保護(hù)作用
[0038] 上述MTT測定結(jié)果提示，過氧化氫對VERO細(xì)胞的損傷率為（46. 80 ±8. 99) %。甘 露葡萄糖醛酸寡糖可以顯著改善過氧化氫損傷的細(xì)胞活力，具有腎上皮細(xì)胞保護(hù)作用，其 中Gl和G2作用最為顯著。
[0039] 實(shí)施例3 :甘露葡萄糖醛酸寡糖對慢性腎功能衰竭小鼠的治療作用
[0040] 1、慢性腎衰模型制作
[0041 ] 成年昆明種雄性小鼠，購進(jìn)后飼以普通飼料觀察一周，一般狀態(tài)良好后，隨機(jī)取出 10只作為正常對照組（生理鹽水10mL/kg)，其余60只動(dòng)物稱重后隨即分組，用300mg/Kg. d 腺嘌呤口服灌胃給藥每天一次，連續(xù)造模14天。造模結(jié)束后采血，每只大鼠采血2-3mL，采 血后于實(shí)驗(yàn)室放置2小時(shí)后，3000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘，取上清，檢測血液肌酐和尿素氮含 量，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取造模后動(dòng)物隨即分成6組，每組10只。
[0042] 2.模型動(dòng)物給藥飼養(yǎng)
[0043] 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物共7組，分別為：正常對照組（普通飼料，生理鹽水10mL/kg)，模型對照 組（普通飼料，生理鹽水10mL/kg)，陽性對照組（海昆腎喜膠囊150mg/Kg，灌胃給藥）組及 實(shí)施例1中制備的甘露葡萄糖醛酸寡糖G1-G4,四個(gè)寡糖給藥劑量均為10mg/Kg，常用腹腔 注射方式給藥，每天給藥一次，連續(xù)給藥15天。
[0044] 處死前留取血化驗(yàn)血漿總蛋白（TP)、白蛋白（A)、尿素氮（BUN)、肌肝（Scr)。
[0045] 3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0046] 表2各樣品對慢性腎衰小鼠血液指標(biāo)的測定
[0049] 與正常組相比有顯著性差異；，與正常組相比有極顯著性差異；
[0050] *:與模型組相比顯著性差異；:與模型組相比有極顯著性差異
[0051] 口服灌胃給藥腺嘌呤所致的慢性腎衰小鼠，與正常對照組比較，血清肌酐和尿素 氮水平均呈顯著性升高（p〈〇. 01)，白蛋白明顯下降（p〈〇. 05)。治療30天后，各寡糖腹腔注 射給藥組血清肌酐及尿素氮水平較模型對照組顯著降低（P〈〇. 01)，這種作用隨著寡糖聚 合度增加而增強(qiáng)，對血清總蛋白及白蛋白水平基本沒有影響（表2)。結(jié)果表明，甘露葡萄糖 醛酸寡糖顯示出對慢性腎衰良好的治療及腎臟保護(hù)作用。慢性腎衰是由于多種疾病引起的 腎功能緩慢的進(jìn)行性缺失。血清肌酐和尿素氮是疾病嚴(yán)重程度的兩個(gè)重要指標(biāo)。甘露葡萄 糖醛酸寡糖顯著降低血清肌酐和尿素氮水平，意味著甘露葡萄糖醛酸寡糖有可能成為一種 有前景的治療慢性腎衰的寡糖治療藥物。
[0052] 實(shí)施例4甘露葡萄糖醛酸寡糖對甘油所致大鼠急性腎衰模型的影響
[0053] 實(shí)驗(yàn)方法：
[0054] 取SD大鼠70只，雄性，體重200_220g，隨機(jī)分為7組分別為空白對照組、模型組 對照組、陽性對照組（0. lmg/kg醋酸地塞米松，灌胃給藥）、以及四個(gè)甘露葡萄糖醛酸寡糖 給藥組（l〇mg/kg，腹腔注射給藥）。連續(xù)給藥3d，每天給藥一次，上下午各一次，給藥量為 10ml/kg，于給藥第4天開始造模，造模前全部動(dòng)物禁水16h，除空白對照組外其余各組動(dòng)物 給予50%的甘油生理鹽水10ml/kg，于大鼠兩側(cè)后肢肌肉注射，空白對照組注射等量生理 鹽水。造模后再連續(xù)給藥3d，給藥結(jié)束后全部大鼠禁食，取血清分別檢測肌酐、尿素氮、總蛋 白、白蛋白，取抗凝血檢測紅細(xì)胞、血紅蛋白。
[0055] 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)用Jy=沒:，對各組間進(jìn)行Student's檢驗(yàn)，采用孫瑞元，陳志 揚(yáng)，鄭青山教授等主編的DAS軟件對上述結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，判定顯著性差異。
[0056] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0057] 結(jié)果顯示，在甘油引起的大鼠急性腎衰模型中，模型對照組和空白對照組比較，血 清肌酐、尿素氮顯著升高（P〈〇. 05)，血清白蛋白和總蛋白在一定程度上有所降低，紅細(xì)胞數(shù) 和血紅蛋白的含量沒用影響，模型與空白對照組比較沒有顯著性差異，說明通過本試驗(yàn)可 以建立大鼠急性腎衰模型。在甘油所致的大鼠急性腎衰模型中，沒有引起大鼠產(chǎn)生明顯的 血液學(xué)變化，對巖藻半乳聚糖硫酸酯各劑量組與模型組比較沒有顯著性差異（P>〇. 05)，說 明結(jié)果見表4。
[0058] 甘露葡萄糖醛酸寡糖G1-G4 10mg/kg的劑量連續(xù)腹腔注射給藥，能夠顯著緩解 動(dòng)物腎衰癥狀的發(fā)生，顯著降低血清肌酐和尿素氮水平，與模型對照組比較有顯著性差異 (P〈0. 05);表明甘露葡萄糖醛酸寡糖對急性腎衰具有良好的保護(hù)作用。但寡糖受試物給藥 過程中不會(huì)引起紅細(xì)胞和血紅蛋白的變化。寡糖作用與寡糖聚合度密切相關(guān)，其中G2和G3 兩個(gè)樣品作用尤為顯著。結(jié)果見表3。
[0059] 表3對甘油所致大鼠急性腎衰血液生化指標(biāo)的影響（η = 1〇)
[0061] 與模型對照組比較*Ρ〈0· 05, #Ρ〈0· 01
[0062] 與空白對照組比較ΔΡ〈〇· 05, Δ ΔΡ〈〇· 〇1(以下同）
[0063] 甘露葡糖醛酸寡糖及其衍生物具有顯著的腎臟保護(hù)作用，可以用于制備預(yù)防和治 療急性腎衰、慢性腎衰、糖尿病腎病、腎小球腎炎等腎臟疾病的藥物和保健品。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 甘露葡萄糖醛酸寡糖及衍生物在制備治療和/或預(yù)防腎病藥物或保健品中的應(yīng)用， 所述的甘露葡萄糖醛酸寡糖及衍生物的結(jié)構(gòu)式為下述一般式（I)或（II)中的一種或二種 以上；式中，R為H、Na或K中的一種或二種以上，n為0-8之間的整數(shù)式中，R為H、Na或K中的一種或二種以上，n為0-8之間的整數(shù) (II)。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于： 所述的甘露葡萄糖醛酸寡糖具有如下特征： (1) 組成糖：甘露糖和葡萄糖醛酸或其鹽； (2) 2-連接的甘露糖和4-連接的葡萄糖醛酸或其鹽交替連接。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述的腎病包括急性腎功能衰竭、慢性腎 功能衰竭、糖尿病腎病、腎病綜合征、腎小球腎炎中一種或二種以上。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述藥物為包含甘露葡萄糖醛酸寡糖以 及其它藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑的藥物組合物。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述藥物的劑型為注射劑、口服制劑或局 部給藥制劑。
【專利摘要】本發(fā)明涉及甘露葡萄糖醛酸寡糖及其衍生物在制備腎病藥物和保健品中的應(yīng)用。甘露葡糖醛酸寡糖及其衍生物具有顯著的腎臟保護(hù)作用，可以用于制備預(yù)防和治療急性腎衰、慢性腎衰、糖尿病腎病、腎小球腎炎等腎臟疾病的藥物和保健品。
【IPC分類】A61K31/736, A61P3/10, A61K31/7016, A61K31/702, A61P13/12, A23L1/09
【公開號】CN105125566
【申請?zhí)枴緾N201510648272
【發(fā)明人】張全斌, 金維華, 王晶, 耿麗華, 張文靜
【申請人】中國科學(xué)院海洋研究所
【公開日】2015年12月9日
【申請日】2015年10月9日