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      羥基酪醇在制備抗血管性癡呆的藥物中的應用_3

      文檔序號:9460763閱讀:來源:國知局
      0. 05)。徑基酪醇低、中劑量 組與模型組相比較A化E活性均顯著性降低(P< 0. 05),Ve組與模型組相比較也顯著性降 低(P< 0. 05),化拉西坦片組與模型組相比較也顯著降低(P< 0. 01)。
      [00財 2. 5徑基酪醇對小鼠血清中一氧化氮(NO)含量的影響:
      [0086] 取血清50y1,按NO測定試劑盒說明書的具體操作步驟和計算公式要求進行,用 酶標儀在530皿處讀數,測定血清中NO含量。血清中NO含量(ymol/L)=(測定管吸光 度-空白管吸光度)/(標準管吸光度-空白管吸光度)X標準品濃度X稀釋倍數。用 SPASS16. 0軟件進行t檢驗統(tǒng)計學處理。
      [0087] 結果,模型組NO含量顯著性高于空白對照組任<0.05)。徑基酪醇低、中、高劑 量組與模型組相比較NO含量均顯著性降低(P< 0. 01),Ve組和化拉西坦片組與模型組相 比較也顯著性降低(P< 0. 01)。各給藥組與空白對照組相比較也顯著降低(P< 0. 05或P < 0. 01)。
      [008引 2. 6徑基酪醇對小鼠血清中一氧化氮合酶(NO巧活性的影響:
      [0089] 取血清30y1,按N0S測定試劑盒說明書的具體操作步驟和計算公式要求進行,用 酶標儀在530nm處讀數,測定血清中N0S活性。血清中N0S活力扣/ml)=(測定管吸光 度-對照管吸光度)/(呈色物納摩爾消光系數)X反應液總體積/取樣量X1/比色光徑X 反應時間今1000。用SPASS16. 0軟件進行t檢驗統(tǒng)計學處理。
      [0090] 結果,模型組N0S活性顯著性高于空白對照組(P< 0. 01)。徑基酪醇低、中、高劑 量組與模型組相比較N0S活性均顯著性降低(P< 0. 05或P< 0. 01),Ve組和化拉西坦片 組與模型組相比較也顯著性降低(P< 0.01)。徑基酪醇高劑量組、Ve組和化拉西坦片組與 空白對照組相比較也顯著降低(P< 0. 01)。
      [00川 2. 7徑基酪醇對小鼠血清中總抗氧化能力(T-A0C)的影響:
      [0092] 取血清20y1,按T-A0C測定試劑盒說明書的具體操作步驟和計算公式要求進行, 用酶標儀在520nm處讀數,測定血清中T-A0C。血清中T-A0C扣/ml)=(測定管吸光度-對 照管吸光度)/〇. 01/30X反應總體積/取樣量X樣本測試前稀釋倍數。用SPASS16. 0軟 件進行t檢驗統(tǒng)計學處理。
      [0093] 結果,模型組T-A0C顯著性低于空白對照組(P< 0.05)。徑基酪醇高劑量組、Ve組 和化拉西坦片組與模型組相比較T-AOC均顯著升高(P< 0. 01)。
      [0094] 2. 8徑基酪醇對小鼠血清中丙二醒(MDA)含量的影響:
      [0095] 取血清20y1,按MDA測定試劑盒說明書的具體操作步驟和計算公式要求進行,用 酶標儀在532nm處讀數,測定血清中MDA含量。
      [0096]
      [0097] 用SPASS16. 0軟件進行t檢驗統(tǒng)計學處理。
      [0098] 結果,與空白對照組比較,衰老模型小鼠血清中MDA含量明顯升高(P< 0. 05)。與 模型組比較,各徑基酪醇給藥組、Ve組和化拉西坦片組可明顯降低MDA含量(P< 0. 05或P < 0. 01)。
      [0099] 2. 9徑基酪醇對小鼠腦組織中膽堿乙酷基轉移酶(CMT)活性的影響:
      [0100] 取10%腦組織勻漿液30y1,按ChAT測定試劑盒說明書的具體操作步驟和計算 公式要求進行,用酶標儀在324nm處讀數,測定腦組織中ChAT含量。組織中ChAT活力 扣/m甜rot)=(測定管吸光度-空白對照管吸光度)/反應時間X反應總體積/取樣 量X1/10%腦勻漿的濃度。用SPASS16. 0軟件進行t檢驗統(tǒng)計學處理。
      [0101] 結果,與空白對照組相比較,模型組小鼠腦組織ChAT活性降低(P< 0. 05)。與模 型組相比較,徑基酪醇低、中、高劑量組無統(tǒng)計學差異(P> 0. 05),而Ve組和化拉西坦片組 CMT活性明顯升高(P< 0. 05)。
      [0102] 2. 10徑基酪醇對小鼠腦組織中一氧化氮(NO)含量的影響:
      [0103] 取10 %腦組織勻漿90y1,按NO測定試劑盒說明書的具體操作步驟和計算公式 要求進行,用酶標儀在530nm處讀數,測定腦組織中NO含量。腦組織中NO含量(ymol/ mgprot)=(測定管吸光度-空白管吸光度)/(標準管吸光度-空白管吸光度)X標準品 濃度X稀釋倍數-待測樣本濃度。用SPASS16. 0軟件進行t檢驗統(tǒng)計學處理。
      [0104] 結果,模型組NO含量顯著性高于空白對照組(P< 0. 05)。徑基酪醇中、高劑量組 與模型組相比較NO含量均顯著性降低(P< 0. 05或P< 0. 01),Ve組和化拉西坦片組與模 型組相比較也顯著性降低(P< 0. 01)。徑基酪醇高劑量組和化拉西坦片組與空白對照組相 比較也顯著降低(P< 0.01)。
      [0105] 2. 11徑基酪醇對小鼠腦組織中一氧化氮合酶(NO巧活性的影響:
      [0106] 取10%腦組織勻漿100yl,按N0S測定試劑盒說明書的具體操作步驟和計算公 式要求進行,用酶標儀在530皿處讀數,測定腦組織中N0S活性。腦組織中N0S活力扣/ mgprot)=(測定管吸光度-對照管吸光度)/(呈色物納摩爾消光系數)X反應液總體積 /取樣量X1/比色光徑X反應時間今待測樣本蛋白濃度(m甜rot/L)。用SPASS16. 0軟 件進行t檢驗統(tǒng)計學處理。
      [0107] 結果,模型組N0S活性顯著性高于空白對照組(P< 0. 01)。徑基酪醇4低、高劑量 組與模型組相比較N0S活性顯著性降低(P< 0. 05),Ve組和化拉西坦片組與模型組相比較 也顯著性降低(P< 0. 01)。徑基酪醇中劑量組與模型組相比較無統(tǒng)計學差異(P> 0. 05)。
      [0108] 2. 12徑基酪醇對小鼠腦組織中總抗氧化能力(T-A0C)的影響:
      [0109] 取10 %腦組織勻漿20y1,按T-A0C測定試劑盒說明書的具體操作步驟和計算公 式要求進行,用酶標儀在520皿處讀數,測定腦組織中T-AOC。腦組織中T-AOC扣/m甜rot) =(測定管吸光度-對照管吸光度)/0.01/30X反應總體積/取樣量/勻漿液蛋白濃度 (m甜rot/ml)。用SPASS16. 0軟件進行t檢驗統(tǒng)計學處理。
      [0110] 結果,模型組T-A0C顯著性低于空白對照組任<0.01)。徑基酪醇低、中、高劑量 組與模型組相比較T-A0C均顯著升高(P< 0. 05或P< 0. 01),Ve組和化拉西坦片組也均 顯著升高,但徑基酪醇低、中、高劑量組和化拉西坦片組T-A0C活性明顯低于空白對照組(P < 0. 05 或P< 0. 01)。
      [0111] 2. 13徑基酪醇對小鼠腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響:
      [0112] 取0. 15 %腦組織勻漿液20^1,按T-S0D測定試劑盒說明書的具體操作 步驟和計算公式要求進行,用酶標儀在450nm處讀數,測定腦組織中T-S0D含量。 =(A對照-A對照空白)-(A測定-A測定空白)X10日 組織中T-S弧誦率(%) -(A對照-A對照空白)-
      [0113] SOD活力扣/m甜rot) =SOD抑制率今50 %X反應體系稀釋倍數(0. 24ml/0. 02ml) 今待測樣本蛋白濃度(m甜rot/ml)。用SPASS16. 0軟件進行t檢驗統(tǒng)計學處理。
      [0114] 結果,與空白對照組比較,模型小鼠腦組織SOD活性明顯下降任<0.01)。與模型 組相比較,徑基酪醇低、中劑量組明顯提高SOD活性(P< 0. 01),Ve組和化拉西坦片組也均 顯著提高SOD活性(P< 0. 05或P< 0. 01)。
      [0115] 2. 14徑基酪醇對小鼠腦組織中丙二醒(MDA)含量的影響:
      [0116] 取10%腦組織勻漿液100y1,按MDA測定試劑盒說明書的具體操作步驟和計算公 式要求進行,用紫外分光光度計在532nm處比色,測定腦組織中MDA含量。組織中MDA含量 (nmol/mgprot)=(測定管吸光度-測定空白管吸光度)/(標準管吸光度-標準空白管吸 光度)X標準品濃度(10皿1〇/1111) 待測樣本蛋白濃度(111甜1'〇1:/1]11)。用SPASS16. 0軟件 進行t檢驗統(tǒng)計學處理。
      [0117] 結果,與空白對照組比較,模型小鼠腦組織中MDA含量明顯升高任<0.01)。與模 型組比較,徑基酪醇低、中、高劑量給藥組可明顯降低MDA含量任<0.01),Ve組和化拉西 坦片組也均顯著降低MDA含量(P< 0. 01),但徑基酪醇中、高劑量組MDA含量明顯高于空白 對照組(P< 0. 05)。
      [0118] 2. 15徑基酪醇對APP、PS-1蛋白表達影響:
      [0119] 應用west-bolt方法檢測各組小鼠腦組織APP和PS-1蛋白表達水平。結果,與正 常對照組相比較,模型組小鼠腦內APP和PS-1蛋白表達水平顯著增加任<0.01)。與模型 組相比較,徑基酪
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