治療結(jié)腸炎的組合物、藥物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種治療結(jié)腸炎的組合物、藥物及其制備方法，即兩株益生菌與牛初 乳生長因子聯(lián)合使用的藥物，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 結(jié)腸炎又稱非特異性潰瘍性結(jié)腸炎，其種類繁多，引發(fā)原因多樣，并且起病多緩 慢，病情輕重不一，主要臨床表現(xiàn)腹瀉、腹痛、粘液便及脈血便、里急后重、甚則大便秘結(jié)、數(shù) 日內(nèi)不能通大便，時而腹瀉時而便秘，常伴有消瘦乏力等，多反復(fù)發(fā)作。腹痛一般多為隱痛 或絞痛，常位于左下腹或小腹。其它表現(xiàn)有食欲不振、腹脹、惡屯、、嘔吐及肝大等，左下腹可 有壓痛，有時能觸及疫李的結(jié)腸。常見的全身癥狀有消瘦、乏力、發(fā)熱、貧血等。有少部分病 人在慢性的病程中，病情突然惡化或初次發(fā)病就呈暴發(fā)性，表現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉，給人或動物帶來 極大的痛苦。
[0003] 目前治療結(jié)腸炎的方法主要包括藥物治療、營養(yǎng)治療、屯、理治療及手術(shù)治療，其中 藥物治療是最主要的方法。在臨床上用于治療結(jié)腸炎的藥物主要有氨基水楊酸類藥物、腎 上腺糖皮質(zhì)激素類和免疫抑制劑類等。氨基水楊酸類藥物能很好的抑制前列腺素合成，清 除氧自由基從而減輕炎癥反應(yīng)；然而其無法根治結(jié)腸炎，且患者服藥劑量偏大時，易產(chǎn)生諸 多不良反應(yīng)（如：頭疼、惡屯、、白細(xì)胞下降等）。糖皮質(zhì)激素是重度或爆發(fā)性結(jié)腸炎患者的 首選藥；然而該類藥物易導(dǎo)致機(jī)體代謝素亂、水滯留等副作用，可作為應(yīng)急藥物，無法長期 使用。免疫抑制類藥物藥物依賴性大，治療期較長，且可能致毒致癌，副作用較大，所W-般 只作為輔助治療使用?？傮w來說，上述藥物治療見效快、療效好，可緩解結(jié)腸炎患者燃眉之 苦，但仍存在很多問題。首先，無法根治患者結(jié)腸炎，治標(biāo)不治本；其次，不良作用大，易引起 患者頭疼、惡屯、，造成機(jī)體消化系統(tǒng)、血液系統(tǒng)異常；然后，潛在的致毒致癌性；最后，抗生 素類藥物（如應(yīng)用最廣的SAS巧易導(dǎo)致機(jī)體耐藥抗藥性。
[0004] 也有專利報道采用中藥組合物對結(jié)腸炎進(jìn)行治療，如申請?zhí)枮?00710066007. 3的 發(fā)明專利"治療慢性結(jié)腸炎及潰瘍性結(jié)腸炎的藥物及制備方法"，申請?zhí)枮?00610167659. 1 的發(fā)明專利"一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物及其制備方法"，由于運(yùn)些中藥的成分復(fù)雜，療 效慢，療程長，治療效果也難W保證，因此運(yùn)些中藥組合物制成的藥物至今沒有得到大范圍 推廣應(yīng)用。所W對于治療結(jié)腸炎運(yùn)種難W治愈的疾病，研發(fā)一種新的藥物具有十分重要的 意義。雖有文獻(xiàn)報道益生菌可W治療潰瘍性結(jié)腸炎，但是目前還沒有關(guān)于采用益生菌聯(lián)合 牛初乳生長因子聯(lián)合使用治療結(jié)腸炎的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的之一是提供一種治療結(jié)腸炎的組合物，可W有效的治療結(jié)腸炎，并 且毒副作用較小，不易產(chǎn)生抗性。
[0006] 本發(fā)明的另一個目的是提供一種治療結(jié)腸炎的藥物及其制備方法，使用療結(jié)腸炎 的組合物，同樣可W達(dá)到好的效果。
[0007] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：
[0008] 一種治療結(jié)腸炎的組合物，包括益生菌和牛初乳生長因子，所述的益生菌為嗜 酸乳桿菌（Xactobacillusacidophilus)CGMCC10436 和植物乳桿菌（Xactobacillus planta;rum)CGMCC9961，所述的嗜酸乳桿菌菌體數(shù)量占益生菌菌體總數(shù)量的20~80%。
[0009] 優(yōu)選地，所述的嗜酸乳桿菌和植物乳桿菌的菌體數(shù)量比為1 :1。
[0010] 所述的牛初乳生長因子為從牛初乳中提取的生長因子粗提物；所述的益生菌均為 活菌菌體形式，所述的益生菌的活菌菌體由均處于穩(wěn)定初期的乳桿菌液體培養(yǎng)物分別離屯、 收集的菌泥。
[0011] 所述的益生菌菌體用量為2Xl〇i°CRJ/kg，所述的牛初乳生長因子用量為220~ 320mg/kg。即每千克的動物、人體等所用的藥物中嗜酸乳桿菌CGMCC10436和植物乳桿菌 CGMCC9961的總數(shù)量為2Xl〇i°CFU，牛初乳生長因子用量為220~320mg，具體地，可W根據(jù) 實(shí)際情況進(jìn)行計(jì)算，比如，一個重量為20g的大鼠，其用藥中含有嗜酸乳桿菌CGMCC10436和 植物乳桿菌CGMCC9961的總數(shù)量為2XIO9CFU,牛初乳生長因子用量為4. 4~6. 4mg;-個 重量為50kg的人，其用藥中含有嗜酸乳桿菌CGMCC10436和植物乳桿菌CGMCC9961的總數(shù) 量為IXIOi2CRJ,牛初乳生長因子用量為11~16邑。
[0012] 其中，所述的組合物可W制成一切可W保留其活性的物品，如乳品、藥物、食品等。
[0013] 本發(fā)明還公開了一種治療結(jié)腸炎的的藥物，包括前述的組合物。
[0014] 所述的結(jié)腸炎包括潰瘍性結(jié)腸炎、感染性結(jié)腸炎、出血性結(jié)腸炎，并且不限于此。
[0015] 上述治療結(jié)腸炎的藥物的制備方法，包括如下步驟：
[0016] (1)分別將嗜酸乳桿菌和植物乳桿菌在MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)12~16h;
[0017] (2)分別取步驟（1)得到的嗜酸乳桿菌菌液9~11體積份，植物乳桿菌菌液3~ 5體積份，離屯、取菌泥，然后分別將它們?nèi)苡?體積份無菌PBS中，得混合菌泥；
[0018] (3)對牛初乳離屯、脫脂、酸沉酪蛋白、二次超濾、透析及干燥制得牛初乳生長因子 粗提物；
[0019] (4)將牛初乳生長因子粗提物44~64質(zhì)量份加入到上述混合菌泥中，攬拌均勻， 然后加入合適的輔料制成臨床可接受的劑型。運(yùn)里的體積份和質(zhì)量份理解為：如果步驟 (2)中用9~Ilml的嗜酸乳桿菌菌液、3~5ml植物乳桿菌菌液，則對應(yīng)用44~64mg的牛 初乳生長因子粗提物，即體積份/質(zhì)量份=ml/mg。
[0020] 優(yōu)選地，所述治療結(jié)腸炎的藥物的制備方法，包括如下步驟：
[0021] (1)分別將嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌在MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)14h;
[00巧 似分別取步驟（1)得到的嗜酸乳桿菌菌液10體積份，植物乳桿菌菌液4體積份， 離屯、取菌泥，然后分別將它們?nèi)苡?體積份無菌PBS中，得混合菌泥；
[0023] (3)對牛初乳離屯、脫脂、酸沉酪蛋白、二次超濾、透析及干燥制得牛初乳生長因子 粗提物；優(yōu)選地，對牛初乳在4°C離屯、，干燥采用冷凍干燥。
[0024] (4)將牛初乳生長因子粗提物54質(zhì)量份加入到上述混合菌泥中，攬拌均勻，然后 加入合適的輔料制成臨床可接受的劑型。
[0025] 本發(fā)明所采用的嗜酸乳桿菌CGMCC10436的保藏號為CGMCCNo. 10436,保藏日期 為2015年Ol月26號，所述植物乳桿菌CGMCC9961的保藏號為CGMCCNo. 9961，保藏日期 為2014年11月13號，保藏單位均為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中屯、，地 址為北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所。
[00%] 本發(fā)明的有益效果：
[0027] 牛初乳生長因子可通過與腸黏膜細(xì)胞酪氨酸激酶受體結(jié)合，從而促使腸黏膜細(xì)胞 生長和增殖，增加腸絨毛高度，促進(jìn)腸道發(fā)育；并可通過調(diào)控炎性因子水平來促進(jìn)機(jī)體免疫 力。本發(fā)明采用的益生菌可通過與有害菌競爭位點(diǎn)來調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，而且植物乳桿菌 CGMCC9961可產(chǎn)生細(xì)菌素，抑制有害菌的增殖；嗜酸乳桿菌CGMCC10436具有很好的益生作 用。結(jié)果顯示，兩者聯(lián)合使用制成的藥物具有較好的抗結(jié)腸炎作用。并且具有協(xié)同增效的 作用。其效果比單獨(dú)使用兩種菌、單獨(dú)使用牛初乳生長因子效果要好。具體表現(xiàn)在顯著改 善結(jié)腸炎小鼠的表觀狀態(tài)，增加結(jié)腸炎小鼠的體重、結(jié)腸長度，并顯著提高小鼠結(jié)腸組織的 完整性。
【附圖說明】
[0028] 圖1為不同組小鼠宏觀病理學(xué)評分。
【具體實(shí)施方式】
[0029] 本發(fā)明人針對當(dāng)今全球醫(yī)藥領(lǐng)域?qū)Y(jié)腸炎的治療都感到棘手的情況下，依據(jù)益生 菌及生長因子可W增強(qiáng)機(jī)體免疫力，對人體腸道病（如腹瀉等）有很好的治療效果，本發(fā)明 將兩株益生效果較好的乳桿菌活菌菌體與牛初乳生長因子粗提物聯(lián)合制成藥物，用于動物 試驗(yàn)研究，W下是對本發(fā)明的詳細(xì)描述。
[0030] 實(shí)施例僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該 理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可W對本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改 或替換，但運(yùn)些修改和替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。本發(fā)明所采用的各種材料、試劑或 用具如無特殊說明，均可W從市場中獲得。
[0031] 為了證明本發(fā)明的有效性，申請人進(jìn)行了如下試驗(yàn)。 陽〇3引（一）材料與試劑
[0033] 1、培養(yǎng)基：MRS培養(yǎng)基。
[0034]MRS培養(yǎng)基配制：蛋白腺5g/L，牛肉膏5gA，膜蛋白腺lOg/L，酵母粉5g/L，葡萄 糖20g/l，無水乙酸鋼5g/l，巧樣酸氨二胺2g/l，憐酸氨二