癌癥治療的制作方法
【專利說(shuō)明】癌癥治療發(fā)明領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及癌癥治療領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及與mTOR抑制劑聯(lián)用預(yù)防、治療或抑制對(duì)象中腫瘤或轉(zhuǎn)移瘤發(fā)展的方法并涉及用于這類療法的免疫調(diào)節(jié)劑。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來(lái)，人們?cè)絹?lái)越意識(shí)到免疫應(yīng)答在癌癥生物學(xué)中的重要作用，其在非常早期清除許多腫瘤并將那些避免完全清除的腫瘤維持在平衡狀態(tài)中，有時(shí)持續(xù)數(shù)年(Dunn等，Annu Rev Immunol 2004;22:329-360)。具有臨床疾病表現(xiàn)的最終從該平衡相逃逸與免疫應(yīng)答失調(diào)相關(guān)，表現(xiàn)為例如慢性炎癥或免疫抑制。強(qiáng)有力和越來(lái)越多的證據(jù)表明免疫系統(tǒng)在癌癥的發(fā)展、結(jié)構(gòu)性質(zhì)和進(jìn)展方面其關(guān)鍵作用，導(dǎo)致人們重新對(duì)使用免疫治療策略來(lái)治療這類疾病感興趣。迄今為止，開(kāi)發(fā)這類策略的許多嘗試基于使用來(lái)源于患者本身腫瘤或來(lái)源于腫瘤細(xì)胞系的抗原以及轉(zhuǎn)移離體擴(kuò)增的腫瘤抗原特異性細(xì)胞毒性細(xì)胞和抗原呈遞細(xì)胞的群體。
[0003]從1863年開(kāi)始癌癥就與炎癥相關(guān)，當(dāng)年Rudolf Virchow發(fā)現(xiàn)瘤組織中的白細(xì)胞并因此首次將炎癥與癌癥聯(lián)系(Balkwi 11等，Lancet 2001;357:539-545)。從那時(shí)起，慢性炎癥就被認(rèn)為是癌癥的風(fēng)險(xiǎn)因素。這些報(bào)道顯示炎性環(huán)境有利于腫瘤發(fā)展且與腫瘤位點(diǎn)處觀察到的結(jié)果一致。然而，癌癥與炎癥之間的關(guān)聯(lián)不限于慢性炎癥導(dǎo)致的疾病發(fā)生。Schwartsburd(Cancer Met Rev 2003 ;22:95_102)提出慢性炎癥由于腫瘤環(huán)境脅迫而出現(xiàn)且其生成對(duì)免疫系統(tǒng)的防護(hù)。最近證明，腫瘤微環(huán)境通過(guò)趨化因子、細(xì)胞因子、淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞(其參與用于增加血流的血管新生和血管擴(kuò)張、與惡性疾病相關(guān)的免疫抑制和腫瘤轉(zhuǎn)移)來(lái)模擬炎癥位點(diǎn)，顯著支持腫瘤進(jìn)展。此外，除針對(duì)免疫系統(tǒng)進(jìn)行保護(hù)好促進(jìn)癌癥進(jìn)展外，該炎癥位點(diǎn)腫瘤生成微環(huán)境還對(duì)當(dāng)前癌癥治療的成功具有不利影響。
[0004]此外，轉(zhuǎn)移性癌癥細(xì)胞以小集落的形式離開(kāi)腫瘤，含有淋巴細(xì)胞和血小板以及腫瘤細(xì)胞。炎癥通過(guò)建立有利于腫瘤生長(zhǎng)的細(xì)胞因子環(huán)境持續(xù)在轉(zhuǎn)移位點(diǎn)處發(fā)揮作用。
[0005]免疫穩(wěn)態(tài)由嚴(yán)格調(diào)節(jié)的促炎和抗炎信號(hào)的相互作用組成。例如，抗炎信號(hào)的確是導(dǎo)致慢性炎癥和增值性信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。有趣的是，促進(jìn)和抑制腫瘤細(xì)胞增殖的細(xì)胞因子均在腫瘤位點(diǎn)處產(chǎn)生。在癌癥開(kāi)始時(shí)，正是這些多種過(guò)程的作用之間的失衡導(dǎo)致了腫瘤促進(jìn)。
[0006]人們認(rèn)為，對(duì)于治療癌癥而言，最有效的免疫應(yīng)答類型是1型，其支持⑶4+Thl細(xì)胞應(yīng)答和CD8+CTL應(yīng)答的誘導(dǎo)。在癌癥免疫治療過(guò)程中，可以使用免疫刺激劑，其促進(jìn)Thl應(yīng)答的發(fā)展。例如，BCG(卡介苗)，一種分枝桿菌屬的減毒菌株，其被研發(fā)用作針對(duì)結(jié)核桿菌感染的疫苗，也被用于治療多種其他病癥，如膀胱癌和表皮黑素瘤。對(duì)于淺表性膀胱移行細(xì)胞癌，膀胱內(nèi)滴注BCG目前被認(rèn)為是針對(duì)該疾病的一線治療方法。雖然膀胱內(nèi)給予BCG的嚴(yán)重并發(fā)癥是不常見(jiàn)的，但其可在個(gè)體中發(fā)生且范圍可以是從局部癥狀至肝炎、肺炎、膿毒血癥和死亡。SRL-172是一種熱殺死的母牛分枝桿菌(M.vaccae)制劑，其是BCG同屬的成員但具有額外的免疫性質(zhì)，其誘導(dǎo)Th2應(yīng)答的免疫調(diào)節(jié)和1型增強(qiáng)作用。
[0007]迄今為止，開(kāi)發(fā)有效的針對(duì)癌癥的免疫治療的嘗試的主要障礙是無(wú)法破壞癌癥位點(diǎn)處的免疫抑制并恢復(fù)正常的免疫反應(yīng)性網(wǎng)絡(luò)。免疫治療的生理方法是標(biāo)準(zhǔn)化免疫反應(yīng)性從而識(shí)別內(nèi)源性腫瘤抗原并針對(duì)攜帶這些抗原的細(xì)胞發(fā)展出有效的細(xì)胞溶解性應(yīng)答。
[0008]伴隨化療和放療作用的抗癌免疫應(yīng)答已被詳細(xì)綜述并顯示這類應(yīng)答對(duì)治療成功而言十分關(guān)鍵，其消除殘留癌細(xì)胞并將微小轉(zhuǎn)移瘤維持在休眠狀態(tài)(Zitvogel等，J ClinInvest 2008 ; 118:1991-2001)。然而，該文獻(xiàn)清楚地說(shuō)明，沒(méi)有簡(jiǎn)單的免疫治療策略可用于持續(xù)增強(qiáng)這類免疫應(yīng)答。
[0009]本領(lǐng)域中已嘗試提供用于治療腫瘤的切除和化療組合治療方法。W02000064476和US20050187207公開(kāi)了將免疫佐劑與光動(dòng)力治療聯(lián)用以治療轉(zhuǎn)移性腫瘤。這些文獻(xiàn)公開(kāi)該佐劑包含分枝桿菌細(xì)胞壁骨架和脫-3-0-?；珹并通過(guò)注射給藥至腫瘤。Castano等(Nat Rev Cancers 2006 ;6:535)、Korbelik等(J Photochem Photob1l 1998 ；44:151)以及Korbelik等(J Photochem Photob1l 2001 ；73:403)也公開(kāi)了使用光動(dòng)力治療并給予作為免疫佐劑的分枝桿菌細(xì)胞壁提取物來(lái)治療腫瘤。分枝桿菌細(xì)胞壁含有諸如海藻糖二霉菌酸酯和胞壁酰二肽的化合物，其是已知的免疫刺激劑?，F(xiàn)有技術(shù)組合治療中使用的分枝桿菌細(xì)胞壁提取物也引發(fā)促炎細(xì)胞因子、反應(yīng)性氮物質(zhì)并招募淋巴細(xì)胞，其與包括重量損失(TNF-α介導(dǎo)的惡病質(zhì)所致)的病理學(xué)相關(guān)，具有相關(guān)脂血癥、低血糖和腹膜炎，并在胃腸道(Gltract)中具有缺血性和出血性損傷。現(xiàn)有技術(shù)組合治療可因此使炎癥應(yīng)答惡化并具有嚴(yán)重的副作用。
[0010]EP2085466公開(kāi)了給予減毒活微生物與癌癥藥物(如雷帕霉素)的概念。該減毒微生物必須保留感染巨噬細(xì)胞的能力，從而在巨噬細(xì)胞中誘導(dǎo)凋亡。
[0011]W02006/109300公開(kāi)了分枝桿菌組分在供體細(xì)胞分離前后處理供體細(xì)胞以重新給予患者的用途。該發(fā)明旨在處理供體細(xì)胞以減輕移植物對(duì)抗宿主疾病的作用。
[0012]本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)中觀察到的針對(duì)腫瘤的組合治療相關(guān)的問(wèn)題，具體而言是提供對(duì)繼發(fā)性癌癥的治療，該繼發(fā)性癌癥在遠(yuǎn)離原發(fā)性癌癥的位點(diǎn)處通過(guò)原發(fā)性癌癥的轉(zhuǎn)移而形成。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013]本發(fā)明提供了一種通過(guò)使用mTOR抑制劑來(lái)治療和/或預(yù)防癌癥的有效方法，該mTOR抑制劑與全細(xì)胞分枝桿菌協(xié)同作用。本發(fā)明因此提供了一種mTOR抑制劑與特定類型的免疫療法的組合療法。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，兩種療法的組合是協(xié)同的，超過(guò)單個(gè)使用的各療法的簡(jiǎn)單疊加作用。
[0014]在本發(fā)明的第一方面中，具有與mTOR抑制劑聯(lián)用的用于治療腫瘤疾病的全細(xì)胞分枝桿菌，該分枝桿菌是非致病性熱殺死的分枝桿菌。
[0015]在本發(fā)明的第二方面中，提供了一種預(yù)防、治療、降低、抑制和/或控制對(duì)象中原發(fā)性瘤、腫瘤或癌癥的方法，所述方法包括同時(shí)、單獨(dú)或依次給予該對(duì)象治療有效量的(i)mTOR抑制劑和(ii)全細(xì)胞分枝桿菌。
[0016]在本發(fā)明的第三方面中，提供了一種預(yù)防、治療、降低、抑制和/或控制不同于原發(fā)性瘤、腫瘤或癌癥的一個(gè)或多個(gè)位點(diǎn)處原發(fā)性瘤、腫瘤或癌癥轉(zhuǎn)移的形成或建立的方法，所述方法包括同時(shí)、單獨(dú)或依次給予該對(duì)象治療有效量的(i)mT0R抑制劑和(ii)全細(xì)胞分枝桿菌，該分枝桿菌是非致病性熱殺死的分枝桿菌。
[0017]本發(fā)明因此提供了一種mTOR抑制劑與特定類型的免疫療法的組合療法。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，兩種療法的組合是協(xié)同的，超過(guò)單個(gè)使用的各療法的簡(jiǎn)單疊加作用。
【附圖說(shuō)明】
[0018]參考以下附圖描述本發(fā)明，其中:
[0019]圖1顯示原位注射KPC細(xì)胞后，在小鼠(KC小鼠)自發(fā)性胰腺癌模型中，共同給予或未共同給予雷帕霉素的情況下IMM-101對(duì)存活的影響。
[0020]發(fā)明詳述
[0021]術(shù)語(yǔ)“腫瘤”、“癌癥”、“瘤”和“腫瘤疾病”可互換使用并表示其生長(zhǎng)、增殖或存活高于正常對(duì)等細(xì)胞的細(xì)胞群或細(xì)胞，例如細(xì)胞增值性或分化性疾病。通常，該增長(zhǎng)是不受控的。術(shù)語(yǔ)“惡性腫瘤”指侵入周邊組織。術(shù)語(yǔ)“轉(zhuǎn)移瘤”指腫瘤、癌癥或瘤擴(kuò)散或傳播至對(duì)象內(nèi)的其他位點(diǎn)、位置或區(qū)域，這些位點(diǎn)、位置或區(qū)域不同于原發(fā)性腫瘤或癌癥。
[0022]術(shù)語(yǔ)“mTOR”指雷帕霉素的絲氨酸-蘇氨酸激酶哺乳動(dòng)物目標(biāo)。目前存在兩種已識(shí)別的mTOR的多分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)形式，mTOR復(fù)合物1 (mTORCl)和mTOR復(fù)合物2 (mT0RC2)。
[0023]術(shù)語(yǔ)“抑制劑”具有本領(lǐng)域中使用的常規(guī)含義，即能夠結(jié)合酶或降低酶活性的實(shí)體。優(yōu)選地，mTOR抑制劑能夠結(jié)合并防止或基本防止mTORCl從其組分中形成，從而引發(fā)mTORCl活性的降低抑制劑還可用于以類似作用結(jié)合mT0RC2。更優(yōu)選地，該mTOR抑制劑選自西羅莫司、依維莫司、利達(dá)莫司(ridaforoiimus)、坦西莫司或二甲雙胍，或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物、立體異構(gòu)體、包合物、前藥、類似物或衍生物變體和/或其組合。最優(yōu)選地，該mTOR抑制劑是上文列舉的西羅莫司或其衍生物。
[0024]本文所用術(shù)語(yǔ)“患者”和/或“對(duì)象”可互換使用。
[0025]如同本文中定義的那樣，“同時(shí)”給藥包括在各自給藥的約2小時(shí)或約1小時(shí)或更少時(shí)間內(nèi)給予分枝桿菌和mTOR抑制劑，更優(yōu)選地在同時(shí)給藥。
[0026]如同本文中定義的那樣，“單獨(dú)”給藥包括相隔超過(guò)約12小時(shí)、或約8小時(shí)、或約6小時(shí)或約4小時(shí)或約2小時(shí)給予分枝桿菌和mTOR抑制劑。
[0027]如同本文中定義的那樣，“依次”給藥包括各自以多個(gè)等分試樣和/或劑量和/或在單獨(dú)的時(shí)刻給予分枝桿菌和mTOR抑制劑。任選地，對(duì)象在給予mTOR抑制劑前給予分枝桿菌，并在給予mTOR抑制劑后持續(xù)給予分枝桿菌。或者，在治療腫瘤復(fù)發(fā)后將分枝桿菌持續(xù)施用于對(duì)象。
[0028]雷帕霉素(mTOR)通路的哺乳動(dòng)物目標(biāo)是細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的關(guān)鍵調(diào)控因子且該領(lǐng)域的研究表明mTOR調(diào)節(jié)異常在多種癌癥中起關(guān)鍵作用。mTOR似乎在營(yíng)養(yǎng)物或有絲分裂原(如生長(zhǎng)因子)導(dǎo)致的信號(hào)傳導(dǎo)中起關(guān)鍵作用以調(diào)控翻譯。理解作為許多細(xì)胞過(guò)程的調(diào)控因子的mTOR的功能及其作為治療目標(biāo)的潛力背后的科學(xué)為若干類型的癌癥提供了治療可能性。mTOR是一種290kDa絲氨酸-蘇氨酸激酶，其能夠整合來(lái)自營(yíng)養(yǎng)物或生長(zhǎng)因子刺激的信號(hào)，并由此調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)或細(xì)胞循環(huán)進(jìn)展。mTOR是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-激酶-相關(guān)激酶(PIKK)超家族的成員，由被分類為高度保守結(jié)構(gòu)域的2549個(gè)氨基酸組成。mTOR是一種胞內(nèi)激酶，其通過(guò)作用于mRNA翻譯的機(jī)制來(lái)控制蛋白質(zhì)的生產(chǎn)。這些蛋白質(zhì)包括對(duì)細(xì)胞代謝、細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞分裂和對(duì)細(xì)胞脅迫(如缺氧或DNA損失)應(yīng)答至關(guān)重要的若干過(guò)程的重要組分。
[0029]mTOR感知細(xì)胞環(huán)境內(nèi)的生長(zhǎng)條件并幫助細(xì)胞對(duì)該環(huán)境中的變化進(jìn)行應(yīng)答?；钚詍TOR直接通過(guò)其對(duì)細(xì)胞循環(huán)調(diào)控因子的作用并間接通過(guò)維持向細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)物供應(yīng)(通過(guò)產(chǎn)生營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)運(yùn)體)和向細(xì)胞環(huán)境的營(yíng)養(yǎng)物供應(yīng)(通過(guò)促進(jìn)血管生成)來(lái)協(xié)調(diào)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中的應(yīng)答。mTOR的激活意味著一個(gè)決策點(diǎn)，其考慮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的基礎(chǔ)材料(如氨基酸、葡萄糖、能量)或來(lái)自其他細(xì)胞和組織的生長(zhǎng)調(diào)控信號(hào)(如激素、生長(zhǎng)因子)的可用性，同時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞脅迫(如缺氧、DNA損傷、熱休克、外部pH、滲透壓、氧化脅迫)的狀態(tài)。此時(shí)，細(xì)胞被保護(hù)免于在細(xì)胞內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物或能量供應(yīng)不充分的條件下由細(xì)胞外信號(hào)起始生長(zhǎng)和增殖。
[0030]生長(zhǎng)促進(jìn)通路的上游是匯聚于mTOR的關(guān)鍵分子，其通常在癌癥中被以某些方式去調(diào)控。癌癥中發(fā)現(xiàn)的若干突變生成激活mTOR開(kāi)關(guān)的