一種祖司麻提取物，該提取物的制備方法及醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體涉及一種祖司麻提取物，該提取物的制備方法及醫(yī)藥 用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 祖司麻為瑞香科植物黃瑞香Daphne giraldii Nitsche.的根皮及莖皮。春、秋季 剝?nèi)∏o、根皮。又名祖師麻、大救駕、金腰帶。
[0003] 祖司麻原形態(tài)黃瑞香為落葉或半常綠灌木。根紅黃色，纖維性。莖灰褐色，平滑， 無(wú)毛，樹(shù)皮富含纖維，不易折斷。葉互生，紙質(zhì)，常集于小枝頂部，葉片倒披針形，長(zhǎng)3~6cm， 寬7~12cm，先端尖或鈍，基部楔形，全緣，下面有白粉；近無(wú)柄?；S色，微香，3~8花叢 生小枝頂端，略呈頭狀花序；花被管狀，上部4裂，裂片長(zhǎng)三角狀披針形，先端漸窄尖；雄蕊 8,成2輪，生于花被管上部；子房無(wú)花柱，柱頭圓。核果卵圓形，鮮紅色?；ㄆ?~6月。生 于山坡林邊或疏林中。主產(chǎn)陜西、甘肅。
[0004] 祖司麻呈長(zhǎng)條狀，卷曲，厚0. 5~2mm。外表面褐黃色或灰褐色，根皮較粗糙，莖皮 光滑，具縱皺紋及橫長(zhǎng)皮孔。質(zhì)韌，不易折斷，斷面纖維性，黃白色。氣微，味微苦，具持久的 麻舌感。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種祖司麻提取物，該提取物的制備方法和液相分析方 法，含有該提取物的藥物制劑及利用該提取物制備降血脂藥物的用途。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過(guò)下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] -種祖司麻提取物，該提取物由以下方法制備：
[0008] (a)以重量計(jì)，每100份藥材包含干燥的祖司麻80~90份和干燥的黨參10~20 份，混合粉碎；(b)用乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液；（C)對(duì)步驟 (b)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（d)正丁醇萃取物用大孔樹(shù)脂富集，先用15~25%乙醇沖洗 8~10個(gè)柱體積除去多糖，再用60~70%乙醇洗脫8~10個(gè)柱體積，收集60~70%乙醇 洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0009] 進(jìn)一步地，步驟（d)中所述大孔樹(shù)脂為AB-8型大孔樹(shù)脂。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟（b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為70~80%。
[0011] 進(jìn)一步地，步驟（b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為75%。
[0012] 進(jìn)一步地，步驟（d)為用正丁醇萃取物用大孔樹(shù)脂富集，先用20%乙醇沖洗9個(gè)柱 體積除去多糖，再用65%乙醇洗脫9個(gè)柱體積，收集65%乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0013] 為了能夠通過(guò)建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同產(chǎn)地、批次藥材制備的祖司麻 提取物批間差異，所述提取物的液相分析方法為：
[0014] 色譜柱：Agilent Zorbax Extent C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 y m);
[0015] 流動(dòng)相：A為甲醇，B為0.1%甲酸水溶液；
[0016] 梯度洗脫程序：0.01~51^11，厶25%~35%;5~10111111，厶35%~50% ;10~ 25min，A 50% ;25 ~26min，A 50%~25% ;26 ~30min，A 25% ;
[0017] 流動(dòng)相流速：1. OmL ? min S
[0018] 檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm;
[0019] 柱溫：30°C ;
[0020] 進(jìn)樣量：10 yL。
[0021] 藥物制劑，含有治療有效量的所述祖司麻提取物和藥學(xué)上可接受的載體。
[0022] 所述的祖司麻提取物在制備降血脂的藥物中的應(yīng)用。
[0023] 所述的藥物制劑在制備降血脂的藥物中的應(yīng)用。
[0024] 本發(fā)明提取物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。
[0025] 所述藥物制劑含有治療有效量的本發(fā)明祖司麻提取物，其余為藥物學(xué)上可接受 的、對(duì)人和動(dòng)物無(wú)毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0026] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物制劑以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明提取物可 通過(guò)口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無(wú)菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0027] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明通過(guò)對(duì)祖司麻藥材進(jìn)行提取、除雜、富集處理，能得到降血 脂的提取物；本發(fā)明提供的液相分析方法可以用于建立該提取物的指紋圖譜，用于控制不 同產(chǎn)地、批次藥材制備的提取物的批間差異。
【附圖說(shuō)明】
[0028] 圖1為祖司麻提取物HPLC液相圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0029] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0030] 實(shí)施例1 :祖司麻提取物制備（85份祖司麻，15份黨參）
[0031] 藥材來(lái)源：祖司麻和黨參購(gòu)自安徽亳州中藥材市場(chǎng)。
[0032] 主要試劑：食品級(jí)乙醇購(gòu)自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；醫(yī)藥級(jí)AB-8大孔樹(shù)脂購(gòu) 自天津波鴻樹(shù)脂有限公司；甲醇為HPLC級(jí)，購(gòu)于TEDIA ;甲酸為HPLC級(jí)，購(gòu)于TEDIA ;色譜 用純凈水為哇哈哈純凈水。
[0033]將8. 5kg干燥的祖司麻和1.5kg干燥黨參混合粉碎，用75%乙醇熱回流提取 (25LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液^L);對(duì)濃縮液依次用石油醚（6LX3 次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔樹(shù)脂 (2kg，柱體積I. 5L)富集，先用20%乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65%乙醇洗脫9個(gè)柱 體積（15L)，收集65%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得祖司麻提取物浸膏粉約155g。
[0034] 實(shí)施例2 :祖司麻提取物②制備（80份祖司麻，20份黨參）
[0035] 制備方法：將8. Okg干燥的祖司麻和2. Okg干燥黨參混合粉碎，用75%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液（6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹(shù)脂（2kg，柱體積I. 5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9 個(gè)柱體積（15L)，收集65%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得祖司麻提取物浸膏粉約155g。
[0036] 實(shí)施例3 :祖司麻提取物③制備（90份祖司麻，10份黨參）
[0037] 制備方法：將9. Okg干燥的祖司麻和1.0 kg干燥黨參混合粉碎，用75%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液（6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹(shù)脂（2kg，柱體積I. 5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9 個(gè)柱體積（15L)，收集65%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得祖司麻提取物浸膏粉約155g。
[0038] 實(shí)施例4 :祖司麻提取物④制備（75份祖司麻，25份黨參）
[0039] 制備方法：將7. 5kg干燥的祖司麻和2. 5kg干燥黨參混合粉碎，用75%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液（6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹(shù)脂（2kg，柱體積I. 5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9 個(gè)柱體積（15L)，收集65%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得祖司麻提取物浸膏粉約155g。
[0040] 實(shí)施例5 :祖司麻提取物⑤制備（95份祖司麻，5份黨參）
[0041] 制備方法：將9. 5kg干燥的祖司麻和0. 5kg干燥黨參混合粉碎，用75%乙醇熱回 流提取（25LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液（6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹(shù)脂（2kg，柱體積I. 5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9 個(gè)柱體積（15L)，收集65%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得祖司麻提取物浸膏粉約155g。
[0042] 實(shí)施例6 :液相色譜分析
[0043] 供試品溶液配制：取實(shí)施例1方法制得的提取物浸膏粉5mg至50mL棕色容量瓶 中，加30mL 25 %甲醇水溶液超聲溶解，冷卻至室溫后，繼續(xù)加25 %甲醇水溶液定容。
[0044] 分析方法：
[0045] 高效液相色譜儀：Agilent 1100,二元栗；
[0046] 色譜柱：Agilent Zorbax Extent C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 y m);
[0047] 流動(dòng)相：A為甲醇，B為0.1%甲酸水溶液；
[0048] 梯度洗脫程序：0.01~51^11，厶25%~35%;5~10111111，厶35%~50% ;10~ 25min，A 50% ;25 ~26min，A 50%~25% ;26 ~30min，A 25% ;
[0049] 流動(dòng)相流速：1. OmL ? min S
[0050] 檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm;
[0051] 柱溫：30°C;
[0052] 進(jìn)樣量：10 yL。
[0053] 對(duì)用10批不同產(chǎn)地、批次祖司麻制備的提取物進(jìn)行分析，建立指紋圖譜進(jìn)行匹 配，結(jié)果1~10號(hào)峰在10批樣品色譜圖中均出現(xiàn)。因此標(biāo)定10個(gè)峰為共有指紋峰，據(jù)此 建立該提取物的HPLC指紋圖譜，結(jié)果見(jiàn)圖1。
[0054] 實(shí)施例7 :祖司麻提取物藥理試驗(yàn)
[0055] 一、材料
[0056] I. 1受試物與試劑：祖司麻提取物①~⑤分別按照實(shí)施例1~5制得，試驗(yàn)前制成 混懸液，用時(shí)