一種載活性藥物的聚合物脂質(zhì)球及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種載活性藥物的聚合物脂質(zhì)球及其制備方 法，可用于裝載蛋白質(zhì)、多肽或疫苗等活性藥物。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來(lái)，隨著生物技術(shù)和基因工程的迅猛發(fā)展，大量蛋白質(zhì)、多肽、疫苗等生物活 性藥物蓬勃發(fā)展，且越來(lái)越多的藥物被應(yīng)用于臨床。生物活性藥物分子相對(duì)脆弱，易受多種 理化因素影響，導(dǎo)致其體內(nèi)循環(huán)半衰期短，生物利用度低，目前大多數(shù)生物活性藥物通過(guò)非 胃腸途徑給藥，通常需要反復(fù)注射以延長(zhǎng)療效，導(dǎo)致病人順應(yīng)性差。
[0003] 為了延長(zhǎng)生物活性藥物在體內(nèi)的循環(huán)半衰期、減少給藥次數(shù)，可將蛋白質(zhì)、多肽等 活性藥物包埋于合適的載體中，使其在注射部位或體內(nèi)持續(xù)釋放藥物，提高藥物穩(wěn)定性，以 達(dá)到高效的治療效果。目前國(guó)內(nèi)外已開(kāi)發(fā)了多種基于合成聚合物和天然組分材料的微粒緩 控釋系統(tǒng)，包括：水包油型乳劑、脂質(zhì)體、微球和納米粒等，在提高包埋率和降低突釋、保持 所包埋的蛋白質(zhì)活性仍是我們面臨的挑戰(zhàn)。
[0004] 脂質(zhì)球通常采用與脂質(zhì)體類似的方法制備，即先將脂質(zhì)材料成膜后，然后在水化 過(guò)程中裝載蛋白等活性藥物，這種方法制備的脂質(zhì)球蛋白易于泄露，且突釋高、釋放快；后 來(lái)又發(fā)展了復(fù)乳法，而乳液制備多采用傳統(tǒng)的機(jī)械攪拌、超聲或均質(zhì)法制備，所制備的乳液 粒徑分布較寬，導(dǎo)致最終微球粒徑分布寬，使批次間微球粒徑及粒徑分布、包埋率、釋放行 為等重復(fù)性差，使得用藥效果批次間可重現(xiàn)性不佳。而作為藥物載體，批次間微球制備重復(fù) 性是至關(guān)重要的。另外，微球粒徑及其均一性也是影響其體內(nèi)藥效的非常重要的因素，而傳 統(tǒng)方法無(wú)法制備粒徑均一、可控的微球，很難開(kāi)展微球粒徑與藥效之間的關(guān)系研究，很難篩 選針對(duì)不同藥物及其不同給藥途徑等合適的粒徑需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種尺寸均一、可控、高包埋率、高 活性、低突釋、釋藥穩(wěn)定的載活性藥物的長(zhǎng)效緩控釋可降解的、具有多腔室或核殼結(jié)構(gòu)的聚 合物脂質(zhì)球及其制備方法。
[0006] 在第一方面，本發(fā)明提供一種載活性藥物的聚合物脂質(zhì)球，所述聚合物脂質(zhì)球包 括聚合物構(gòu)成的疏水性骨架和包覆于所述疏水性骨架外面的磷脂層，所述磷脂層的磷脂分 子的疏水尾端鑲嵌在所述疏水性骨架內(nèi)部，而親水頭基暴露在外表面；所述疏水性骨架內(nèi) 部包埋有活性藥物；所述聚合物脂質(zhì)球的平均粒徑在0. l-30ym之間，分散系數(shù)小于0. 1。
[0007] 本發(fā)明提供的載活性藥物的聚合物脂質(zhì)球，其表面的磷脂層與細(xì)胞膜表面的脂質(zhì) 有良好的親和性，與單純的聚合物（如PLGA)微球相比，更易于被Μ細(xì)胞攝取，有利于藥物 通過(guò)Μ細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)，可作為口服藥物載體或口服疫苗遞送系統(tǒng)。
[0008] 本發(fā)明提供的載活性藥物的聚合物脂質(zhì)球，其尺寸均一、可控，是可載蛋白質(zhì)、多 肽或疫苗等多種生物活性藥物的可降解的聚合物脂質(zhì)球，該脂質(zhì)球具有多腔室或核殼結(jié) 構(gòu)，其粒度分散系數(shù)（PDI)小于0. 1，其粒徑在納米級(jí)至微米級(jí)可控，該脂質(zhì)球藥物包埋率 在80%以上，藥物活性保留率達(dá)80%以上，藥物突釋率低至20%，能持續(xù)釋放4周或更長(zhǎng)。
[0009] 上述roi的定義為：多分散系數(shù)，代表粒子均勻分散的程度，即粒度分布系數(shù)。該 數(shù)值越小，溶液中的粒子分布越均勻。相反地，該數(shù)值越大，溶液中的粒子分布越寬泛。一 般認(rèn)為PDI小于0. 1的乳液具有單分散性。
[0010] 上述包埋率（entrapment efficiency, EE)的定義為：被包埋進(jìn)脂質(zhì)球的藥物的量 占投入藥物總量的百分比，按以下公式計(jì)算。 Wl
[0011] E-E = -
[0012] 式中，EE表示藥物包埋率，Wi表示被包埋進(jìn)脂質(zhì)球的藥物的量，W表示投入藥物的 總量。
[0013] 本發(fā)明中，所述聚合物脂質(zhì)球的平均粒徑在0. 1_30μπι之間，例如0. Ιμπκ 0· 12μπι、0· 15μπι、0·2μπι、0·5μπι、0·8μπι、1·0μπι、2·0μπι、3·0μπι、5·0μπι、10·0μπι、 15. 0μπι、18· 0μπι、21· 0μπι、22· 5μπι、27 μπι、29μπι、0· 5-20μπι、0· 5-10μπι、1-3μπι、 0· 1-3 μ m 或 2-15 μ m，優(yōu)選 0· 1-3 μ m。
[0014] 本發(fā)明中，所述聚合物脂質(zhì)球中可包埋不同濃度的蛋白質(zhì)、多肽或疫苗等活性藥 物溶液，也可包埋脂溶性蛋白質(zhì)、多肽或疫苗等活性藥物，還可包埋固體顆粒分散狀態(tài)的蛋 白質(zhì)、多肽或疫苗等活性藥物。也就是說(shuō)，所述活性藥物可以是疏水性藥物或親水性藥物， 所述親水性藥物按其存在形式可以是水溶液形式或固體顆粒形式，相應(yīng)的載活性藥物的聚 合物脂質(zhì)球的結(jié)構(gòu)不同，體現(xiàn)在：
[0015] 作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，在所述活性藥物為疏水性藥物的情況下，所述疏水性骨 架內(nèi)部包埋有活性藥物，具體為：所述疏水性骨架內(nèi)部直接包埋疏水性藥物。其中，所述疏 水性藥物包括疏水性蛋白質(zhì)、多肽或疫苗等。
[0016] 作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，在所述活性藥物為親水性藥物的情況下，所述疏水性骨 架內(nèi)部包埋有活性藥物，具體為：所述疏水性骨架內(nèi)部包埋有腔室結(jié)構(gòu)；所述腔室結(jié)構(gòu)包 括磷脂層圍成的腔室和所述腔室內(nèi)部的內(nèi)水相及所述內(nèi)水相中的親水性藥物，或所述腔室 結(jié)構(gòu)包括磷脂層圍成的腔室和所述腔室內(nèi)部的親水性藥物顆粒。其中，所述親水性藥物包 括親水性蛋白質(zhì)、多肽或疫苗等。
[0017] 作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述聚合物脂質(zhì)球在制備過(guò)程中采用可降解聚合物和磷 脂兩種材料。其中，磷脂材料具有助乳化劑功能，有利于提高藥物的包埋率、保持生物活性、 降低突釋和穩(wěn)定釋放。所述可降解聚合物，可選自聚乳酸、聚乙醇酸、聚內(nèi)酯、聚酸酐、聚三 亞甲基碳酸酯、聚對(duì)二氧環(huán)己酮或它們的共聚物；優(yōu)選地，所述共聚物選自聚乳酸-聚乙醇 酸共聚物或聚乳酸-聚對(duì)二氧環(huán)己酮。優(yōu)選地，所述磷脂分子選自大豆卵磷脂、蛋黃卵磷 月旨、磷脂衍生物、脂肪酸、脂肪酰胺、磷脂酰膽堿或其衍生物，優(yōu)選氫化大豆卵磷脂、磷脂酰 膽堿、蛋黃卵磷脂。
[0018] 在第二方面，本發(fā)明提供制備第一方面所述的載活性藥物的聚合物脂質(zhì)球的方 法。按照活性藥物的不同，所述方法可以是以下三種方法中任一種：
[0019] 在所述活性藥物為疏水性藥物的情況下，所述方法包括以下步驟：
[0020] (1)將可降解聚合物和磷脂共同溶于有機(jī)溶劑中作為油相0 ;
[0021] (2)將疏水性藥物溶于所述油相中制成含藥油相；
[0022] (3)將所述含藥油相加入含穩(wěn)定劑的外水相W中，機(jī)械攪拌形成0/W型預(yù)乳液；
[0023] (4)將所述0/W型預(yù)乳液壓過(guò)微孔膜，得到0/W型乳液；
[0024] (5)將所述0/W型乳液固化，除去殘留有機(jī)溶劑，冷凍干燥，得到干粉狀載活性藥 物的聚合物脂質(zhì)球。
[0025] 在所述活性藥物為親水性藥物水溶液的情況下，所述方法包括以下步驟：
[0026] (1)將可降解聚合物和磷脂共同溶于有機(jī)溶劑中作為油相0 ;
[0027] (2)將親水性藥物水溶液％分散于所述油相0中制成1/0型初乳；
[0028] (3)將所述1/0型初乳加入含穩(wěn)定劑的外水相W2中，機(jī)械攪拌形成[/0/%型預(yù) 復(fù)乳；
[0029] (4)將所述W/O/%型預(yù)復(fù)乳壓過(guò)微孔膜，得到W/O/%型復(fù)乳；
[0030] (5)將所述W/0/%型復(fù)乳固化，除去殘留有機(jī)溶劑，冷凍干燥，得到干粉狀載活性 藥物的聚合物脂質(zhì)球。
[0031] 作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述親水性藥物水溶液％中藥物濃度為1-lOOmg/mL。
[0032] 作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述親水性藥物水溶液I與油相0的體積比為1:1~ 1:10,優(yōu)選為1:10 ;所述油相0與外水相^的體積比為1:1~1:100。
[0033] 在所述活性藥物為親水性藥物顆粒的情況下，所述方法包括以下步驟：
[0034] (1)將可降解聚合物和磷脂共同溶于有機(jī)溶劑中作為油相0 ;
[0035] (2)將親水性藥物顆粒S分散于所述油相0中制成S/0型初