一種殼聚糖復(fù)合n-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯抗凝血材料的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種殼聚糖復(fù)合N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯抗凝血材料的制備方法，屬于抗凝血材料制備領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]在人體正常的循環(huán)系統(tǒng)中，它是生理性止血的重要環(huán)節(jié)。但是在血管壁受損、血液成分改變或血流異常時(shí)，會(huì)引發(fā)凝血，而導(dǎo)致血栓形成。血栓形成已被證實(shí)
是引起心肌梗死和中風(fēng)等各類心、腦血管疾病死亡的主要原因。除了人體循環(huán)系統(tǒng)中發(fā)生的凝血反應(yīng)外，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，不斷產(chǎn)生新型的能夠替換病理性人體器官的人造器官，這些人工器官在安裝手術(shù)過(guò)程中引發(fā)的凝血反應(yīng)是導(dǎo)致手術(shù)失敗的主要原因。因此，為了預(yù)防血栓形成，開(kāi)發(fā)能夠阻止血液凝固的抗凝制劑已成為藥物研發(fā)的重要任務(wù)。
[0003]肝素是目前臨床上抗凝血效果最好的抗凝劑之一，它能與很多凝血因子，如凝血因子、凝血酶原、凝血酶等，形成穩(wěn)定的復(fù)合物，該復(fù)合物能夠抑制凝血因子的活性，從而具有良好的抗凝血功能。但由于長(zhǎng)鏈肝素分子特異識(shí)別性低，能與凝血因子以外的蛋白質(zhì)相結(jié)合，長(zhǎng)期服用，可能誘發(fā)高血鉀或出血癥等副作用；而且肝素不能人工合成，價(jià)格非常昂貴。殼聚糖具有類肝素的結(jié)構(gòu)，而且羧基是抗凝血作用中的重要基團(tuán)，我國(guó)具有豐富殼聚糖和氨基酸，它們都具有優(yōu)良的生物相容性和可降解性，所以通過(guò)對(duì)殼聚糖進(jìn)行改性和優(yōu)化，可以有效地代替肝素的作用，所以制備一種有效的殼聚糖復(fù)合抗凝血材料很有必要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題:針對(duì)目前殼聚糖制備抗凝血材料時(shí)在血液中濃度較低，對(duì)其硫酸酯化和羧甲基化時(shí)污染環(huán)境且與人體相容性較差的問(wèn)題，提供了一種通過(guò)將氨基酸改性制備N(xiāo)-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯，隨后對(duì)殼聚糖進(jìn)行脫乙酰處理復(fù)合改性制備殼聚糖復(fù)合N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯抗凝血材料，可以提高人體系統(tǒng)相容性，有效的對(duì)抗凝血進(jìn)行進(jìn)行提高。
[0005]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用如下所述的技術(shù)方案是:
(1)按重量份數(shù)計(jì)，選取20?35份的甘氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽、20?25份的二苯亞甲胺和45?55份的二氯甲烷，在20?30°C下，按600?800r/min的轉(zhuǎn)速攪拌混合20?24h ；
(2)待其混合攪拌完成后，對(duì)其抽濾并收集濾液，隨后對(duì)其旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，收集結(jié)晶，隨后按乙醚和結(jié)晶體質(zhì)量比5:1，將結(jié)晶溶解至乙醚中，并用去離子水和質(zhì)量濃度為26.5%的鹽水分別洗滌3?5次，待洗滌完成后，用無(wú)水硫酸鈉干燥10?12h，待干燥完成后，對(duì)其減壓抽濾，并收集濾液，使其減壓濃縮重結(jié)晶制備得N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯，備用；
(3)選取100mL的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%的氫氧化鈉溶液置于250mL的燒杯中，并將燒杯置于60?80°C恒溫水浴下加熱10?15min，隨后添加10?15g殼聚糖于燒杯中，在600?800r/min下攪拌反應(yīng)2?3h; (4)待反應(yīng)完成后，對(duì)其抽濾并收集濾餅，隨后用去離子水洗滌至pH為7.0，在60?80°C烘箱中干燥6?8h，制備得干燥脫乙酰殼聚糖，隨后按固液質(zhì)量比1: 10，將脫乙酰殼聚糖與異丙醇在燒杯中攪拌混合，使其充分溶脹2?3h，隨后繼續(xù)添加總質(zhì)量20?30%的質(zhì)量濃度為40%的氫氧化鈉溶液于燒杯中，在-12?-10°C下攪拌混合20?24h，制備得改性殼聚糖備用；
(5)按重量份數(shù)計(jì)，選取65?85份的蒸餾水、7?17份的N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯和8?18份的環(huán)氧氯丙烷置于三口燒瓶中，在20?30°C下，用質(zhì)量濃度為40%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至9.0?9.2;
(6)隨后將其置于50?60°C下水浴加熱，使其回流反應(yīng)并每隔0.5h滴加1?2mL的環(huán)氧氯丙燒，待反應(yīng)溶液完全澄清即可停止滴加，待滴加完成后，繼續(xù)加熱反應(yīng)2?3h，制備得N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯改性中間體溶液；
(7)按去離子水和改性殼聚糖質(zhì)量比為10:1，將改性殼聚糖添加至去離子水中攪拌混合，制備得殼聚糖溶液，隨后在50?60°C水浴加熱下，將殼聚糖溶液滴加至N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯改性中間體溶液中，滴加速度為lmL/min，滴加時(shí)間為25?30min，待滴加完成后，對(duì)其抽濾并收集濾渣，用去離子水洗滌至pH為7.0，并置于60?80°C烘箱中干燥6?8h，即可制備得一種殼聚糖復(fù)合N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯抗凝血材料。
[0006]本發(fā)明的應(yīng)用方法是:將制備出的殼聚糖復(fù)合N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯抗凝血材料涂覆于內(nèi)壁，通過(guò)浸涂的方式，使有機(jī)硅抗凝血涂層材料均勻涂覆于管內(nèi)壁，同時(shí)減小溶劑對(duì)管的損傷，控制好溶液的涂覆時(shí)間。若時(shí)間稍長(zhǎng)，二氯甲烷將使管溶脹、變軟、內(nèi)壁發(fā)勃。當(dāng)二氯甲烷揮發(fā)后將萃取出管中的增塑劑，管子變硬、變大，當(dāng)用材料對(duì)浸涂沖刷完畢后，由于二氯甲烷的沸點(diǎn)低，很快就可以從管表面揮發(fā)完，使殼聚糖復(fù)合N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯抗凝血材料能涂覆于管表面，自然成膜。
[0007]本發(fā)明與其他方法相比，有益技術(shù)效果是:
(1)本發(fā)明通過(guò)對(duì)殼聚糖復(fù)合改性氨基酸，大大提高了與人體的相容性，人體使用無(wú)排斥反應(yīng)；
(2)通過(guò)殼聚糖與氨基酸進(jìn)行制備，綠色環(huán)保無(wú)污染。
【具體實(shí)施方式】
[0008]首先按重量份數(shù)計(jì)，選取20?35份的甘氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽、20?25份的二苯亞甲胺和45?55份的二氯甲烷，在20?30°C下，按600?800r/min的轉(zhuǎn)速攪拌混合20?24h;待其混合攪拌完成后，對(duì)其抽濾并收集濾液，隨后對(duì)其旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，收集結(jié)晶，隨后按乙醚和結(jié)晶體質(zhì)量比5:1，將結(jié)晶溶解至乙醚中，并用去離子水和質(zhì)量濃度為26.5%的鹽水分別洗滌3?5次，待洗滌完成后，用無(wú)水硫酸鈉干燥10?12h，待干燥完成后，對(duì)其減壓抽濾，并收集濾液，使其減壓濃縮重結(jié)晶制備得N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯，備用；選取100mL的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%的氫氧化鈉溶液置于250mL的燒杯中，并將燒杯置于60?80°C恒溫水浴下加熱10?15min，隨后添加10?15g殼聚糖于燒杯中，在600?800r/min下攪拌反應(yīng)2?3h;待反應(yīng)完成后，對(duì)其抽濾并收集濾餅，隨后用去離子水洗滌至pH為7.0，在60?80°C烘箱中干燥6?8h，制備得干燥脫乙酰殼聚糖，隨后按固液質(zhì)量比1:10，將脫乙酰殼聚糖與異丙醇在燒杯中攪拌混合，使其充分溶脹2?3h，隨后繼續(xù)添加總質(zhì)量20?30%的質(zhì)量濃度為40%的氫氧化鈉溶液于燒杯中，在-12?-10°C下攪拌混合20?24h，制備得改性殼聚糖備用；按重量份數(shù)計(jì)，選取65?85份的蒸餾水、7?17份的N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯和8?18份的環(huán)氧氯丙烷置于三口燒瓶中，在20?30°C下，用質(zhì)量濃度為40%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至9.0?9.2;隨后將其置于50?60°C下水浴加熱，使其回流反應(yīng)并每隔0.5h滴加1?2mL的環(huán)氧氯丙烷，待反應(yīng)溶液完全澄清即可停止滴加，待滴加完成后，繼續(xù)加熱反應(yīng)2?3h，制備得N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯改性中間體溶液;待反應(yīng)完成后，按去離子水和改性殼聚糖質(zhì)量比為10:1，將改性殼聚糖添加至去離子水中攪拌混合，制備得殼聚糖溶液，隨后在50?60°C水浴加熱下，將殼聚糖溶液滴加至N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯改性中間體溶液中，滴加速度為lmL/min，滴加時(shí)間為25?30min，待滴加完成后，對(duì)其抽濾并收集濾渣，用去離子水洗滌至pH為7.0，并置于60?80°C烘箱中干燥6?8h，即可制備得一種殼聚糖復(fù)合N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯抗凝血材料。
[0009]實(shí)例1
首先按重量份數(shù)計(jì)，選取20份的甘氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽、25份的二苯亞甲胺和55份的二氯甲烷，在20°C下，按600r/min的轉(zhuǎn)速攪拌混合20h;待其混合攪拌完成后，對(duì)其抽濾并收集濾液，隨后對(duì)其旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，收集結(jié)晶，隨后按乙醚和結(jié)晶體質(zhì)量比5:1，將結(jié)晶溶解至乙醚中，并用去離子水和質(zhì)量濃度為26.5%的鹽水分別洗滌3次，待洗滌完成后，用無(wú)水硫酸鈉干燥10h，待干燥完成后，對(duì)其減壓抽濾，并收集濾液，使其減壓濃縮重結(jié)晶制備得N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯，備用;選取100mL的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%的氫氧化鈉溶液置于250mL的燒杯中，并將燒杯置于60°C恒溫水浴下加熱lOmin，隨后添加10g殼聚糖于燒杯中，在600r/min下攪拌反應(yīng)2h;待反應(yīng)完成后，對(duì)其抽濾并收集濾餅，隨后用去離子水洗滌至pH為7.0，在60°C烘箱中干燥6h，制備得干燥脫乙酰殼聚糖，隨后按固液質(zhì)量比1:10，將脫乙酰殼聚糖與異丙醇在燒杯中攪拌混合，使其充分溶脹2h，隨后繼續(xù)添加總質(zhì)量20%的質(zhì)量濃度為40%的氫氧化鈉溶液于燒杯中，在-12°C下攪拌混合20h，制備得改性殼聚糖備用；按重量份數(shù)計(jì)，選取65份的蒸餾水、17份的N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯和18份的環(huán)氧氯丙烷置于三口燒瓶中，在20°C下，用質(zhì)量濃度為40%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至9.0;隨后將其置于50°C下水浴加熱，使其回流反應(yīng)并每隔0.5h滴加lmL的環(huán)氧氯丙烷，待反應(yīng)溶液完全澄清即可停止滴加，待滴加完成后，繼續(xù)加熱反應(yīng)2h，制備得N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯改性中間體溶液;按去離子水和改性殼聚糖質(zhì)量比為10:1，將改性殼聚糖添加至去離子水中攪拌混合，制備得殼聚糖溶液，隨后在50°C水浴加熱下，將殼聚糖溶液滴加至N-二苯亞甲基-氨基-甘氨酸芐酯改性中間體溶液中，滴加速度為lmL/min，