聲時間15min，得到塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液。
[0041] 將本實施例制備的塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液加去離子水20倍稀釋后，用馬 爾文激光粒度儀測定其粒徑為118.7nm，結果如表1所示。
[0042] 將本實施例制備的塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液在轉速為1400化/min高速離屯、 30min，取上清液19祉L，加化L甲醇溶解，W紫外分光光度法測定塞來昔布的含量，結果如表 2所示，計算得到的本實施例的包封率為99.1%。
[0043] 實施例6 一種腦祀向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液，按照重量百分比的成分為：塞來昔布 0.55%，簇基化CdSeS/ZnS (Aem=525nm)量子點0.55%，二肉豆違酷憐脂酷膽堿3%，膽固醇 1.5%，憐酸二氨鋼-憐酸氨二鋼緩沖液94.4%。
[0044] 所述腦祀向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混血液的制備方法，按照W下工藝步驟進 行： (1) 室溫下將簇基化CdSeS/ZnS (Aem 525nm)量子點、1-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳 二亞胺、N-徑基班巧酷亞胺與去離子水超聲至溶解； (2) 加入塞來昔布在溫度為35~40° C的條件下攬拌反應化，反應完成后降溫至0~5° C過 夜； (3) 離屯、出沉淀，將沉淀用去離子水清洗、離屯、S次后，其中離屯、條件為：轉速 1500化pm，時間30min，35~40° C干燥得到塞來昔布-量子點復合物，； (4) 將塞來昔布-量子點復合物、二肉豆違酷憐脂酷膽堿和膽固醇溶于丙酬中，減壓蒸 除有機溶劑，得到脂質(zhì)膜； 巧)將憐酸二氨鋼-憐酸氨二鋼緩沖液預熱至60°C，加入到脂質(zhì)膜中，保溫水化60min， 得到脂質(zhì)體初乳； (6)采用薄膜超聲分散法將脂質(zhì)體初乳分散，其中分散過程的工藝條件為:溫度0~5°C， 功率70%，每工作5s間隔5s，總超聲時間20min，得到塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液。
[0045] 將本實施例制備的塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液加去離子水20倍稀釋后，用馬 爾文激光粒度儀測定其粒徑為427.8nm，結果如表1所示。
[0046] 將本實施例制備的塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液在轉速為1400化/min高速離屯、 30min，取上清液19祉L，加化L甲醇溶解，W紫外分光光度法測定塞來昔布的含量，結果如表 2所示，計算得到的本實施例的包封率為98.3%。 表1實施例^6所制備的塞來昔布量子點脂質(zhì)體的粒徑結果
表2實施例^6所制備的塞來昔布量子點脂質(zhì)體的包封率結果
塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液的動物模型試驗 1、本發(fā)明的塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液在小鼠腦部分布情況 將10只野生小鼠鼻飼50yg/kg塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液，24h后再鼻飼一次，24h 后用C〇2處死，采用0.9%生理鹽水屯、臟灌流，取小鼠的嗅球，腦部（包括大腦，小腦，延髓）W 及脊髓于4%多聚甲醒中固定4化后，換30%薦糖沉糖4她，于OTC包埋，冰凍切片（10皿），共聚 焦顯微鏡觀察，結果如圖4中的A圖和B圖所示，在小鼠的嗅球，大腦(前，中，后部），小腦，延 髓，脊髓均可看見塞來昔布-量子點脂質(zhì)體的巧光，說明鼻飼后，本發(fā)明的脂質(zhì)體廣泛分布 于小鼠的腦各部分，且在脊髓也有分布。
[0047] 2、本發(fā)明的塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液在小鼠各組織的分布情況 實驗動物模型為48只野生小鼠，將它們隨機分為2組(每組24只），第一組鼻飼50yg/kg 塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液，第二組鼻飼50]ig/kg塞來昔布溶液，分別于IOmin，30min， 化，化，5h，化，1化，24h取小鼠的全血，腦部（包括海馬和皮層）W及屯、，肝，脾，肺，腎，采用 HPLC-MS檢測，結果如圖4的C圖所示，塞來昔布脂質(zhì)體混懸劑在小鼠的全血，腦部(包括海馬 和皮層）W及屯、，肝，脾，肺，腎各組織中的塞來昔布的濃度，在各時刻均比塞來昔布溶液組 的濃度高，說明本發(fā)明的塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液能明顯提高藥物在各組織中，尤其 是腦組織中的濃度;此外采用免疫組化方法，WAPP/PS1轉基因小鼠（阿爾茨海默癥的模型 小鼠）為動物模型，還觀察到第一組小鼠（鼻飼50yg/kg塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液）的 腦部海馬和皮層的老年斑沉積明顯減少，第二組小鼠（鼻飼50yg/kg塞來昔布溶液)海馬和 皮層的老年斑沉積出現(xiàn)較輕微減少，而第=組鼻飼扣L生理鹽水的小鼠完全沒有變化，進一 步證明了本發(fā)明有望開發(fā)成腦祀向的制劑，應用于阿爾茨海默癥的治療。
【主權項】
1. 一種腦靶向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液，其特征在于按照重量百分比的成分 為：塞來昔布0.055~0.55%，量子點0.1~0.55%，磷脂1~3%，膽固醇0.2~1.5%，緩沖液90~ 98% 〇2. 根據(jù)權利要求1所述的一種腦靶向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液，其特征在于所 述量子點為羧基化CdSeS/ZnS，Aem=490~665nm。3. 根據(jù)權利要求1所述的一種腦靶向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液，其特征在于所 述磷脂可選用天然磷脂和/或合成磷脂，所述天然磷脂選自蛋黃卵磷脂、氫化蛋黃磷脂、蛋 黃磷脂酰甘油、蛋黃磷脂酰絲氨酸、蛋黃磷脂酰肌醇、大豆卵磷脂、氫化大豆磷脂、大豆磷 脂酰甘油、大豆磷脂酰絲氨酸、大豆磷脂酰肌醇中的一種或幾種;所述合成磷脂選自二油酰 磷脂酰膽堿、二硬脂酸磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二月桂 酰磷脂酰膽堿、二油釀磷脂酰甘油、二硬脂酸磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻 酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油中的一種或幾種。4. 根據(jù)權利要求1所述的一種腦靶向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液，其特征在于所 述緩沖液選自pH值為6.0~6.5的磷酸鹽緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩 沖液、醋酸鹽緩沖液中的一種或幾種。5. 權利要求1所述的一種腦靶向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液的制備方法，其特征 在于按照以下工藝步驟進行： (1) 室溫下將量子點、1-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺與去 離子水超聲至溶解； (2) 加入塞來昔布攪拌反應，反應完成后降溫至0~5° C過夜； (3 )離心出沉淀，將沉淀用去離子水清洗、離心三次后，干燥得到塞來昔布-量子點復合 物； (4) 將塞來昔布-量子點復合物、磷脂和膽固醇溶于有機溶劑中，蒸除有機溶劑，得到脂 質(zhì)膜； (5) 將緩沖液預熱至50~60°C，加入到脂質(zhì)膜中，保溫水化10~60min，得到脂質(zhì)體初乳； (6) 將脂質(zhì)體初乳分散，得到塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液。6. 根據(jù)權利要求5所述的一種腦靶向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液的制備方法，其 特征在于所述步驟(2)的反應條件為:溫度35~40° C，反應時間1~6h。7. 根據(jù)權利要求5所述的一種腦靶向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液的制備方法，其 特征在于所述步驟(3)的離心條件為:轉速13000~15000rpm，時間5~30min。8. 根據(jù)權利要求5所述的一種腦靶向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液的制備方法，其 特征在于所述步驟(3)的干燥條件為:溫度35~40°C。9. 根據(jù)權利要求5所述的一種腦靶向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液的制備方法，其 特征在于所述步驟(4)的有機溶劑選自氯仿、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、異丙醇、丙酮、乙 醚、苯甲醇、正己烷中的一種或幾種。
【專利摘要】一種腦靶向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液及其制備方法，所述塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液按照重量百分比的成分為：塞來昔布0.055~0.55%，量子點0.1~0.55%，磷脂1~3%，膽固醇0.2~1.5%，緩沖液90~98%。制備方法為：將量子點、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺與去離子水超聲至溶解；加入塞來昔布反應，反應完成后降溫過夜；分離沉淀，干燥得到塞來昔布-量子點復合物；將塞來昔布-量子點復合物、磷脂和膽固醇溶于有機溶劑中，蒸除有機溶劑得到脂質(zhì)膜；將緩沖液預熱，加入到脂質(zhì)膜中，保溫水化，得到脂質(zhì)體初乳；將脂質(zhì)體初乳分散，得到塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液。
【IPC分類】A61K49/00, A61K31/635, A61K9/127, A61P25/28, A61K47/02
【公開號】CN105534910
【申請?zhí)枴緾N201610075634
【發(fā)明人】王璞, 郭靜文, 關佩沛, 王占友
【申請人】東北大學
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2016年2月3日