一種從茶葉籽油提取結(jié)合型酚類化合物的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及化合物提取方法，特別是涉及一種從茶葉籽油提取結(jié)合型酚類化合物的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]茶葉籽是山茶科山茶屬茶樹(shù)(Camellia sinensis O’Ktze)的種子，其油脂含量達(dá)30%左右，茶葉籽油被國(guó)家衛(wèi)生部批準(zhǔn)為新資源食品，富含天然酚類化合物，這些酚類化合物具有很強(qiáng)的抗氧化作用。研究茶葉籽油中酚類化合物可以為茶葉籽油精煉工藝的改進(jìn)和活性成分開(kāi)發(fā)提供科學(xué)的指導(dǎo)作用。
[0003]酚類化合物在茶葉籽油中以易溶解的游離型酚類化合物和與其他基質(zhì)緊密結(jié)合的結(jié)合型酚類化合物的形態(tài)存在，目前研究多集中在游離型酚類化合物，結(jié)合型由于不易溶解和提取，油脂相關(guān)研究極為有限，目前尚無(wú)高效可行的方法。研究表明植物中潛在大量結(jié)合型酚類化合物，若不考慮結(jié)合型酚類化合物不能客觀評(píng)價(jià)油脂品質(zhì)及作用機(jī)理。因而，尋求一種實(shí)用、高效的茶葉籽油中結(jié)合型酚類化合物的提取方法具有重要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明提供了一種茶葉籽油結(jié)合型酚類化合物的提取方法，其克服了現(xiàn)有技術(shù)所存在的不足之處。
[0005]本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是:一種從茶葉籽油提取結(jié)合型酚類化合物的方法包括以下步驟:
[0006]I)按Ig茶葉籽油:2?5mL正已烷的比例將兩者混合均勾，按Ig茶葉籽油:1.5?4mL 60%甲醇溶液的比例加入甲醇溶液并在黑暗中劇烈震蕩2?5min，靜置分層后，重復(fù)2?5次分離甲醇層以提取游離型酚類化合物，余下茶葉籽油與正已烷的混合液；
[0007]2)將上述茶葉籽油與正已烷的混合液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至只剩茶葉籽油，按料液比Ig:1?8mL加入濃度為0.1?0.5mol/L的氫氧化鈉溶液，于常溫下避光堿解6?40h，加入鹽酸將水解液調(diào)至中性；
[0008]3)將上述混合液在3000?5000r/min下離心5?15min以分離油相和水相，分離出的油相按Ig茶葉籽油:2?5mL正已烷的比例將兩者混合均勻，按Ig茶葉籽油:1.5?4mL 60%甲醇溶液的比例加入甲醇溶液并在黑暗中劇烈震蕩2?5min，靜置分層后，重復(fù)2?5次提取甲醇層，合并提取液并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得到所述結(jié)合型酚類化合物。
[0009]優(yōu)選的，所述氫氧化鈉溶液的濃度為0.15?0.3mol/Lo
[0010]優(yōu)選的，所述氫氧化鈉溶液的濃度為0.2mol/Lo
[0011]優(yōu)選的，所述堿解時(shí)間是18?30h。
[0012]優(yōu)選的，所述堿解時(shí)間是24h。
[0013]優(yōu)選的，所述茶葉籽油與氫氧化鈉溶液的體積比為1:3?1: 5。
[0014]優(yōu)選的，所述茶葉籽油與氫氧化鈉溶液的體積比為1:4。
[0015]優(yōu)選的，步驟3)中，所述茶葉籽油:正已烷:60%甲醇溶液的比例是lg:2.5?3.5mL: 2 ?3mL0
[0016]相較于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有以下有益效果:
[0017]本發(fā)明首先從茶葉籽油中提取游離型酚類化合物，然后通過(guò)堿降解的方法使茶葉籽油中結(jié)合型酚類化合物釋放出來(lái)再進(jìn)行提取，經(jīng)過(guò)福林酚法測(cè)定，其結(jié)合型酚類化合物的得率可以達(dá)到28mg/kg左右，提取得率高，反應(yīng)條件溫和，適于實(shí)際應(yīng)用，對(duì)后續(xù)茶葉籽油的研究及開(kāi)發(fā)利用提供了指導(dǎo)。
[0018]以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明；但本發(fā)明的一種從茶葉籽油提取結(jié)合型酚類化合物的方法不局限于實(shí)施例。
【具體實(shí)施方式】
[0019]實(shí)施例1
[0020]準(zhǔn)確稱取4.0g茶葉籽油，加入12mL正己燒，混合均勾，然后加入1mL 60%甲醇溶液在黑暗中劇烈震蕩3min，靜置分層后，取甲醇層，重復(fù)3次，合并提取液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用60%甲醇溶液定容至10ml。
[0021]將上述取游離型酚類化合物后的茶葉籽油與正己烷的混合物置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至只剩茶葉籽油。按料液比1:4向茶葉籽油中加入0.2mol/L的氧氧化鈉溶液，置于常溫下避光堿解24h，所得水解液用濃鹽酸調(diào)至中性。將茶葉籽油混合液在4000r/min下離心lOmin，分離油相與水相。分離出的茶葉籽油加入12mL正己烷，混合均勻，然后加入10mL60%甲醇溶液在黑暗中劇烈震蕩3min，靜置分層后，取甲醇層，重復(fù)3次，合并提取液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用60%甲醇溶液定容至5mL，采用福林酚法測(cè)定酚類化合物含量。
[0022]經(jīng)檢測(cè)，茶葉籽油結(jié)合型酚類化合物的得率為28.13mg/kgo
[0023]實(shí)施例2
[0024]準(zhǔn)確稱取4.0g茶葉籽油，加入12mL正己燒，混合均勾，然后加入1mL 60%甲醇溶液在黑暗中劇烈震蕩3min，靜置分層后，取甲醇層，重復(fù)3次，合并提取液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用60%甲醇溶液定容至10ml。
[0025]將上述取游離型酚類化合物后的茶葉籽油與正己烷的混合物置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至只剩茶葉籽油。按料液比1:3向茶葉籽油中加入0.15mol/L的氧氧化鈉溶液，置于常溫下避光堿解18h，所得水解液用濃鹽酸調(diào)至中性。將茶葉籽油混合液在4000r/min下離心lOmin，分離油相與水相。分離出的茶葉籽油加入12mL正己烷，混合均勻，然后加入10mL60%甲醇溶液在黑暗中劇烈震蕩3min，靜置分層后，取甲醇層，重復(fù)3次，合并提取液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用60%甲醇溶液定容至5mL，采用福林酚法測(cè)定酚類化合物含量。
[0026]經(jīng)檢測(cè)，茶葉籽油結(jié)合型酚類化合物的得率為19mg/kg。
[0027]實(shí)施例3
[0028]準(zhǔn)確稱取4.0g茶葉籽油，加入12mL正己燒，混合均勾，然后加入1mL 60%甲醇溶液在黑暗中劇烈震蕩3min，靜置分層后，取甲醇層，重復(fù)3次，合并提取液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用60%甲醇溶液定容至10ml。
[0029]將上述取游離型酚類化合物后的茶葉籽油與正己烷的混合物置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至只剩茶葉籽油。按料液比1:5向茶葉籽油中加入0.2mol/L的氧氧化鈉溶液，置于常溫下避光堿解24h，所得水解液用濃鹽酸調(diào)至中性。將茶葉籽油混合液在4000r/min下離心lOmin，分離油相與水相。分離出的茶葉籽油加入12mL正己烷，混合均勻，然后加入10mL60%甲醇溶液在黑暗中劇烈震蕩3min，靜置分