一種海嵩子多酚的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及功能性食品或生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種海嵩子多酚的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 海蒿子Sargassum confusum C.Ag.是生長在暖溫帶水域的植物，我國沿海資源豐 富。海嵩子富含生物活性物質(zhì)，具有很高的保健和藥用價值。海蒿子多糖對白血病細胞株有 毒副作用，可抑制腫瘤細胞的增殖。褐藻糖膠也是主要的活性成分之一，現(xiàn)代研究表明，褐 藻糖膠具有抗腫瘤、抗病毒、抗血栓、抗氧化、調(diào)節(jié)血脂、抗輻射和抑制補體激活等多種生理 功能。我國海嵩子資源豐富，但由于對海嵩子綜合開發(fā)的研究起步較晚，對其生物活性的研 究也大多集中在海嵩子多糖，對海嵩子多酚的未見報道。
[0003] 多酸(Phlorotannins)是一類結(jié)構(gòu)獨特的天然化合物，其基本結(jié)構(gòu)單元是間苯三 酚，具有抑菌、抗凝血、降血脂、抗腫瘤、抗氧化等生物活性功能。根據(jù)其特有的抗氧化活性 提取海嵩子多酚進行加工，從而開發(fā)功能性產(chǎn)品如抗氧化劑，具有很廣闊的市場前景。褐藻 類在我國沿海品種紛繁的經(jīng)濟資源中占據(jù)顯著地位，是我國三大經(jīng)濟海藻之一，海嵩子多 酚的提取制備技術(shù)研究對于充分開發(fā)海藻資源具有重要意見，為海嵩子多酚功能性產(chǎn)品開 發(fā)提供一定的理論依據(jù)和技術(shù)指導(dǎo)，為拓展海嵩子深加工產(chǎn)品領(lǐng)域提供一條有效途徑。
[0004] 海嵩子的干燥，如采取傳統(tǒng)的干燥方法包括曬干、烘干、晾干、微波干燥和冷凍干 燥。然而幾種方法并不適于海嵩子的干燥。烘干、晾干和微波干燥易造成海嵩子中多酚的損 失;海嵩子在晾干過程因為表面微生物多干燥速度慢，容易腐敗變質(zhì);冷凍干燥存在處理速 度慢、成本高等問題，無法普及使用。
[0005] 微波輔助提取、超聲輔助提取，可以縮短浸提時間，提取率高，操作簡便，提取結(jié)構(gòu) 不易破壞，但成本高、能耗大，目前普遍采用的提取多酚的方法為有機溶劑浸提法。影響海 嵩子多酚提取的因素還有溶劑體積分數(shù)、液料比、浸提溫度、浸提時間、浸提次數(shù)等，原材料 的前處理也影響多酚物質(zhì)的浸出，然而目前采用傳統(tǒng)實驗設(shè)計方法進行海嵩子多酚的提取 工藝存在實驗次數(shù)多，實驗耗時長、海嵩子多酚提取率低、人力物力投入較大等不足，不利 于工業(yè)化生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種海嵩子多酚的制備方法，具體 為一種保護海嵩子中多酚干燥過程免受破壞，干燥速度較快，先以電解水對海嵩子表面減 菌處理，再以酒精消毒進一步減少海嵩子表面的微生物，以滾筒輾壓破壞海嵩子緊密結(jié)構(gòu) 利于水分析出增加干燥速度，再輔以分段烘干，可以較快速度干燥海嵩子又不容易腐敗。同 時本發(fā)明以較少的實驗次數(shù)和較短的時間對所選實驗參數(shù)進行全面分析的實驗設(shè)計從而 獲得的海嵩子多酚的提取工藝。
[0007] 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下： (1)先用潔凈海水把采集的新鮮海嵩子表面的雜質(zhì)和沙粒沖洗干凈，電解水浸泡淡化 和減菌，再用75%酒精浸燙泡消毒3-5S，瀝干。
[0008] (2)海嵩子攤鋪于瓷盤，厚2cm-4cm，用滾筒輕輕碾壓3-5min，以海嵩子成蔫狀、不 出汁為宜。
[0009] (3 )置冷風干燥箱，調(diào)整溫度20-30°C，風速2-5m/s，濕度40%以下，冷風干燥至水分 含量低于12-15%;調(diào)整溫度至5-10°C，風速2-5m/s，濕度30%以下，冷風干燥至水分含量低于 6%以下。
[0010] (4)用粉碎機將干海嵩子粉碎成粗粉，然后用振動式藥物超微粉碎機在_10°C條件 下粉碎8-15min，真空密封，-18°C、避光貯藏備用。
[0011 ](5)稱取干燥的海嵩子粉末于IOmL離心管中，與0%~95%乙醇溶液以1:5~30的料 液比均勻混合，浸提20~120min，隔3~6min振蕩一次。
[0012] (6)冷卻后，4000r/min離心8~12min，將上清液轉(zhuǎn)移至容量瓶。
[0013] (7)殘渣再用0%~95%乙醇溶液提取一次，重復(fù)浸提1~3次，合并提取液定容到 IOmL; (8)利用響應(yīng)面法設(shè)計篩選出海嵩子多酚的最優(yōu)提取工藝，對浸提液體積分數(shù)，浸提時 間，料液比三個影響海嵩子多酚提取過程的關(guān)鍵因素進行三因素三水平的實驗設(shè)計，得到 的最佳的提取工藝為:將海嵩子粉末與40%乙醇溶液以1:20的料液體積比均勻混合，在30°C 水浴中浸提46min，隔4min振蕩一次，4000 r/min浸提液離心10min，將上清液轉(zhuǎn)移至容量 瓶;殘渣再用40%乙醇溶液提取一次，重復(fù)浸提2次;合并提取液，得海嵩子多酚提取液，海嵩 子多酚的得率為1.304%。
[0014] 所述的篩選方法是采用Box-Benhnken響應(yīng)面設(shè)計法優(yōu)化海嵩子多酚最佳提取工 藝的方法。相比正交試驗要進行33組實驗，響應(yīng)面法只需要進行15組實驗對海嵩子多酚的 提取條件乙醇濃度、提取時間、料液比3個因素進行優(yōu)化，獲得了最佳的提取工藝及提取率， 提高了提取效率和海嵩子原料的利用率，對于海嵩子多酚的工業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用具有實際的 意義。
[0015]海嵩子綜上所述，本發(fā)明采用的Box-Benhnken響應(yīng)面設(shè)計法比傳統(tǒng)的正交設(shè)計法 相比，對3個影響因子進行三水平，以更少的實驗次數(shù)就可得到結(jié)果，大大縮短了實驗時間， 節(jié)約了經(jīng)濟和人力成本。通過響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化乙醇濃度、提取時間和料液比的最優(yōu)組合，得 到了海嵩子多酚最佳的提取工藝。
【具體實施方式】
[0016]結(jié)合具體實施例進行說明。
[0017] 實施例1。
[0018] -、通過以下步驟進行海嵩子多酚的提取和含量測定。
[0019] 1、樣品準備和前處理:先用潔凈海水把采集的新鮮海嵩子表面的雜質(zhì)和沙粒沖洗 干凈，電解水浸泡淡化和減菌，再用75%酒精浸燙泡消毒3-5S，瀝干。海嵩子攤鋪于瓷盤，厚 2cm-4cm，用滾筒輕輕碾壓3-5min，以海嵩子成蔫狀、不出汁為宜。置冷風干燥箱，調(diào)整溫度 20-30°(3，風速2-5111/8，濕度40%以下，冷風干燥至水分含量低于12-15% ;調(diào)整溫度至5-10°(3， 風速2-5m/s，濕度30%以下，冷風干燥至水分含量低于6%以下。粉碎備用。
[0020] 2、稱取干燥的海嵩子粉末0.2g于IOmL離心管中，與在10~30°C的0%~95%乙醇溶液 以1:5~30的料液比均勻混合，在30°(3水浴中浸提20~1201^11，隔3~61^11振蕩一次，冷卻后， 4000r/min離心8~12min，將上清液轉(zhuǎn)移至容量瓶。殘渣再用0%~95%乙醇溶液提取一次，重 復(fù)浸提1~3次，合并提取液定容到10mL，然后按一定稀釋倍數(shù)稀