S-(羧甲基)-l-半胱氨酸在制備防治呼吸系統(tǒng)疾病藥物的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及s-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽的藥物新用途。
【背景技術(shù)】
[0002]NF-κΒ是1986年由Sen等首先從B淋巴細胞核抽提物中檢測到的一種能與免疫球蛋白輕鏈基因增強子κΒ序列特異性結(jié)合的核蛋白因子，可促進輕鏈基因的表達，發(fā)揮轉(zhuǎn)錄和調(diào)控作用(Sen R，Baltimore D.1nducibility of kappa immunoglobulinenhancer-binding protein Nf—kappa B by a posttranslat1nal mechanism.Cell.1986;47(6):921-8.)。作為一個多功能核轉(zhuǎn)錄因子，NF-κ B由Rel蛋白家族中的兩個成員P65和P50構(gòu)成的二聚體復(fù)合物，在肺組織中主要以P65亞基形式存在。在靜息狀態(tài)下，NF- κ B與抑制物I κ B結(jié)合存在于胞漿中，不具有生物活性；當(dāng)受到多種細胞因子、病毒、LPS等刺激后，I κ B被降解并與NF- κ B分離，NF- κ Β進入細胞核后與DNA上的κ Β位點結(jié)合，啟動多種炎癥反應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄，包括前炎癥細胞因子TNF-α、IL-2、IL_6，趨化因子IL-8、巨噬細胞趨化蛋白(MCP)、巨噬細胞炎癥蛋白(MIP)，粘附因子如細胞間粘附分子-1(ICAM-1)、血管細胞粘附分子(VCAM-1)等，與支氣管哮喘、慢性支氣管炎、急性肺損傷、急性呼吸窘迫綜合征、肺纖維化等肺部炎性疾病發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。然而，目前臨床尚無特異性NF-κΒ抑制劑的應(yīng)用。
[0003]S-(竣甲基)-L-半耽氨酸(carbocisteine、carboxymethylcysteine, CMC)，又稱羧甲司坦，于1961年由法國Joullie公司首先開發(fā)并應(yīng)用于臨床，為粘痰溶解藥，可影響支氣管腺體的分泌，使低粘度的唾液粘蛋白的分泌增加，高粘度的巖藻粘蛋白的產(chǎn)生減少，且可直接作用于粘蛋白的二硫鍵，使粘蛋白分子裂解而降低痰液粘滯性，易于咯出；可提高粘膜纖毛清除率；降低氣道高反應(yīng)性。CMC進入體內(nèi)后易脫去羧甲基形成半胱氨酸，其所含的巰基能與活性氧(reactive oxygen species，R0S)等的親電子基團相互作用，發(fā)揮直接抗氧化作用；此外，半胱氨酸亦是谷胱甘肽(GSH)的前體，能再合成具有生物活性的GSH，增加體內(nèi)GSH的濃度，起到間接抗氧化作用。臨床上CMC主要用于治療慢性支氣管炎、肺氣腫、慢性阻塞性肺病(C0PD)、支氣管哮喘等疾病引起的痰液粘稠、咳痰困難等。近來，有報道CMC可以抑制體外鼻病毒、IL-Ιβ等刺激所致的IL-6、IL-8等炎性因子的釋放(Yasuda Η,Yamaya M, Sasaki Τ, et al.Carbocisteine inhibits rhinovirus infect1n in humantracheal epithelial cells.Eur Respir J.2006;28(1):51-8.Nogawa H, IshibashiY, Ogawa A, et al.Carbocisteine can scavenge reactive oxygen species in vitr0.Respirology.2009; 14 (1): 53-9.)，以及抑制香煙煙霧誘導(dǎo)的肺氣腫(Hanaoka M, DromaY, Chen Y, et al.Carbocisteine protects against emphysema induced by cigarettesmoke extract in rats.Chest.2011; 139 (5): 1101-8.)。但對于 NF_ κ B 信號通路的影響未見。因此，探討CMC對NF- κ B信號通路的影響，對于進一步明晰C0PD在肺部炎性疾病的預(yù)防治療中的應(yīng)用具有重大意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽或含有它們中任何一種的藥物組合物在制備用于預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的藥物中的用途。
[0005]上述呼吸系統(tǒng)疾病包括支氣管哮喘、肺氣腫、急性肺損傷、急性呼吸窘迫綜合征、肺纖維化等疾病。
[0006]為實現(xiàn)S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽在制備用于預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的藥物中的用途，可以將S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽制成膠囊劑、片劑、丸劑、口服液、軟膠囊劑或滴丸劑。
[0007]本發(fā)明解決技術(shù)問題采用的技術(shù)方案為:將S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽制成片劑、膠囊劑、口服液、顆粒劑、干混懸劑、丸劑或滴丸劑中的一種，為實現(xiàn)這些制劑的制備，需在制備這些劑型時加入藥學(xué)可接受的輔料，如填充劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括:淀粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括:淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉等；潤滑劑包括:硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊酯、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括:淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括:糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括:甜味劑及各種香精；防腐劑包括:尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等。
[0008]在本發(fā)明中，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”包括與無機堿形成的羧酸鹽，如鈉、鉀、鈣、鎂、銨等無機堿的鹽；與有機堿形成的羧酸鹽，如葡甲胺、氨基葡萄糖、三甲基胺、三乙基胺、二環(huán)己基胺、N，N-二芐基-1，2-乙二胺、精氨酸、賴氨酸等的鹽，或無毒性的鹽類。
[0009]本發(fā)明優(yōu)選的方案是S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽或含有它們中任何一種的藥物組合物在制備用于預(yù)防或治療由NF-κ B信號通路活化所引起的呼吸系統(tǒng)疾病的藥物中的用途。
[0010]為了更好地理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面用s-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其鹽在體內(nèi)外的試驗結(jié)果，說明其在制藥領(lǐng)域的新用途。
【附圖說明】
[0011]附圖1所示為S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽對H202刺激引起的ρ NF-κΒ p65表達的抑制作用(注:與H202組比較，* K0.05)。
[0012]附圖2所示為S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽對TNF- α刺激引起的P NF-kB p65表達的抑制作用(注:與TNF-α組比較，*代0.05)。
[0013]附圖3所示為S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽對香煙煙霧提取物(CSE)刺激引起的ρ NF-κΒ p65表達的抑制作用(注??與CSE組比較，*代0.05)。
[0014]附圖4所示為S-(羧甲基)-L-半胱氨酸對H202、TNF- a、CSE刺激引起的ρ NF-κΒΡ65蛋白入核的抑制作用。
[0015]附圖5所示為S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽對H202刺激下IL-6及E-8釋放的抑制作用(注:與H202組比較，* K0.05)。
[0016]附圖6所示為S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽對TNF- α刺激下IL-6及IL-8釋放的抑制作用(注:與TNF- α組比較，*代0.05)。
[0017]附圖7所示為S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其藥學(xué)上可以接受的鹽對CSE刺激下IL-6及Ε-8釋放的抑制作用(注:與CSE組比較，*代0.05)。
[0018]附圖8所示為S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其銨鹽對急性肺損傷小鼠NF- κ Β表達的抑制作用(注:與模型組比較，*代0.05)。
[0019]附圖9所示為S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其銨鹽對急性肺損傷小鼠IL-6、IL_8釋放的抑制作用(注:與模型組比較，*代0.05)。
[0020]附圖10所示為S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其銨鹽對支氣管哮喘小鼠NF- κ B表達的抑制作用(注:與模型組比較，*代0.05)。
[0021]附圖11所示為S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其銨鹽對支氣管哮喘小鼠IL-6、IL_8釋放的抑制作用(注:與模型組比較，*代0.05)。
【具體實施方式】
[0022]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。
[0023]本發(fā)明所用材料如下:
1.1主要儀器與試劑
二氧化碳培養(yǎng)箱(日本ASTEC公司)；BSC-1600IIA2生物安全柜(蘇凈集團蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司);XDS_1B倒置顯微鏡(重慶光電儀器有限公司);Ax1 Vert.Al焚光顯微鏡(德國ZEISS公司)。
[0024]1.2主要試劑、動物
人肺腺癌A549細胞(實驗室自存)；RPM1-1640、胎