0069] 由表1可知，與假輻射組相比，輻射組經(jīng)30mW/cm2微波輻射后H9c2心肌細胞 內(nèi)的R0S明顯增加（P〈0. 01)。與輻射組相比，黃芪總苷給藥輻射組的R0S含量明顯下降 (P〈0. 01)。表明黃芪總苷可抑制微波輻射引起的H9c2心肌細胞R0S的升高，改善微波輻射 所致的心肌細胞氧化應(yīng)激損傷。
[0070] 實施例2黃芪總苷對微波輻射致H9c2心肌細胞內(nèi)LDH含量變化的影響
[0071] 1、培養(yǎng)H9c2心肌細胞
[0072] 從液氮中取出H9c2心肌細胞細胞株，放入37攝氏度水中，融化后吸入離心管，再 加入1. 5毫升含10%胎牛血清、青霉素100單位/毫升和鏈霉素100微克/毫升的Dubecco 最低必需培養(yǎng)基（dubecco's minimal essential medium，DMEM)培養(yǎng)基培養(yǎng)，1000 轉(zhuǎn) / 分 鐘離心10分鐘，棄去上清，加入4毫升上述培養(yǎng)基吹打均勻后吸至培養(yǎng)瓶中，隔日換液，37 攝氏度，5% C02條件下培養(yǎng)及傳代；上述培養(yǎng)的細胞系傳3代后，備用。
[0073] 2、對H9c2心肌細胞進行微波輻射
[0074] 將上述獲得的H9c2心肌細胞隨機分為三組：假輻射組、微波輻射組、黃芪總苷給 藥輻射組。針對黃芪總苷給藥輻射組，預(yù)先將黃芪總苷（南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司，產(chǎn)品 批號：20141015)以二甲基亞諷（dimethyl sulfoxide ;dimethyl sulphoxide，DMSO)溶解， 制成濃度為3微克/毫升的黃芪總苷溶液，并于輻射前48小時加入H9c2心肌細胞培養(yǎng)基 中，然后采用軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微波輻射源對心肌細胞進行均勻輻射，微波輻射源的平均功 率密度為30mW/cm2,輻射6分鐘；針對微波輻射組，于輻射前48小時，向H9c2心肌細胞培 養(yǎng)基中給予與黃芪總苷給藥輻射組的黃芪總苷溶液等體積的DMS0,然后采用軍事醫(yī)學(xué)科學(xué) 院微波輻射源對心肌細胞進行均勻輻射，微波輻射源的平均功率密度為30mW/cm2,輻射6分 鐘；針對假輻射組，于輻射前48小時，向H9c2心肌細胞培養(yǎng)基中給予與黃芪總苷給藥輻射 組的黃芪總苷溶液等體積的DMS0,然后將心肌細胞置于輻射臺上，不予輻射。
[0075] 3、檢測H9c2心肌細胞內(nèi)LDH含量
[0076] 針對各組，于輻射后即刻收集H9c2心肌細胞培養(yǎng)液上清，并利用LDH測試盒（南 京建成生物工程研究所）檢測H9c2心肌細胞內(nèi)的LDH含量，具體地：
[0077] 根據(jù)該LDH測試盒的說明書，向空白孔中加入25微升雙蒸水和20微升基質(zhì)緩沖 液，向標準孔中加入5微升雙蒸水、20微升標準液和20微升基質(zhì)緩沖液，向測定孔中加入 20微升待測樣本、25微升基質(zhì)緩沖液和5微升輔酶I，向?qū)φ湛字屑尤?微升雙蒸水、20微 升待測樣本和25微升基質(zhì)緩沖液，混勻后37攝氏度溫浴15分鐘；再向各孔中加入25微升 2, 4-二硝基苯肼，混勻后37攝氏度溫浴15分鐘；再向各孔中加入250微升0. 4摩爾/升 的NaOH溶液，混勻，室溫放置5分鐘，然后利用熒光分光光度計（生產(chǎn)廠家：Perkin Elmer， 產(chǎn)品型號：Victor X3)于450納米處測定酶標儀吸光度。
[0078] 接著，根據(jù)下列計算公式計算出LDH含量：
[0080] 結(jié)果見表2。
[0081] 表2黃芪總苷對微波輻射致H9c2心肌細胞內(nèi)LDH含量的影響（X 102)
[0083] #表示與假輻射組相比，P〈0. 01 ;
[0084] ##表示與輻射組相比，Ρ〈0· 01。
[0085] 由表2可知，與假輻射組相比，輻射組經(jīng)30mW/cm2微波輻射后H9c2心肌細胞內(nèi)LDH 明顯增加 （P〈〇. 01)。與輻射組相比，黃芪總苷給藥輻射組H9c2心肌細胞內(nèi)的LDH含量明顯 下降（P〈0. 01)。表明黃芪總苷可抑制微波輻射引起的H9c2細胞LDH的升高，改善微波輻射 所致的心肌細胞損傷。
[0086] 實施例3黃芪總苷對微波輻射致大鼠心肌細胞損傷的影響
[0087] 取10只二級雄性Wistar大鼠，隨機分成2組，蒸餾水對照組5只，黃芪總苷組5 只。用軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微波輻射源對其進行全身均勻輻射，微波輻射源的平均功率密度為 30mW/cm2,福射15分鐘。各組大鼠于福射后當(dāng)天開始灌胃給藥，每天1次，連續(xù)14d，黃苗總 苷給藥劑量為40mg/kg/d，注射劑的溶劑為蒸餾水，其中蒸餾水對照組大鼠的黃芪總苷注射 量為〇,即僅注射該蒸餾水。
[0088] 分別于輻射后第14天即停藥后第1天，脫臼處死大鼠，取大鼠心臟組織，10%緩沖 福爾馬林固定后，進行石蠟切片，然后對切片進行HE染色，觀察心臟組織的修復(fù)情況。結(jié)果 見圖1。
[0089] 圖1是經(jīng)過30mW/cm2微波輻射后蒸餾水對照組和和黃芪總苷組的大鼠心臟結(jié)構(gòu) 觀察結(jié)果，其中圖1A為蒸餾水對照組大鼠心臟結(jié)構(gòu)（標尺為50微米），圖1B為黃芪總苷組 給藥后第14天大鼠心臟結(jié)構(gòu)（標尺為50微米）。結(jié)果顯示相較蒸餾水對照組，給予黃芪總 苷能改善輻射致心肌細胞的損傷。
[0090] 在本說明書的描述中，參考術(shù)語"一個實施例"、"一些實施例"、"示例"、"具體示 例"、或"一些示例"等的描述意指結(jié)合該實施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特 點包含于本發(fā)明的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述術(shù)語的示意性表述不 一定指的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點可以在任何 的一個或多個實施例或示例中以合適的方式結(jié)合。
[0091] 盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以理解：在不 脫離本發(fā)明的原理和宗旨的情況下可以對這些實施例進行多種變化、修改、替換和變型，本 發(fā)明的范圍由權(quán)利要求及其等同物限定。
【主權(quán)項】
1. 黃芪總苷在制備藥物中的用途，所述藥物用于預(yù)防或治療微波輻射致心肌細胞損 傷。2. -種用于預(yù)防或治療微波輻射致心肌細胞損傷的藥物組合物，其特征在于，包含： 黃芪總苷。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，進一步包含藥學(xué)上可接受的賦形 劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，所述賦形劑為選自粘合劑、填料、 涂膜聚合物、增塑劑、助流劑、崩解劑和潤滑劑的至少一種。5. -種食品，其特征在于，包含：黃芪總苷。
【專利摘要】本發(fā)明公開了黃芪總苷在制備預(yù)防或治療微波輻射致心肌細胞損傷藥物中的用途、藥物組合物及食品，其中黃芪總苷在制備藥物中的用途，所述藥物用于預(yù)防或治療微波輻射致心肌細胞損傷。由此，可以利用黃芪總苷制備防治微波輻射致心肌細胞損傷的藥物，進而可以利用制備得到的藥物對可能會遭受微波輻射的人或動物進行給藥預(yù)防，或者對已遭受微波輻射致心肌細胞損傷的人或動物進行給藥治療，實現(xiàn)減少心肌細胞損傷、修復(fù)受損的心肌細胞的目的。
【IPC分類】A61P9/00, A61K36/481, A23L33/105
【公開號】CN105232618
【申請?zhí)枴緾N201510689313
【發(fā)明人】彭瑞云, 趙黎, 張雪巖, 張靜, 姚斌偉, 徐新萍, 董霽, 胡宗倩, 周紅梅
【申請人】中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所
【公開日】2016年1月13日
【申請日】2015年10月21日