31.85(s),127.58(s),85.77(s),82.24(s),66.79(s),66.55(s),65.94(s),56.97 (s),54.25(s),52.72(s),52.54(s),51.71(s),45.61(s),40.48(s),38.38(s),38.16(s), 34.85(s),33.36(s),29.67(s),28.80(s),26.53(s),25.32(s),23.87(s),22.13(s),20.88 (s),20.38(s),19.82(s),18.51(s),17.93(s),14.89(s).
[0045] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C4抽69化08:729.5054;found:729.5051。
[0047] 實施例4 Schiglautone A的0-(二徑乙胺基）乙基衍生物的合成 [004引將化合物II(358mg，0.5mmol)溶于15mL乙臘，加入無水碳酸鐘(0.345g，2.5mmol)， 艦化鐘(0. 084g，0.5mmo 1)和二乙醇胺（1.0514g，1 Ommo 1)，混合物加熱回流化。反應結(jié)束后 將反應液倒入冷水中，用二氯甲燒萃取=次，合并有機相，依次用水和飽和食鹽水洗涂，無 水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑。產(chǎn)物用硅膠柱層析純化(石油酸/丙酬100:1，v/v)，得到 Schiglautone A的0-(二徑乙胺基）乙基衍生物的淡黃色固體(0.199g,52% )。
[0049] Ih 醒R(500MHz，DMS0-d6)Sl7.77(s，lH)，6.00(s，lH)，5.40(s，lH)，5.20(s，lH), 3.37(d，J=17.8Hz，4H)，3.28(s，W)，2.87(s，lH)，2.51(d，J = 6.5Hz，4H)，2.43(s，8H)， 2.24(s，2H)，2.06(d，J=12.7Hz，2H)，1.76-1.68(m，5H)，1.57(s，lH)，1.53-1.39(m，細）， 1.36(s，lH)，1.24(s，lH)，1.20-1.14(m，3H)，l.ll(s，lH)，0.94-0.82(m，10H)，0.80(s，3H)， 0.76(s，3H)，0.72(d J = 20.0Hz，3H).
[0050] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)S211.39(s),208.98(s),169.80(s),160.73(s),143.02 (s),131.42(s),127.05(s),85.91(s),82.25(s),66.70(s),65.63(s),58.62(s),56.55 (s),56.61(s),53.30(s),52.45(s),51.52(s),45.29(s),40.06(s),38.52(s),38.17(s), 34.73(s),33.17(s),29.35(s),28.38(s),26.34(s),25.00(s),23.45(s),22.05(s),20.67 (s)，20.07(s)，19.31(s)，18.41(s)，17.73(s)，14.59(s).
[0051] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C42出3N2〇io:765.5265;found:765.5261。
S油igla山one A的0-(二超乙胺基)己基巧生物 [0化3] 實施例5 Schiglautone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物（IV)的合成 [0054] 將實施例4所獲得的Schiglautone A的0-(二徑乙胺基）乙基衍生物（382mg， 0.5mmol)溶于8mL氯仿，逐滴加入氯化亞諷(0.238g，2mmol)，反應物加熱回流化。將反應物 冷卻至室溫，滴加甲醇分解過量的氯化亞諷，減壓濃縮除去溶劑。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化 (石油酸/丙酬l〇〇:l，v/v)，得到化合物IV的淡黃色膠狀固體(0.297g，71%)。
[0055] Ih 醒R(500MHz，DMS0-d6)Sl3.87(s，lH)，6.01(s，lH)，5.50(d，J = 8.4Hz，2H)， 3.61(s，4H)，3.55(s，4H)，3.45(s，2H)，3.40(s，2H)，2.98(s，lH)，2.73(d J=17.4Hz，4H), 2.67-2.57(m,6H),2.54(s,2H),2.40(s,lH),2.10(s,lH),1.99(s,2H),1.78(s,lH),1.73 (d，J=16.9Hz，4H)，1.58(d，J = 3.0Hz，2H)，1.46(d，J = 3.0Hz，2H)，1.43(s，lH)，1.37(s， lH)，1.22(s，lH)，1.17(dd，J=18.9，ll.lHz，4H)，0.95-0.83(m，10H)，0.80(d J = 20.0Hz, 3H)，0.78(d J = 20.0Hz，3H)，0.73(d J = 20.0Hz，3H).
[0056] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)S211.19(s),208.87(s),169.79(s),160.85(s),143.24 (s)，131.74(s)，127.50(s)，85.69(s)，82.13(s)，66.71(s)，65.84(s)，56.87(s)，55.80 (s),53.19(s),52.44(s),51.64(s),45.51(s),40.38(s),39.22(s),38.30(s),38.05(s), 34.77(s),33.28(s),29.56(s),28.72(s),26.45(s),25.21(s),23.79(s),22.05(s),20.77 (s)，20.30(s)，19.76(s)，18.41(s)，17.85(s)，14.81(s).
[0057] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C4抽69Ci4N2〇6:839.3880;found:839.3881。
[0059] 實施例6組合物抗紅細胞低下性貧血實驗
[0060] 實驗1組合物對失血小鼠的治療作用
[0061 ] ICR小鼠30只，罕方各半，均分成5組(n = 10)。除生理鹽水組外，其它組每只小鼠從 眼眶靜脈放血0.5ml，2地后再取血測全部各組指標，然后連續(xù)灌胃給藥1周且給藥之后每天 放血0.5ml，末次給藥化后，從眼眶靜脈叢取血用F-800全血小板分析儀進行紅細胞計數(shù) (10口/1)。
[0062] 組合物的制備:將研磨之后過200目網(wǎng)的5mg化合物III的粉末和研磨之后過200目 網(wǎng)的95mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用滿輪攬拌儀混合即得到IOOmg組合物，使 用時用水溶解運1 OOmg的組合物即得到組合物的溶液。
[0063] 表1組合物對因失血所致紅細胞減少的治療作用
[00化]與模型組比較:卸<0.05
[0066] 結(jié)果表明，放血小鼠經(jīng)服用組合物治療7天后，與模型組比較，其紅細胞顯著高于 模型組，接近生理鹽水組。而化合物HI和化合物IV無此作用。
[0067] 二、組合物對環(huán)憐酷胺致紅細胞減少的治療作用
[006引對小鼠骨髓造血功能損傷的防治作用ICR小鼠50只，罕(:^用，均分成5組(n=10)， 即生理鹽水組、造模組、組合物1.2mg/kg組、化合物III 1.2mg/kg組和化合物IV 1.2mg/kg 組，口服給藥，每天1次。第0、5、10日除生理鹽水組外，其它各組小鼠分別腹腔注射環(huán)憐酸胺 80mg/kg，然后繼續(xù)給藥3天。于末次給藥后化，從眼眶靜脈叢取血，測紅細胞數(shù)(l0i^L)。 [0069]表2組合物對環(huán)憐酷胺所致紅細胞的影響
[0070]
[0071] 與模型組比較:**p<0.01
[0072] 結(jié)果表明，與生理鹽水組比較，環(huán)憐酸胺能使小鼠骨髓損傷，造成外周血細胞下 降，組合物組與模型組比較，可明顯對抗環(huán)憐酸胺所致小鼠紅細胞下降。而化合物III和化 合物IV無此作用。
[0073] =、組合物對苯所致紅細胞減少的治療作用
[0074] 對再生障礙性貧血小鼠的影響：昆明種小鼠50只，罕嫌用，均分成5組(n = 10)，除 生理鹽水組外，其它組小鼠皮下注射苯〇.5ml/kg，連續(xù)12天，造模的當日，同時口服給藥，每 天1次，共18天，末次給藥后化，眼眶靜脈叢取血，測紅細胞。
[0075] 表3組合物對苯所致紅細胞減少的治療作用
[0077] 與模型組比較:**p<0.01
[0078] 結(jié)果表明，組合物組與模型組比較，可明顯對抗苯所致再生障礙性貧血小鼠紅細 胞的下降。而化合物HI和化合物IV無此作用。
[0079] 結(jié)論:組合物能夠顯著升高紅細胞，可W用來制備治療貧血的藥物。而化合物III 和化合物IV不能夠顯著升高紅細胞，不能用來制備治療貧血的藥物。
[0080] 實施例7本發(fā)明所設(shè)及組合物片劑的制備
[0081] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機制成100片。
[0082] 實施例8本發(fā)明所設(shè)及組合物膠囊的制備
[0083] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物HI和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為5%和95%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分數(shù)分別為5%和95%充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在治療紅細胞低下性貧血藥物中的應用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療紅細胞低下性貧血藥物中的應用，其特征為:所述 紅細胞低下性貧血是由失血所引起的。5. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療紅細胞低下性貧血藥物中的應用，其特征為:所述 紅細胞低下性貧血是由化學物質(zhì)所引起的紅細胞低下。6. 如權(quán)利要求5所述的組合物在治療紅細胞低下性貧血藥物中的應用，其特征為:所述 化學物質(zhì)為苯，所述紅細胞低下性貧血是由苯所致的再生障礙性貧血。7.如權(quán)利要求5所述的組合物在治療紅細胞低下性貧血藥物中的應用，其特征為:所述 化學物質(zhì)為環(huán)憐酸胺，所述紅細胞低下性貧血是由環(huán)憐酸胺所致紅細胞下降。
【專利摘要】本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其在制備抗紅細胞低下性貧血藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有抗紅細胞低下性貧血的作用，具有開發(fā)抗紅細胞低下性貧血藥物的價值。
【IPC分類】A61K31/201, A61P7/06, A61K31/5377
【公開號】CN105497038
【申請?zhí)枴緾N201511010016
【發(fā)明人】吳俊華, 周未末
【申請人】南京大學
【公開日】2016年4月20日
【申請日】2015年12月29日