Phf20和jmjd3組合物及其在腫瘤免疫治療中的使用方法
【專利說明】PHF20和JMJD3組合物及其在腫瘤免疫治療中的使用方法
[0001] 優(yōu)先權(quán)信息
[0002] 本申請(qǐng)要求申請(qǐng)日為2013年2月26日、專利申請(qǐng)序列號(hào)為61/769, 545的審查中 的美國專利申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)，該專利申請(qǐng)內(nèi)容通過參考并入本申請(qǐng)中。
[0003] 相關(guān)技術(shù)描述
[0004] 人及小鼠的體細(xì)胞均可通過四個(gè)關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子：0ct4,Sox2,Klf4和c-Myc(Okita etal. , 2007；Takahashietal. , 2007b；TakahashiandYamanaka, 2006；Yuetal. , 2007) 被重編程為類似于多能胚胎干細(xì)胞（ESC)的狀態(tài)，從而產(chǎn)生誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSCs)。基 于iPSCs與ESCs在基因表達(dá)譜、表觀遺傳/基因標(biāo)記以及自我更新和分化成多種細(xì)胞的能 力方面的相似性，它在人類疾病模型的建立，藥物篩選，甚至治療應(yīng)用方面擁有巨大的潛能 (PlathandLowry, 2011;RobintonandDaley, 2012)。
[0005] 盡管采用以下幾種方法均可以實(shí)現(xiàn)體細(xì)胞的重編程，包括誘導(dǎo)四個(gè)轉(zhuǎn)錄因子 的表達(dá)，蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)以及小RNA(miRNA)表達(dá)（RobintonandDaley，2012;Stadtfeldand Hochedlinger，2010)，不管是依賴或不依賴小分子化合物，其效率及iPSC產(chǎn)生的動(dòng)力仍不 理想。這表明，在重編程過程有大量的遺傳和表觀遺傳的的障礙存在（Hannaetal.，2009 ; Smithetal. , 2010)〇
[0006] 許多因素，包括細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期，間充質(zhì)細(xì)胞到上皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)化以及表觀 遺傳對(duì)組蛋白修飾和DNA甲基化的調(diào)節(jié)均可影響重編程效率（PappandPlath, 2011; StadtfeldandHochedlinger，2010)。瞬時(shí)強(qiáng)迫細(xì)胞表達(dá)重編程因子會(huì)產(chǎn)生可分離的 事件，開始是間質(zhì)細(xì)胞到上皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)化引起的體細(xì)胞標(biāo)記物YHYI的丟失，接著激活 胚胎標(biāo)記物，例如堿性磷酸酶（AP)以及胚胎抗原l(SSEAl)(Lietal.，2010;Plathand Lowry, 2011)。誘導(dǎo)和維持內(nèi)源性多能基因，例如Nanog和0ct4,需要在DNA甲基化和組蛋 白修飾方面進(jìn)一步進(jìn)行表觀遺傳修飾（StadtfeldandHochedlinger, 2010)。如果不能及 時(shí)達(dá)到這些表觀遺傳的變化，可能會(huì)導(dǎo)致部分重編程誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。
[0007] 在重編程過程中，全面分析常染色質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化可以揭示在組蛋白修飾水平精細(xì) 的表觀遺傳的改變（Gaspar-Maiaetal.，011;Hembergeretal.，2009;Hochedlinger andPlath，2009;Kocheetal.，2011)。異位表達(dá)染色質(zhì)重塑蛋白，例如Brg-1和Brfl55可 以增強(qiáng)四個(gè)因子介導(dǎo)的重編程效率（Gaspar-Maiaetal.，2009;Singhaletal.，2010)。 ESCs和iPSCs都含有"二價(jià)結(jié)合域"，在這一區(qū)域核體標(biāo)記為組氨酸3-賴氨酸27和組氨酸 3-賴氨酸 4 三甲基化（H3K27me3 和H3K4me3) (Gaspar-Mafiaetal.，2011;Hochedlinger andPlath, 2009)。而PcG復(fù)合體介導(dǎo)H3K27甲基化并且抑制基因阻遏（Caoetal.，2002 ; ]\^找1161'〇11&11(11?;[油6找，2011)，加」(13和1^1介導(dǎo)1131(27去甲基化（488616七&1.，2007; Hongetal.，2007;Jepsenetal.，2007 ;Kouzarides, 2007;Lanetal.，2007)。因此，根 據(jù)表觀遺傳因素在決定細(xì)胞譜系方面的重要性，可以合理推測(cè)在體細(xì)胞重編程過程中，一 些因子是體細(xì)胞重編程高效進(jìn)行所必須的，而另外一些因子可能起負(fù)調(diào)控作用。如果要除 去這些重編程過程中路障，需要增加了解這些表觀遺傳分子的作用機(jī)制，即哪一種表觀遺 傳因子控制細(xì)胞系從而影響重編程的動(dòng)態(tài)過程。 發(fā)明概要
[0008]Jmjd3被鑒定為是重編程過程中的重要負(fù)調(diào)控分子。Jmjd3缺陷的小鼠胚胎成纖 維細(xì)胞（MEFs)與野生型相比明顯會(huì)產(chǎn)生更多的iPSC克隆，而Jmjd3異位表達(dá)可以顯著抑 制重編程。Jmjd3的抑制作用通過組氨酸脫甲基酶依賴性及非依賴性兩種途徑實(shí)現(xiàn)，而后 者是完全新穎的并包括Jmjd3靶向PHF20并通過招募E3連接酶Trim26而進(jìn)行泛素化和降 解。PHF20缺陷的MEFs即便在Jmjd3,Ink4a或p21敲低的條件下也不能轉(zhuǎn)換為完全重編程 的iPSCs，說明PHF20這一蛋白在重編程過程中起主導(dǎo)作用。因此，本發(fā)明提供了誘導(dǎo)多能 干細(xì)胞形成的方法，包括在細(xì)胞中抑制或阻止Jmjd3基因的表達(dá)及抑制JMJD3蛋白的活性， 例如通過在細(xì)胞培養(yǎng)中添加JMJD3的拮抗劑。
[0009] 還發(fā)現(xiàn)PHF20在超過90%的乳腺癌組織中過表達(dá)，可作為一個(gè)新的乳腺癌抗原， 在介導(dǎo)強(qiáng)的抗腫瘤免疫反應(yīng)中起重要作用。因此提供了靶向PHF20的乳腺癌免疫療法。一 個(gè)實(shí)施方案中，提供了聯(lián)合免疫療法，該聯(lián)合免疫療法產(chǎn)生PHF20抗原特異性免疫反應(yīng)，同 時(shí)抑制乳腺癌腫瘤生長。另一個(gè)實(shí)施方案中，給予有需求的患者負(fù)載有納米脂質(zhì)體的樹突 狀細(xì)胞（DC)與具有抗-PD-1 (程序性死亡-1)閉鎖的siRNAs或抗人H)1 (抗-PD1)抗體聯(lián) 合應(yīng)用，所述納米脂質(zhì)體含有PHF20肽，其中PHF20/DC免疫接種增強(qiáng)抗原特異性T細(xì)胞的 前體，而抗-PD-1閉鎖增加抗原特異性T細(xì)胞反應(yīng)，（從而）抑制腫瘤生長并降低非特異性 免疫反應(yīng)或副作用。
[0010] 另一個(gè)實(shí)施方案中，可以用包含抗PHF20抗體的合適制備物靶向腫瘤特異的 PHF20,所述抗PHF20抗體優(yōu)選人源化、或人、單克隆抗體。
[0011] 本發(fā)明還提供了藥物組合物，包括PHF20肽及藥學(xué)上可接受的賦形劑，PHF20肽來 源于PHF20蛋白，是細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL)的表位。PHF20肽，優(yōu)選人的PHF20肽，可 以激活T細(xì)胞，從而使T細(xì)胞能夠識(shí)別負(fù)載有PHF20肽的T2細(xì)胞或PHF20陽性的乳腺癌細(xì) 胞。
[0012] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種疫苗或藥物組合物，所述疫苗或藥物組合 物包含PHF20肽、編碼PHF20肽的核酸分子、或包含編碼PHF20肽的核酸分子的表達(dá)載體。
[0013] 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了PHF20肽特異性的分離的T細(xì)胞，優(yōu)選CTL，或 者用PHF20肽刺激外周血單核細(xì)胞（PBMCs)產(chǎn)生的分離的T細(xì)胞。
[0014] 本發(fā)明還提供了治療乳腺癌的方法，包括以下步驟（a)從對(duì)象分離細(xì)胞群，該細(xì) 胞群包含或能夠產(chǎn)生CTLs和/或TH細(xì)胞；(b)用PHF20肽處理所述細(xì)胞群，任選與增生劑 聯(lián)用；（c)篩選所述細(xì)胞群中對(duì)PHF20肽特異的CTLs或TH細(xì)胞或它們的混合；以及（d)給 予癌癥患者所述細(xì)胞群。
[0015] 或者，上述方法可包括：（a)從對(duì)象分離細(xì)胞群，這個(gè)群體包含或能夠產(chǎn)生CTLs、Th 細(xì)胞或它們的混合；(b)用PHF20肽處理所述細(xì)胞群，任選與增生劑聯(lián)用；（c)篩選所述細(xì) 胞群中對(duì)PHF20特異的CTLs、TH細(xì)胞或它們的混合；⑷從篩選的CTLs、T"細(xì)胞或它們的混 合中克隆對(duì)本文描述的PHF20肽特異的T細(xì)胞受體（TCR)基因；（e)將在（c)克隆出的TCR 基因轉(zhuǎn)導(dǎo)入：i.患者細(xì)胞；或ii.供體細(xì)胞；或iii真核或原核細(xì)胞以產(chǎn)生mTCRs用于乳腺 癌患者治療。
[0016] 附圖簡要說明
[0017] 圖1顯示的是Jmjd3以及其它幾個(gè)主要調(diào)節(jié)重編程的表觀遺傳因子的鑒定。異 位表達(dá)Jmjd3可以抑制重編程。圖1H和圖II中的數(shù)據(jù)顯示的是三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值+ 標(biāo)準(zhǔn)偏差。星號(hào)代表與對(duì)照有顯著性差異（*P〈〇. 05, #p〈0. 01*#p〈0.001byStudent'st test)〇
[0018] 圖2顯示Jmjd3切除增加了重編程的效率和動(dòng)力學(xué)。圖2B和2C中的數(shù) 據(jù)顯示的是三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值+標(biāo)準(zhǔn)偏差。星號(hào)代表組與組之間有顯著差異 (*p〈0. 05, **p〈0.OlbyStudent'sttest)。
[0019] 圖3顯示的是鑒定參與增強(qiáng)重編程的Jmjd3的靶基因。圖3B、3D、3E、3F中 的數(shù)據(jù)是三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值土標(biāo)準(zhǔn)偏差。星號(hào)代表組與組之間有顯著差異 (*p〈0.05, **p〈0. 01***p〈0.OOlbyStudent'sttest)。
[0020] 圖4顯示的是PHF20對(duì)iPSCs的維持和重編程有關(guān)鍵作用。圖4D、4F、4H、4I、4J、 4K和4L中使用的數(shù)據(jù)是三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值土標(biāo)準(zhǔn)偏差。星號(hào)代表組與組之間有顯著 差異（*p〈0. 05, **p〈0.OlbyStudent'sttest)。
[0021] 圖5顯示的是Jmjd3與PHF20相互作用并引起PHF20的降解。
[0022] 圖6顯示的是Jmjd3靶向PHF20,通過招募E3泛素連接酶Trim26泛素化PHF20。
[0023] 圖7顯示的是PHF20在重編程過程中通過與Wdr5相互作用是0ct4表達(dá)所必要的。 圖7A、7C-7E、7I和7J中使用的數(shù)據(jù)是三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值土標(biāo)準(zhǔn)偏差。星號(hào)代表組與 組之間有顯著差異（*p〈〇. 05, **p〈0.OlbyStudent'sttest)。
[0024] 圖8顯示的是PHF20在乳腺癌中高表達(dá)。圖8A顯示PHF20mRNA在乳腺癌中的表 達(dá)通過實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)定。圖8B用蛋白免疫印跡的方法分析PHF20在乳腺癌細(xì)胞和正常 細(xì)胞系的表達(dá)情況。MCF-10A是一個(gè)正常乳腺細(xì)胞系。
[0025] 圖9顯示的是PHF20特異的T細(xì)胞的產(chǎn)生及表征。（圖9A)PHF2093S946特異的CD8+T 細(xì)胞是通過對(duì)正常志愿者的PBMCs用PHF20肽體外刺激獲得，并用于確定裝載有不同濃度 的PHF2093S946肽及對(duì)照肽（陰性對(duì)照）的T2細(xì)胞的識(shí)別。（圖9B)PHF20 938 946特異的T細(xì) 胞在培養(yǎng)基中單獨(dú)或與1442+?冊(cè)20+(]\07-7)或111^-42-?冊(cè)20+(01]4475，]\0^-]\?-361)乳 腺癌細(xì)胞系共培養(yǎng)。一個(gè)正常的乳腺上皮細(xì)胞系MCF-10A作為對(duì)照。通過檢測(cè)IFN-y的釋 放來檢測(cè)T細(xì)胞的活性。（圖9C)PHF2093S946特異的⑶8+T細(xì)胞通過LDH測(cè)試檢測(cè)對(duì)MCF-7 的細(xì)胞毒性。HLA-A2陰性的PHF20+PC3作為LDH測(cè)試的陰性對(duì)照。所用數(shù)據(jù)為平均值土 標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果代表三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)。*P〈〇. 05, #P〈0. 01，*#P〈0. 001與對(duì)照相比。
[0026] 圖10顯示的是在DCs中降低負(fù)調(diào)控因子的表達(dá)可增強(qiáng)抗原特異性免疫反應(yīng)?？?腫瘤免疫反應(yīng)在基于納米技術(shù)的傳遞系統(tǒng)下會(huì)有進(jìn)一步提高。
[0027] 圖11顯示的是一個(gè)MSV傳遞系統(tǒng)以及利用它在腫瘤治療模型中產(chǎn)生有效抗腫瘤 免疫。（A)脂質(zhì)體存在及不存在兩種條件下MSV示意圖展示。（B)通過負(fù)載有MSV/脂質(zhì)體 的DCs產(chǎn)生抗腫瘤免疫，MSV/脂質(zhì)體包含TRP-2,CpG(TLR9的一個(gè)配體）以及MPLA(單脂酰 脂質(zhì)A，TLR4的一個(gè)配體）。小鼠靜脈注射B16腫瘤細(xì)胞（每只鼠注射0. 3*106個(gè)細(xì)胞，重懸 于200yLPBS中）。4天后這些荷瘤小鼠用負(fù)載有所指肽或納米顆粒的DCs免疫（0. 3*106 個(gè)細(xì)胞）。接種疫苗14天后檢查肺轉(zhuǎn)移。（C)不同處理組中B16的肺轉(zhuǎn)移灶數(shù)目。四個(gè)組 中的數(shù)據(jù)250代表數(shù)目太多無法統(tǒng)計(jì)。
[0028] 圖12展示的是DC/PHF20疫苗與抗H)-l聯(lián)合治療。
[0029] 圖13展示的是DC/肽抗原與抗H)-l聯(lián)合治療的兩個(gè)時(shí)間表。
[0030] 圖14HLA-A2轉(zhuǎn)基因小鼠中PHF20特異的T細(xì)胞免疫應(yīng)答。用DC/PHF20肽免疫 HLA-A2轉(zhuǎn)基因小鼠。8天后，從脾臟中分離T細(xì)胞，檢測(cè)它們識(shí)別PHF20或無關(guān)肽的能力。 用⑶8-FITC抗體染色，接著用IFN-g-PE抗體胞內(nèi)染色。選通⑶8+T細(xì)胞群后進(jìn)行FACS分 析。
[0031] 發(fā)明描述
[0032] Jmjd3負(fù)調(diào)控體細(xì)胞重編程
[0033] 在Tet-0_4FMEFs中用shRNA敲低技術(shù)鑒定出許多組蛋白修飾相關(guān)的蛋白是體細(xì) 胞向iPSCs重編程過程中所需要。只有Jmjd3 -個(gè)蛋白在這一過程中起到負(fù)調(diào)控作用。
[0034]Jmjd3可以通過上調(diào)啟動(dòng)子H3K27中三甲基化水平，從而在上調(diào)In4a/Arf中起重 要作用（Aggeretal.，2009;Barradasetal.，2009)。它通過H3K27的去三甲基化與其 他革巴基因相互作用以及通過與KIAA1718相互作用促進(jìn)轉(zhuǎn)錄延長（Chenetal.，2012)。對(duì) In4a/Arf表達(dá)造成的這些影響可以導(dǎo)致衰老和抑制重編程（Hongetal.，2009;Kawamura etal.，2009;Lietal.，2009;Marionetal.，2009;Utikaletal.，2009)。如上文所述， 切除Jmjd3可以降低細(xì)胞的衰老并且通過降低In4a和p21表達(dá)促進(jìn)Jmjd3缺陷的MEFs重 編程。然而，一些證據(jù)表明Jmjd3負(fù)調(diào)控重編程過程是通過一個(gè)新途徑實(shí)現(xiàn)的，即不依賴于 組蛋白甲基化酶的途徑。首先，同時(shí)降低Jmjd3、Ink4a或p20的表達(dá)與單獨(dú)降低它們中任 意一個(gè)的表達(dá)相比明顯會(huì)產(chǎn)生更多的iPSC克隆，這表明，Jmjd3抑制重編程的功能不僅僅 是通過我們之前預(yù)測(cè)的上調(diào)Ink4a或p20實(shí)現(xiàn)的；其次，盡管在Jmjd3缺失的MEFs中異位 表達(dá)全長的Jmjd3可以恢復(fù)Ink4a/Arf的表達(dá)并明顯抑制重編程，但是我們用Jmjd3的突 變體Jmjd3-AlmjC和Jmjd3-111390A也可以達(dá)到相同效果，而兩個(gè)突變體都存在H3K27me3 去甲基化酶活性，并不能調(diào)控Ink4a/Arf表達(dá)。因此Jmjd3利用脫甲基化酶活性依賴性及非 依賴性兩種機(jī)制調(diào)控體細(xì)胞重編程，并且后一種方式起主導(dǎo)作用。我們搜尋可能參與Jmjd3 介導(dǎo)的脫甲基化酶非依賴性介導(dǎo)的調(diào)控重編程過程的靶分子，經(jīng)過廣泛篩查我們找到了 PHF20。降低PHF20的表達(dá)會(huì)顯著引起ESCs和iPSCs的分化，然而，如果ESCs或iPSCs用 RA處理或去除LIP會(huì)引起PHF20, 0ct4和Nanog表達(dá)下調(diào)，證明PHF20的表達(dá)對(duì)維持多能性 狀態(tài)的重要作用。PHF20最初被認(rèn)為是抗體反應(yīng)性蛋白，在包括肝癌和髓母細(xì)胞瘤在內(nèi)的 幾種腫瘤中高表達(dá)（Fischeretal.，2001;Wangetal.，2002)。PHF20已被鑒定為"組蛋 白識(shí)別器"，因?yàn)樗梢蕴禺惖刈R(shí)別H3K4，H3K9，H4K20和H4K79的二甲基化（Adams-Cioaba etal.，2012;Kimetal.，2006)。最近的研究表明PHF20可以識(shí)別p53的K370和K382而 甲基化，并且在對(duì)抗DNA受傷時(shí)可以在轉(zhuǎn)錄水平及轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控p53(Lietal.，2012b; Parketal.，2012)。PHF20敲除的小鼠出生不久就會(huì)死亡（Badeauxetal.，2012)。此外 PHF20缺失的小鼠不能產(chǎn)生ESC。與此相應(yīng)，PHF20缺失的MEFs重編程過程會(huì)受到完全抑 制，這說明PHF20是iPSC重編程及產(chǎn)生ESCs的一個(gè)絕對(duì)必要因子。
[0035]Jmjd3在決定T細(xì)胞譜系的過程中有重要的作用，它通過一個(gè)去甲基化酶活性非 依賴性途徑，與⑶4+T輔助細(xì)胞（Thl)主要調(diào)控分子T-bet及染色體塑造BAP復(fù)合體的主要 催化亞基Brg-1相互作用實(shí)現(xiàn)的（Milleretal.，2010)。在這個(gè)例子中，Jmjd3與PHF20相 互作用，引起PHF20泛素化，并通過蛋白酶體途徑降解。雖然Jmjdl蛋白的C-端和N-端均可 以結(jié)合到PHF20的N-端，Jmjd3蛋白自身并不能引起PHF20的K48泛素化。相反，它會(huì)招募 一個(gè)E3泛素連接酶Trim26到PHF20上引起PHF20的K48泛素化。在敲低Trim26時(shí)PHF20 的泛素化和降解也隨之消失，從而增強(qiáng)iPSC的重編程。進(jìn)一步研究表明全長的Jmjd3,以 及某些突變體（Jmjd3-AJmjC和Jmjd3-H1390A)，但不包括Jmjd3-N，Jmjd3-M，Jmjd3-C突變 體，可以結(jié)合到PHF20介導(dǎo)PHF20的泛素化。這些結(jié)果強(qiáng)調(diào)了Jmjd3-Trim26介導(dǎo)的泛素化 在負(fù)調(diào)控重編程過程中所起的重要作用。
[0036]iPSCs的完全重編程伴隨著不同的DNA甲基化模式改變以及內(nèi)源性的0ct4 以及其他幾種ESC標(biāo)志基因的活性表達(dá)（PlathandLowry, 2011;Stadtfeldand Hochedlinger，2010)。然而，是否是因?yàn)镻HF20缺失引起這些內(nèi)源標(biāo)志基因未能激活，因 此不能成功地重編程？ 一項(xiàng)最新的研究表明外源的0ct4與其他主要的重編程因子首先在 MEFs中引起Wdr5的表達(dá)，隨后形成Wdr5-〇ct4復(fù)合體結(jié)合到0ct4啟動(dòng)子，引起內(nèi)源的0ct4 活化（Angetal.，2011)。PHF20與0ct4表達(dá)的直接聯(lián)系是，PHF20不僅可以結(jié)合到0ct4 的啟動(dòng)子區(qū)域，還會(huì)與Wdr5和M0F特異結(jié)合。最近的研究顯示M0F參與ESC自我更新和功 能以及調(diào)控Nanog表達(dá)（Lietal.，2012a)。PHF20的缺失會(huì)降低Wdr5及M0F結(jié)合到0ct4 啟動(dòng)子的能力，暗示了這種蛋白在活化內(nèi)源0ct4表達(dá)以及增強(qiáng)iPSCs完全重編程所起的關(guān) 鍵作用。與此觀念相一致的是，這一實(shí)例中所顯示的結(jié)果進(jìn)一步證明PHF20缺失會(huì)引起許 多內(nèi)源性的ESC標(biāo)記基因在重編程過程中不能再活化。盡管內(nèi)源性的Sox2和Nanog表達(dá) 缺失可以通過外源0ct4的表達(dá)得到彌補(bǔ)（在Dox存在的條件下）。這表明PHF20直接或 間接影響許多ESC的關(guān)鍵基因表達(dá)。ChIP-PCR和ChIP-seq分析表明PHF20和Wdr5結(jié)合 到0ct4的啟動(dòng)子，但并不會(huì)與Sox2,Nanog，Dnmt3i，Esgl，Eras，Rexl或Crinto的啟動(dòng)子 位置結(jié)合。此外，ChIP-seq分析顯示PHF20和Wdr5均會(huì)結(jié)合重要的表觀遺傳因子基因，包 括Bafl55，Brg-l和Sal4。因此，這就可以解釋為什么PHF20缺失的MEFs不能非完全重編 程的表現(xiàn)不能靠0ct4或4F(0SKM)的過表達(dá)來彌補(bǔ)，并且可以以此推斷出PHF20是一個(gè)上 游調(diào)控分子，調(diào)控0ct4及其他許多重要的ESC標(biāo)志基因，因此，本研究提供的一個(gè)機(jī)制聯(lián)系 是Jmjd3介導(dǎo)PHF20降解導(dǎo)致重編程的缺陷。
[0037] 基于這些發(fā)現(xiàn)，我們提出一個(gè)Jmjd3-PHF20軸如何