劑的制造方法和施用方式；其特征在于包括：2%與 6 %之間的蛋白水解酶，優(yōu)選30,OOOU/mg木瓜蛋白酶；0. 2 %與1 %之間的抗真菌劑，優(yōu)選 氯胺T;0. 1%與0. 3%之間的抗菌著色劑，優(yōu)選甲苯胺藍；所有上述組分由在去離子水中為 3% -6%，并且用在去離子水中的稀釋的三乙醇胺溶液調(diào)節(jié)至pH5/7的穩(wěn)定劑、優(yōu)選柑橘 果膠來支持。
[0021] 因此，根據(jù)涉及木瓜蛋白酶-果膠體系的現(xiàn)有技術(shù)的目前狀態(tài)，木瓜蛋白酶凝膠 的最大獲得值在600-l，800U/mg的范圍（參見專利申請AR085779A1)并且在木瓜蛋白 酶-丙二醇-聚乙二醇體系中，最大獲得值為約600U/mg(參見W02014016644A1)。
[0022] 因此，當評價所有上述體系的優(yōu)點與缺點時，結(jié)論是，具有通過改進該酶的承載方 式重新配制的木瓜蛋白酶系酶凝膠是可取的，其更穩(wěn)定并且對于急性的和慢性的齲齒二者 具有更大的作用能力，其還具有按時間順序增強的作用，不需要特定工具并且避免潛在的 有毒產(chǎn)品的使用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0023] 本發(fā)明涉及用于手工施用的凝膠牙科化學(xué)組合物，其目的是使牙齒（dental pieces)上齲腐的牙本質(zhì)軟化以隨后用工具手工去除，而不求助于用鉆孔機的傳統(tǒng)方法。
[0024] 因此，本發(fā)明的目的是齲齒的無創(chuàng)傷治療用凝膠形式的木瓜蛋白酶的牙科用組合 物，其包括最終活性為至少3,OOOU/mg的木瓜蛋白酶，其中木瓜蛋白酶與藥學(xué)上可接受的 著色劑、防腐劑和溶劑一起用PH= 7的緩沖液-C3 6多元醇-果膠-C2 6鏈烷醇胺-非離子 型乳化劑混合物生物包封。
[0025] 優(yōu)選，pH= 7的緩沖液選自磷酸氫二鈉或磷酸氫二鉀（Na2HPO4,K2HPO4) /檸檬酸 (C6H8O7)，氯化鈉（NaCl) /檸