大鯢組織提取物的復方組合物及其應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種組織提取物及其應用，具體涉及一種大鯢組織提取物的復方組合 物及其應用。
【背景技術】
[0002] 大鯢（，俗稱娃娃魚，為兩棲動物中體形最大的一種，是我國 特有的珍稀物產(chǎn)，屬于國家二級保護兩棲野生動物，主要分布于長江中上游、珠江中上游及 漢水上游的溪流中。隨著大鯢人工養(yǎng)殖技術的發(fā)展和推廣，其人工養(yǎng)殖在我國已經(jīng)實現(xiàn)產(chǎn) 業(yè)化，國家有關部門已批準人工養(yǎng)殖子二代大鯢可用于開發(fā)利用，大鯢成為農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化和 特色農(nóng)業(yè)重點開發(fā)品種。
[0003] 大鯢是一種傳統(tǒng)名貴藥用動物，具有極高的營養(yǎng)價值、醫(yī)藥保健價值。其肌肉、內(nèi) 臟、骨骼、表皮及其分泌物均可入藥，在歷代方石中多有記載。如《本草綱目》中有"鱗目、 四部、大鯢……以癡疾"。《本草經(jīng)集注》、《本草拾遺》等藥典中也有"治癡疾、治牛、治斑疾" 的描述，表明了大鯢入藥在提高智力、美容、益膚方面有顯著功能。中醫(yī)認為，大鯢性甘平味 淡，有補氣、養(yǎng)血、益智、滋補、強壯之功效，主治神經(jīng)衰弱、貧血、痢疾、瘧疾等，用于病后、產(chǎn) 后身體虛弱，腎虛陰虧，肺癆咯血，久痢脫肛等?，F(xiàn)代醫(yī)學認為，經(jīng)常食用大鯢可聰明益智延 緩衰老提高造血和免疫功能，對防止心腦血管系統(tǒng)疾病，惡性貧血和惡性腫瘤有很好的效 果。但關于其提取物及復方促進細胞生長及抗氧化方面研究較少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種大鯢組織提取物的復方組合物及其應用，利用大鯢組織 提取物單一、復方或配伍中藥促進細胞生長及抗氧化。
[0005] 本發(fā)明所采用的技術方案是： 大鯢組織提取物的復方組合物，其特征在于： 包含以下質(zhì)量份數(shù)的組分： 人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物〇. 3-130份； 川芎揮發(fā)油0.01-20份； 黃芪提取物〇. 01-30份； 當歸提取物0.01-30份。
[0006] 所述人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物選自大鯢皮膚水解膠原蛋白、大鯢油、大鯢皮膚分 泌黏液提取物中的至少一種，添加份數(shù)依次為0. 1-50份、0. 1-30份、0. 1-50份。
[0007] 所述人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物為人工養(yǎng)殖大鯢子二代及以下的大鯢組織提取物。
[0008] 所述大鯢皮膚水解膠原蛋白由大鯢皮膚經(jīng)酶水解而得； 所述大鯢油由大鯢尾脂提取而得； 所述大鯢皮膚分泌黏液提取物由大鯢分泌黏液經(jīng)酶水解而得； 所述川芎揮發(fā)油由中藥川芎經(jīng)水蒸氣蒸餾法制得； 所述黃芪提取物由中藥黃芪經(jīng)水提醇沉法提取，噴霧干燥，得提取物粉末； 所述當歸提取物由中藥當歸采用水提法提取，噴霧干燥，得提取物粉末 大鯢組織提取物的復方組合物作為促進皮膚細胞生長及抗氧化美容用品的應用。
[0009] 本發(fā)明具有以下優(yōu)點： 本發(fā)明通過大量實驗研究，證明大鯢組織提取物單一、復方或配伍中藥黃芪、川芎、當 歸提取物，可有效促進皮膚細胞生長，并且具有抗氧化功效。本發(fā)明不僅提供了天然促進皮 膚細胞生長及抗氧化的物質(zhì)及組合，還豐富了人工養(yǎng)殖大鯢的副產(chǎn)品種類，具有良好的市 場前景。
【具體實施方式】
[0010] 下面結合【具體實施方式】對本發(fā)明進行詳細的說明。
[0011] 本發(fā)明涉及的大鯢組織提取物的復方組合物，包含以下質(zhì)量份數(shù)的組分： 人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物〇. 3-130份； 川芎揮發(fā)油0.01-20份； 黃芪提取物〇. 01-30份； 當歸提取物0.01-30份。
[0012] 所述人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物選自大鯢皮膚水解膠原蛋白、大鯢油、大鯢皮膚分 泌黏液提取物中的至少一種，添加份數(shù)依次為0. 1-50份、0. 1-30份、0. 1-50份。
[0013] 所述人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物為人工養(yǎng)殖大鯢子二代及以下的大鯢組織提取物。 [0014] 所述大鯢皮膚水解膠原蛋白由大鯢皮膚經(jīng)酶水解而得； 所述大鯢油由大鯢尾脂提取而得； 所述大鯢皮膚分泌黏液提取物由大鯢分泌黏液經(jīng)酶水解而得； 所述川芎揮發(fā)油由中藥川芎經(jīng)水蒸氣蒸餾法制得； 所述黃芪提取物由中藥黃芪經(jīng)水提醇沉法提取，噴霧干燥，得提取物粉末； 所述當歸提取物由中藥當歸采用水提法提取，噴霧干燥，得提取物粉末。
[0015] 上述大鯢組織提取物的復方組合物可添加于美容用品中，包括化妝品、保養(yǎng)品等， 能促進皮膚細胞生長，起到抗氧化作用。
[0016] 凡在上述組分質(zhì)量分數(shù)的配比范圍內(nèi)的取值，均可作為本發(fā)明限定的復方組合 物，以下為復方組合物的部分配比實施例：
1.體外促皮膚細胞增殖及抗氧化活力測試 1. 1實驗材料 人永生化表皮HaCat細胞，生長于含10%胎牛血清，100 U/ml青霉素、100 μg/ml鏈霉 素的RPMI-1640培養(yǎng)液中，置于含5% C02,37 °C培養(yǎng)箱里培養(yǎng)。
[0017] 1.2藥物與試劑 大鯢皮膚分泌黏液提取物即大鯢黏液水解蛋白（由大鯢皮膚分泌黏液采用胃蛋白酶水 解而得)。大鯢油（由大鯢尾脂采用索氏提取法回流提取所得，為淡黃色至黃色油狀液體)。 大鯢皮膚水解膠原蛋白（由大鯢皮采用胃蛋白酶水解而得)。川芎揮發(fā)油（中藥川芎采用水 蒸氣蒸餾法制得)，黃芪提取物（中藥黃芪采用水提醇沉法提取，噴霧干燥，得提取物粉末)， 當歸提取物（中藥當歸采用水提法提取，噴霧干燥，得提取物粉末)。
[0018] 1.3受試物劑量及組別 設置空白組，大鯢黏液水解蛋白組、大鯢油組、大鯢皮膚水解膠原蛋白組、大鯢組織提 取物的復方組合物組(簡稱復方組)。
[0019] 復方組為上述實施例9-10,分別為復方組1和2。
[0020] 所有受試物均按照1%濃度作用于細胞。
[0021] 1.4實驗方法 1. 4. 1細胞增殖實驗 取對數(shù)生長期HaCat細胞配制成5 X 104個/ml細胞懸液，每孔100 μ 1接種于96孔板 中培養(yǎng)過夜，待細胞充分貼壁，除去原培養(yǎng)液，加入指定濃度受試物，每孔至100 μ 1。37°C 培養(yǎng)24小時和48小時，結束后每孔加入5 mg/ml的MTT 10 μ 1繼續(xù)孵育2小時后棄去 上清液，每孔加入DMS0 150 μ 1，微量振蕩器振蕩10分鐘以充分溶解結晶物。利用酶標儀 在492 nm波長下測定各孔吸光值（Α值)，按以下公式計算藥物對細胞體外存活率（Cell viability)影響。
[0022] Cell viability(°/〇) = [A492