一種組合物及其在抗肝纖維化藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 肝纖維化是慢性肝損傷向肝硬化發(fā)展的動(dòng)態(tài)過(guò)程，表現(xiàn)為細(xì)胞外基質(zhì)（ECM)大量 合成、分泌，而降解絕對(duì)或相對(duì)不足，使ECM在肝臟內(nèi)彌漫沉積。其起始于肝細(xì)胞（HC)壞死， 隨之是炎癥反應(yīng)、纖維生成介質(zhì)釋放，肝星狀細(xì)胞（FSC)激活，最終以肝臟結(jié)締組織成分的 合成與降解明顯失去平衡。肝纖維化是多種慢性肝病共同的病理過(guò)程，是影響預(yù)后的重要 因素。
[0003] 過(guò)去的20年間，肝纖維化的研究取得了長(zhǎng)足進(jìn)展，證實(shí)肝纖維化與一定程度的肝 硬化都是可逆的。近年來(lái)陸續(xù)出現(xiàn)了一些抗肝纖維化治療方法，包括化學(xué)藥、生物制劑、中 藥與基因療法等，但是理想的臨床治療手段仍然缺乏（劉平.加強(qiáng)抗肝纖維化作用機(jī)制的 研究.中華肝病雜志，2005, 8(13) :561)。目前防治肝纖維的關(guān)鍵是針對(duì)與肝星狀細(xì)胞激活 相關(guān)的環(huán)節(jié)，主要是：減輕肝損傷；抑制星狀細(xì)胞激活，減少細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生；調(diào)節(jié)細(xì)胞因 子紊亂，促進(jìn)活化肝星狀細(xì)胞凋亡；抑制肝臟成纖維細(xì)胞的增殖以及星狀細(xì)胞激活大量分 泌誘導(dǎo)肝臟成纖維細(xì)胞的增殖。
[0004] 從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價(jià)值。
[0005] 本發(fā)明涉及的化合物 I 是一個(gè)2011 年發(fā)表（Meng Shao et al.，2010. Psiguadials A and B,Two Novel Meroterpenoids with Unusual Skeletons from the Leaves of Psidium guajava. Organic Letters 12(2010)5040 - 5043)的化合物，我們對(duì)化合物 I 進(jìn)行 了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物 IV制備了組合物并對(duì)該組合物抗肝纖維化活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，其具有抗肝纖維化活性。
[0006] 由于肝臟星狀細(xì)胞的激活，從而引起了多種生長(zhǎng)因子的大量分泌，這些生長(zhǎng)因子 會(huì)誘導(dǎo)肝臟成纖維細(xì)胞的快速增殖，從而加速纖維化，其中最重要的生長(zhǎng)因子之一就是 TGF。因此，篩選抗肝纖維化藥物的一個(gè)重要思路就是篩選能夠抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖的 藥物或者篩選能夠抑制TGF等生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞的增殖，篩選常常在成纖維細(xì)胞 上進(jìn)行，NIH/3T3細(xì)胞是最常用的細(xì)胞株。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明公開(kāi)了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合 物中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為5%和95%。
[0008]
[0010] 本發(fā)明公開(kāi)的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0011] 藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的組合物具有較好的抗肝纖維化作用。本發(fā)明的藥學(xué)上 可接受的鹽具有同樣的藥效。
[0012] 進(jìn)一步的，組合物的體外實(shí)驗(yàn)表明，組合物具有很強(qiáng)的抗成纖維細(xì)胞增殖的活性， 因此本發(fā)明的組合物有望被用于制備新型抗肝纖維化藥物。
[0013] 進(jìn)一步的，組合物的體外實(shí)驗(yàn)表明，組合物具有很強(qiáng)的抗生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的成纖維 細(xì)胞增殖的活性，組合物是一個(gè)極具開(kāi)發(fā)潛力的化合物，它可直接用于相應(yīng)疾病的治療以 及相關(guān)藥物的制備。
[0014] 以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 實(shí)施例1化合物Psiguadial A的制備
[0016] 化合物Psiguadial A(I)的制備方法參照Meng Shao等人發(fā)表的文獻(xiàn)（Meng Shao et al. , 2010. Psiguadials A and B, Two Novel Meroterpenoids with Unusual Skeletons from the Leaves of Psidium guajava. Organic Letters 12(2010)5040 - 5043)的方法。
[0019] 實(shí)施例2 Psiguadial A的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0020] 將化合物I (474mg，1. OOmmol)溶于20mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0. 16g)，1，2-二溴乙烷（7. 520g，40.0 Ommol)和12mL的50 %氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?5攝 氏度攪拌8h。8h之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機(jī)相溶液。然 后對(duì)有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌3次，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去 除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動(dòng)相為：石油醚/丙酮=100:0. 5， v/v)，收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末（502mg，73% )。
[0021] 4 NMR (500MHz，DMS0-d6) δ 10. 44 (s，2H)，7. 24 (s，2H)，7. 20 (d，J = 10. 0Hz，3H)，4 .31 (s, 4H), 3. 89 (s, 1H), 3. 74 (s, 4H), 2. 30 (s, 1H), 2. 12 (s, 1H), 2. 02 (s, 1H), 1. 92 (s, 1H), 1 .79 (s, 1H), 1. 73 (s, 1H), L 51 (d, J = 19. 8Hz, 3H), 0. 99 (s, 3H), 0. 95 (d, J = 4. 7Hz, 7H), 0. 8 5 (s, 3H), 0. 53 (s, 1H), 0. 43 (s, 1H).
[0022] 13C NMR (125MHz, DMS0-d6) δ 188. 69 (s)，170. 54 (s)，165. 42 (s)，163. 38 (s)，142. 7 2 (s), 129. 71 (s), 127. 96 (s), 127. 08 (s), 118. 00 (s), 116. 82 (s), 114. 82 (s), 72. 73 (s), 40. 19 (s), 34. 75 (s), 34. 32 (s), 31. 75 (s), 30. 93 (s), 28. 09 (s), 26. 43 (s), 24. 48 (s), 23. 74 (s) ,21. 18 (s), 20. 77 (s), 19. 99 (s), 14. 39 (s).
[0023] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for C34H41Br205：689. 1300 ；found 689. 1303.
[0024]
[0025] 實(shí)施例3 Psiguadial A的0-(四氫吡咯基）乙基衍生物（III)的合成
[0026] 將化合物II (344mg，0. 5mmol)溶于20mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無(wú)水碳酸鉀 (690mg，5.0mmol)，碘化鉀（168mg，1.0mmol)和吡略燒（2840mg，40mmol)，混合物加熱回流 6h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取4次，合并有機(jī)相。依次用水和 飽和食鹽水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗 品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動(dòng)相為：石油醚/丙酮=100:1. 5, v/v)，收集黃色集 中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物III的黃色粉末（223. 8mg，67% )。
[0027] NMR (500MHz, DMS〇-d6) δ 10. 43 (s, 2Η) , 7. 2 1 (s, 2Η) , 7. 15 (d, J = 10. 0Hz, 3Η)，3· 99 (d, J = 19. 6Ηζ, 5Η), 2· 57 (s, 4Η), 2· 43 (s, 8Η), 2· 21 (s, 1Η), 1· 95 (s, 1Η), 1. 85 (d, J = 7. 5Hz, 2Η), 1. 78 (s, 1Η), 1. 62 (d, J = 12. 9Hz, 9H), 1. 39 (s, 2H), 1. 37 (s, 1H), 1. 25 (s, 1H), 0. 93 (s, 3H), 0. 90 (s, 6H), 0. 83 (s, 3H), 0. 46 (s, 1H), 0. 21 (s, 1H).
[0028] 13C NMR (125MHz, DMS0-d6) δ 188. 52 (s)，170. 23 (s)，164. 97 (s)，163. 14 (s)，142. 3 8(s), 129. 22 (s), 127. 70 (s), 126. 72 (s), 117. 54 (s), 116. 59 (s), 114. 44(s), 69. 04(s), 54. 36 (d, J = 16. 6Hz), 39. 83 (s), 34. 29 (s), 34. 0