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      包含山蒼粳的油作為有效成分的炎癥性疾病預(yù)防及治療用組合物及其制備方法_2

      文檔序號:9456799閱讀:來源:國知局
      為食品添加物的情況下, 可直接添加上述山蒼粳果實(種子除外)或種子的油,或使用其分餾物,或與其他食品或食 品成分一同使用,且可根據(jù)通常的方法適當(dāng)?shù)厥褂谩?br>[0037] 可添加上述物質(zhì)的食品的例有包含肉類、香腸、面包、巧克力、糖果類、快餐類、餅 干類、比薩、拉面、其他面類、泡泡糖類、冰淇淋類的乳品、各種湯、飲料、茶、清涼劑、酒精飲 料及維生素復(fù)合劑等,食品的種類沒有特別限制,包含所有通常意義上的保健食品。
      [0038] 以下,提出優(yōu)選實施例,以便理解本發(fā)明。但是,以下實施例僅用于容易理解本發(fā) 明,本發(fā)明的內(nèi)容不限定于實施例。
      [0039] 實施例1:山芥輝果實(種子除外)油的制備
      [0040] 在500g的冷凍干燥的山蒼粳(Litsea japonica)果實(除種子之外的部分)中 添加5000ml的正己烷(n-hexane),并在常溫(20°C )條件下攪拌24小時來進(jìn)行提取之后, 去除己烷來獲取了 95g的山蒼粳果實(種子除外)的油。
      [0041 ] 實施例2:山蒼粳果實的種子部分的油的制備
      [0042] 在500g的冷凍干燥的山蒼粳(Litsea japonica)種子中添加5000ml的正己燒 (n-hexane),并在常溫(20°C)條件下攪拌24小時來進(jìn)行提取之后,去除己烷來獲取了 46g 的山蒼粳種子的油。
      [0043] 實驗例1:山芥輝果實(種子除外)油的成分分析
      [0044] 進(jìn)行了根據(jù)上述實施例1得到的山蒼粳果實(種子除外)油的成分分析實驗。
      [0045] 實驗方法:設(shè)備使用了島津(Shimadzu)公司的QP2010Plus,柱(Column)使用了 RTX-5(30mX(X 25_,(λ 25 μπι),有關(guān)其他條件,在注射(Injection)溫度為250°C、檢測器 (Detector)溫度為 250 °C、質(zhì)量范圍(Mass range)為(m/z)30-400、注射量(Injection volume)為1 μ L的條件下進(jìn)行了分析。
      [0046] 實驗結(jié)果:分析根據(jù)上述實施例1得到的山蒼粳果實(種子除外)油,來得到了 如圖4和下列表1所示的結(jié)果,這種油包含β -蓽澄前油?。˙eta-cubebene) (22. 96% )、 β-序子?。˙eta-selinene) (11.23% )、γ-欖香?。℅amma-Elemene) (10.21% )、β-石 竹?。˙eta-Caryophyllene) (7· 37% ) 〇
      [0047] 下列表1為根據(jù)實施例1得到的山蒼粳果實油的分析表。
      [0050] 實驗例2:本發(fā)明的山芥輝果實或種子油的抗炎癥效果
      [0051] 測定⑴:IL-10生成抑制效果
      [0052] 為了確認(rèn)根據(jù)上述實施例1和實施例2得到的山蒼粳果實(種子除外)油和種子 油的抗炎癥效果,進(jìn)行了測定IL-I β生成抑制效果的實驗。
      [0053] 實驗方法:為了評價IL-Ιβ生成抑制能力,在刺激作為小鼠巨噬細(xì)胞株的Raw 264. 7cell (I X IO6CelVmL)之前,分別對山蒼粳果實油和種子油試樣預(yù)處理1小時后,利用 脂多糖(LPS) (1 μ g/mL)刺激,接著,經(jīng)過24小時后,在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中通過酶聯(lián)免疫吸 附測定(ELISA)法來進(jìn)行了定量,酶聯(lián)免疫吸附測定通過在美國欣博盛生物科技有限公司 (eBioscience,USA)購買 Mouse ELISA set (IL-Ιβ)來進(jìn)行。
      [0054] 實驗結(jié)果:在圖2和表2中表示了根據(jù)本發(fā)明的實施例1和實施例2得到的山蒼粳 果實油和種子油的IL-6生成能力的測定結(jié)果。其結(jié)果表示,山蒼粳果實油試樣中,IL-I β 生成能力抑制優(yōu)秀于種子的油試樣,濃度依賴性地抑制IL-6生成能力。在濃度為25ug/mL 的條件下,果實精油試樣呈現(xiàn)96%抑制能力,種子精油試樣呈現(xiàn)82%抑制能力,即呈現(xiàn)了 優(yōu)秀的功效。
      [0055] 下列表2為基于根據(jù)上述實施例1和實施例2得到的山蒼粳果實油和種子油的 IL-I β生成能力測定的抗炎癥效果表。
      [0056] 表 2
      [0057]
      [0058] 實驗例3:本發(fā)明的山芥輝果實或種子油的抗炎癥效果
      [0059] 測定⑵:N0生成抑制能力評價
      [0060] 為了確認(rèn)根據(jù)上述實施例1和實施例2得到的山蒼粳果實(種子除外)油和種子 油的抗炎癥效果,進(jìn)行了評價NO生成抑制能力的實驗。
      [0061 ] 實驗方法:為了測定NO生成抑制能力,在刺激作為小鼠巨噬細(xì)胞株的Raw 264. 7cell (I X IO6CelVmL)之前,分別對山蒼粳果實油和種子油預(yù)處理1小時后,利用脂多 糖(1 μ g/mL)刺激,接著,經(jīng)過24小時后,有關(guān)存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液的一氧化氮(Nitric oixde)的濃度,在540nm條件下,使用NO檢測試劑盒(detection kit)(韓國內(nèi)含生物技術(shù) (Intron biotechnology,Korea))來測定了吸光度。
      [0062] 實驗結(jié)果:在圖2和表3中表示了根據(jù)上述實施例1和實施例2得到的山蒼粳果 實油和山蒼粳種子油的NO生成抑制能力的評價結(jié)果。其結(jié)果表明,山蒼粳果實油和種子油 均濃度依賴性地抑制NO生成能力。
      [0063] 在濃度為25ug/mL的條件下,山蒼粳果實精油試樣呈現(xiàn)91 %抑制能力,山蒼粳種 子精油試樣呈74%抑制能力,即呈現(xiàn)了優(yōu)秀的效果。
      [0064] 下列表3為根據(jù)上述實施例1和實施例2得到的山蒼粳果實油和種子油的NO生 成抑制能力測定表。
      [0068] 實驗例4:本發(fā)明的山芥輝果實或種子油的抗炎癥效果
      [0069] 測定⑶:TNF_a生成抑制能力評價
      [0070] 為了確認(rèn)根據(jù)上述實施例1和實施例2得到的山蒼粳果實(種子除外)油和種子 油的抗炎癥效果,進(jìn)行了評價TNF- a生成抑制能力的實驗。
      [0071] 實驗方法:為了評價TNF-Ct分泌抑制能力,在刺激作為小鼠巨噬細(xì)胞株的Raw 264. 7cell (I X IO6CelVmL)之前,分別對山蒼粳果實油和種子油試樣預(yù)處理1小時后,利 用脂多糖(1 μ g/mL)刺激,接著,經(jīng)過24小時后,在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中通過酶聯(lián)免疫吸附 測定法來進(jìn)行了定量,酶聯(lián)免疫吸附測定通過在美國欣博盛生物科技有限公司購買Mouse ELISA set (TNF-α)來進(jìn)行。
      [0072] 實驗結(jié)果:在圖3和表4中表示了根據(jù)上述實施例1和實施例2得到的山蒼粳果 實油和種子油的TNF-α生成抑制能力的評價結(jié)果。其結(jié)果表明,山蒼粳果實油試樣和種子 油試樣均濃度依賴性地抑制TNF-α生成能力。在濃度為25ug/mL的條件下,山蒼粳果實油 試樣呈現(xiàn)37%抑制能力,山蒼粳種子油試樣呈現(xiàn)29%抑制能力,即呈現(xiàn)了優(yōu)秀的功效。
      [0073] 下列表4為根據(jù)上述實施例1和實施例2得到的山蒼粳果實油和種子油的TNF- α 生成抑制能力測定表。
      [0076] 產(chǎn)業(yè)上的可利用性
      [0077] 本發(fā)明的叢山蒼粳的果實(種子除外)和種子提取的油的炎癥性疾病的預(yù)防及治 療效果優(yōu)秀。
      [0078] 因此,本發(fā)明的山蒼粳果實油和種子油可有用地使用于炎癥性疾病的預(yù)防及治 療。
      【主權(quán)項】
      1. 一種炎癥性疾病預(yù)防及治療用組合物,其特征在于,包含從山蒼粳提取的油作為有 效成分。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的炎癥性疾病預(yù)防及治療用組合物,其特征在于,上述山蒼粳 的油從山蒼粳的作為除種子之外的部分的果實或種子或包含種子的果實中的一種獲得。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的炎癥性疾病預(yù)防及治療用組合物,其特征在于, 上述山蒼粳的油為從山蒼粳的作為除種子之外的部分的果實獲得的果實油和從山蒼 粳的種子獲得的種子油, 單獨或混合使用上述果實油和種子油。4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的炎癥性疾病預(yù)防及治療用組合物,其特征在于, 上述山蒼粳的油通過將正己烷用作溶劑的提取法、超臨界提取法、蒸餾法、壓榨法中的一種 方法獲得。5. -種炎癥性疾病預(yù)防及改善用山蒼粳的油的制備方法,其特征在于,針對山蒼粳的 果實,投入重量為9~11倍數(shù)的作為溶劑的正己烷,在常溫條件下攪拌24小時后進(jìn)行提 取,并去除己烷層來獲得山蒼粳的油。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的炎癥性疾病預(yù)防及改善用山蒼粳的油的制備方法,其特征在 于,上述山蒼粳的果實分離為作為除種子之外的部分的果實和種子后,分別利用分離的作 為除種子之外的部分的果實和種子制備油。
      【專利摘要】本發(fā)明涉及利用山蒼粳的炎癥性疾病用組合物,詳細(xì)地涉及包含從山蒼粳的果實或種子獲得的油作為有效成分的炎癥性疾病的預(yù)防及治療用組合物及其制備方法。這種本發(fā)明使用山蒼粳的果實(種子除外)或種子,利用正己烷(n-hexane)來獲得用作炎癥性疾病的預(yù)防及治療用組合物的有效成分的油,且區(qū)分為山蒼粳的果實(種子除外)和種子,針對上述果實(種子除外)或種子,投入重量為9~11倍數(shù)的作為溶劑的正己烷(n-hexane),在常溫條件下攪拌24小時后進(jìn)行提取,并去除己烷(hexane)層來獲得山蒼粳的油。
      【IPC分類】A61P29/00, A61K36/54
      【公開號】CN105209052
      【申請?zhí)枴緾N201480025678
      【發(fā)明人】曹柱鉉, 樸仁在, 鄭龍煥, 崔九熙, 尹源鐘, 樸成桓, 申丞喜, 尹支炫, 白順玉
      【申請人】合侖有限公司, 杰就技術(shù)公園
      【公開日】2015年12月30日
      【申請日】2014年4月30日
      【公告號】US20160095891, WO2014182004A1
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