一種二十二碳六烯酸靶向多西紫杉醇納米藥物的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于納米抗癌藥物領(lǐng)域，涉及一種二十二碳六稀酸革E1向多西紫杉醇納米藥物的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]多西紫杉醇，又叫多西他賽，是以紫杉樹(shù)中的化學(xué)物質(zhì)紫杉醇為基礎(chǔ)而合成出來(lái)的一種紫杉烷類(lèi)抗腫瘤藥物，其作用機(jī)制與紫杉醇相似，即促進(jìn)微管蛋白聚合，抑制微管解聚，抑制細(xì)胞分裂，從而破壞腫瘤細(xì)胞的有絲分裂。多西紫杉醇可用于治療各種癌癥，尤其適用于局部晚期乳腺癌和非小細(xì)胞肺癌。但是多西紫杉醇的水溶性極小，目前臨床使用的多西紫杉醇都用吐溫-80溶解，而吐溫-80具有溶血性，且黏性大，會(huì)讓患者產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)。因此，開(kāi)發(fā)水溶性多西紫杉醇制劑至關(guān)重要。
[0003]二十二碳六烯酸，簡(jiǎn)稱(chēng)DHA，屬于n-3多不飽和脂肪酸，是人體必需的脂肪酸。人體自身不能合成DHA，因此只能通過(guò)外界來(lái)獲得DHA，其主要來(lái)源是魚(yú)油。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)DHA具有抗腫瘤作用，且可以增加藥物抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。作為化合物的前體物及能量來(lái)源，腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)需要大量的DHA。研究表明DHA受體在惡性腫瘤細(xì)胞中過(guò)量表達(dá)，DHA被腫瘤細(xì)胞大量吸收，這為DHA靶向藥物的制備提供了依據(jù)和基礎(chǔ)。
[0004]本發(fā)明所制備的二十二碳六烯酸靶向多西紫杉醇抗癌藥物的納米粒子不僅將抗癌藥物納米化，提高了其生物利用度，還將抗癌藥物的水溶性提高，減小了臨床使用的副作用。同時(shí)由于二十二碳六烯酸的靶向作用及抗腫瘤作用，該藥物的抗癌效果也有所增強(qiáng)。該制劑為抗癌藥物分子靶向治療提供了一個(gè)新方向。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種二十二碳六烯酸靶向多西紫杉醇納米藥物的制備方法。
[0006]本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:一種二十二碳六烯酸靶向多西紫杉醇納米藥物的制備方法:
[0007](1) 二十二碳六烯酸衍生物的制備:將氯甲酸異丁酯、三正丁胺、N，N_ 二甲基甲酰胺除水，按4:15:300的比例混合在一起，再加入二十二碳六烯酸，在4°C下反應(yīng)。
[0008](2) 二十二碳六烯酸-白蛋白的制備:按一定比例配置N，N_ 二甲基甲酰胺與水的混合液，稱(chēng)取一定量白蛋白溶解于10mLN，N-二甲基甲酰胺、水混合液中。在4°C條件下，一邊攪拌，一邊逐滴加入步驟(1)中的混合液，反應(yīng)一段時(shí)間。反應(yīng)結(jié)束后，透析3d，透析液為PH7.4的磷酸鹽緩沖液。
[0009](3)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸-白蛋白納米粒子的制備:稱(chēng)取一定質(zhì)量的多西紫杉醇，配制成2mL溶液，其中多西紫杉醇的溶劑為氯仿、無(wú)水乙醇混合液。往(2)中透析后的溶液中加入多西紫杉醇溶劑，用勻漿機(jī)將上述混合液進(jìn)行勻漿，達(dá)到一定粒徑后，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將氯仿、乙醇除凈。再用高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行均質(zhì)。得到粒徑在150-200nm的納米粒子。將納米粒子進(jìn)行真空冷凍干燥。
[0010]優(yōu)選的，步驟(1)中加入的二十二碳六烯酸為2% -10%。
[0011]優(yōu)選的，步驟(1)氯甲酸異丁酯、三正丁胺、N，N-二甲基甲酰胺、二十二碳六烯酸在4°C下的反應(yīng)時(shí)間為20-60mim。
[0012]優(yōu)選的，步驟⑵中加入的白蛋白為2% -10%。
[0013]優(yōu)選的，步驟⑵中N，N-二甲基甲酰胺與水的混合液中兩種化合物的體積比為
[0014]優(yōu)選的，步驟⑵中白蛋白與混合液在4°C條件下的反應(yīng)時(shí)間為8_24h。
[0015]優(yōu)選的，步驟(3)中加入的多西紫杉醇為1% _5%。
[0016]優(yōu)選的，步驟(3)中氯仿與無(wú)水乙醇的混合液中兩種化合物的體積比為1:2-1:10。
[0017]優(yōu)選的，步驟(3)中勻漿的轉(zhuǎn)速為2000-10000rpm，勻漿時(shí)間為2-10min。
[0018]優(yōu)選的，步驟(3)中高壓均質(zhì)的壓力為200-1000bar，均質(zhì)時(shí)間為2-10min。
[0019]本發(fā)明的有益效果:
[0020]1.本發(fā)明試驗(yàn)條件溫和，操作簡(jiǎn)單，無(wú)任何復(fù)雜的合成和除雜過(guò)程。
[0021]2.本發(fā)明將藥物制成納米顆粒，提高了藥物的生物利用度。
[0022]3.本發(fā)明將多西紫杉醇制成水溶性制劑，克服了多西紫杉醇水溶性低的缺點(diǎn)，可以減小由于有機(jī)溶劑帶來(lái)的副作用，有利于其推廣使用。
[0023]4.本發(fā)明使用二十二碳六烯酸作靶標(biāo)，二十二碳六烯酸作為人類(lèi)所需的必須脂肪酸，不會(huì)產(chǎn)生任何副作用，且由于其本身具有抗癌效果，可協(xié)同增強(qiáng)多西紫杉醇的抗癌作用，這為該藥物的推廣使用提供了科學(xué)依據(jù)。
【具體實(shí)施方式】
[0024]實(shí)施例1
[0025](1) 二十二碳六烯酸衍生物的制備:將氯甲酸異丁酯、三正丁胺、N，N_ 二甲基甲酰胺除水，按4:15:300的比例混合在一起，再加入2%二十二碳六烯酸，在4°C下反應(yīng)40min。
[0026](2) 二十二碳六烯酸-白蛋白的制備:按1:3配置N，N_ 二甲基甲酰胺與水的混合液，稱(chēng)取一定量白蛋白溶解于10mLN，N-二甲基甲酰胺、水混合液中，配制成6%的溶液。在4°C條件下，一邊攪拌，一邊逐滴加入步驟(1)中的混合液，反應(yīng)16h。反應(yīng)結(jié)束后，透析3d，透析液為PH7.4的磷酸鹽緩沖液。
[0027](3)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸-白蛋白納米粒子的制備:稱(chēng)取一定質(zhì)量的多西紫杉醇，配制成2mL含3%多西紫杉醇的溶液，其中多西紫杉醇的溶劑為1:6的氯仿、無(wú)水乙醇混合液。往(2)中透析后的溶液中加入多西紫杉醇溶劑，用勻漿機(jī)以6000rpm的轉(zhuǎn)速將上述混合液勻漿6min，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將氯仿、乙醇除凈。再用高壓均質(zhì)機(jī)以600bar的壓力將上述混合液均質(zhì)6min。得到粒徑在150-200nm的納米粒子。將納米粒子進(jìn)行真空冷凍干燥。
[0028]實(shí)施例2
[0029](1) 二十二碳六烯酸衍生物的制備:將氯甲酸異丁酯、三正丁胺、N，N_ 二甲基甲酰胺除水，按4:15:300的比例混合在一起，再加入4%二十二碳六稀酸，在4°C下反應(yīng)40min。
[0030](2) 二十二碳六烯酸-白蛋白的制備:按1:3配置N，N_ 二甲基甲酰胺與水的混合液，稱(chēng)取一定量白蛋白溶解于10mL N，N- 二甲基甲酰胺、水混合液中，配制成4 %的溶液。在4°C條件下，一邊攪拌，一邊逐滴加入步驟(1)中的混合液，反應(yīng)16h。反應(yīng)結(jié)束后，透析3d，透析液為PH7.4的磷酸鹽緩沖液。
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