°C保溫lOmin，用0.22μπι陶瓷膜過濾I次，得濾液m，再將濾液m上SEPHADEX G-15柱分離收集洗脫液，并濃縮洗脫液至原有體積的1/15?1/25，再上硅膠柱分離收集白及多糖成分濃縮至干，獲得白及多糖。
[0040]在一個實施方案中，步驟(I)中所述淀粉酶水溶液的體積(L)與白及重量(kg)比為8?20:1;淀粉酶由津市市新型發(fā)酵有限責(zé)任公司提供，也可以從市場上購買，淀粉酶使用終濃度為2U以上(其中U是指國際酶活力單位)。
[0041]在一個實施方案中，步驟(2)中所述一定體積是指原有體積的1/10?1/20。
[0042]在一個實施方案中，步驟(2)中所述中性蛋白酶溶液的體積(L)與濾渣Π重量(kg)比為I?3:1;南寧東恒華道生物科技有限責(zé)任公司提供，也可以從市場上購買，中性蛋白酶使用終濃度為5U以上(U是指國際酶活力單位)。所用淀粉酶只能水解葡萄糖與葡萄糖連接的糖苷鍵。
[0043]在一個實施方案中，步驟(2)中所述過濾:膜孔徑為0.22μπι的陶瓷膜過濾一次。
[0044]在一個實施方案中，步驟(2)中用水作為洗脫液，分別進行洗脫SEPHADEX G_10柱和硅膠柱；用3BV?5BV的水進行洗脫柱子，BV是指柱體積。
[0045]技術(shù)效果
[0046]1、本發(fā)明所述的白及多糖水溶性好，易吸收，具有多方面的調(diào)理作用，副作用小，有明顯抑菌效果、止血效果快。
[0047]2、由于淀粉酶只能水解葡萄糖之間形成的糖苷鍵，利用淀粉酶可對白及中淀粉進行水解，防止淀粉在高溫水溶液中轉(zhuǎn)變成糊精，不利于白及多糖快速釋放到水相中，也利于后期提取分尚，有效地提尚白及多糖的廣量。
[0048]3、該止血抑菌材料比現(xiàn)有材料的止血修復(fù)皮膚能力更強，安全性更好。
[0049]4、與CN103665400A中介紹方法相比較，本發(fā)明材料添加透明質(zhì)酸，能更利于皮膚吸收，與凝膠并未化學(xué)結(jié)合，同時減少白及中酚菲類物質(zhì)的影響，作為美容基材更便宜于添加至其它美容產(chǎn)品應(yīng)用中。
【具體實施方式】
[0050]下面，本發(fā)明將用實施例進行進一步的說明，但是它并不限于這些實施例的任一個或類似實例。
[0051 ]實施例1:白及多糖的制備方法
[0052 ]粉碎干燥白及I OOkg，加入1100L的淀粉酶水溶液，使淀粉酶的終濃度為3U以上，40°(:保溫處理6小時，得水解混合液;再加熱至70°C進行回流提取150min，經(jīng)0.22μπι陶瓷膜過濾I次，得濾液I和濾渣I;將濾液I在50?60 °C減壓濃縮至原有體積的I/15，再加入95 %乙醇至終濃度達到80%以上，醇沉15h，進行過濾，得濾液Π和濾渣Π，濾液Π進行濃縮結(jié)晶得葡萄糖；向濾渣Π中加入中性胰蛋白酶溶液，使中性蛋白酶的終濃度為5U以上，水解30min后，80?90°C保溫lOmin，用0.22μπι陶瓷膜過濾I次，得濾液ΙΠ，再將濾液ΙΠ上SEPHADEX G-15柱分離，用3BV?5BV的水作為洗脫液，收集含多糖成分的洗脫液，并濃縮洗脫液至原有體積的1/20，再上硅膠柱分離，用3BV?5BV的水作為洗脫液，收集白及多糖成分濃縮至干，獲得976g白及多糖。經(jīng)蒽酮一濃硫酸法測定多糖含量為99.88%。
[0053]實施例2:止血抑菌材料的制備方法
[0054]稱取精制白及多糖24克，加入100克的水，加入6克丙烯酸攪拌混合30min后，得混合物10mL左右。再向混合物中加入10 %過硫酸銨30yL和TEMED20yL，快速混合后室溫下放置2小時，再加入200mL的水?dāng)嚢韬?000rpm離心，去上清液，重復(fù)一次，得沉淀VI。將沉淀VI放置在真空干燥機中室溫進行緩慢干燥得干燥物，即為白及凝膠27克。
[0055]實施例3:止血抑菌材料的制備方法
[0056]稱取精制白及多糖30克，加入150克的水，加入7克丙烯酸攪拌混合20min后，得混合物150mL左右。再向混合物中加入10 %過硫酸銨50yL和TEMED40yL，快速混合后室溫下放置2小時，再加入250mL的水?dāng)嚢韬?000rpm離心，去上清液，重復(fù)一次，得沉淀VI。將沉淀VI放置在真空干燥機中室溫進行緩慢干燥得干燥物，即為白及凝膠35克。
【主權(quán)項】
1.一種止血生肌藥物，由各原料成份以以下重量份組成:白及水溶性多糖4?10份、殼聚糖I?3份、乳酸0.4?1.5份、紫珠草提取物I?2份混合后冷凍至干，其中所述紫珠草提取物由紫珠草3?6份、七葉一枝花2?5份、仙鶴草2?5份，其余為90 %乙醇水溶液，冷浸提90-180min，經(jīng)0.22um陶瓷膜過濾I次，將濾液減壓濃縮至干。2.權(quán)利要求1的止血生肌藥物，其中各原料成份以以下重量份組成:白及水溶性多糖4?8份、殼聚糖I?2份、乳酸0.5?0.7份、紫珠草提取物I?2份混合后冷凍至干，其中所述紫珠草提取物由紫珠草3?5份、七葉一枝花2?4份、仙鶴草2?4份，其余為90%乙醇水溶液，冷浸提90_180min，經(jīng)0.22um陶瓷膜過濾I次，將濾液減壓濃縮至干。3.權(quán)利要求1的止血生肌藥物，其中各原料成份以以下重量份組成:白及水溶性多糖5份、殼聚糖I份、乳酸0.6份、紫珠草提取物I份混合后冷凍至干，其中所述紫珠草提取物由紫珠草4份、七葉一枝花3份、仙鶴草3份，其余為90 %乙醇水溶液，冷浸提90-180min，經(jīng)0.22um陶瓷膜過濾I次，將濾液減壓濃縮至干。4.權(quán)利要求1-3的白及水溶性多糖的制備方法，其具體步驟包括: (1)白及水溶性多糖提取:粉碎干燥白及，加入淀粉酶水溶液，使淀粉酶終濃度為2U以上，40 °(:保溫處理3-7小時，加熱至60-80 °C進行回流提取90-180min，經(jīng)0.22um陶瓷膜過濾I次，得濾液I和濾渣I; (2)白及水溶性多I糖純化:將濾液I在50?60°C減壓濃縮至一定體積，再加入乙醇至終濃度達到80%以上，醇沉10?20h，進行過濾，得濾液Π和濾渣Π，濾液Π進行濃縮結(jié)晶得葡萄糖，向濾渣Π中加入中性蛋白酶，水解10?40min后，80?90°C保溫lOmin，用0.22μπι陶瓷膜過濾I次，得濾液m，再將濾液m上SEPHADEX G-15柱分離收集洗脫液，并濃縮洗脫液至原有體積的1/15?1/25，再上硅膠柱分離收集白及水溶性多糖成分濃縮至干，獲得白及水溶性多糖。5.權(quán)利要求4的方法，步驟(I)中所述淀粉酶水溶液的體積L與白及重量kg比為8-20:1。6.權(quán)利要求4的方法，步驟(2)中所述一定體積是指原有體積的1/10-1/20。7.權(quán)利要求4的方法，步驟(2)中所述中性蛋白酶溶液的體積L與濾渣Π重量kg比為1-3:1。8.權(quán)利要求4的方法，步驟(2)中用水作為洗脫液，分別進行洗脫SEPHADEXG-1O柱和硅膠柱。9.權(quán)利要求1-8的方法，通過上述方法所制備的產(chǎn)品直接用于各種傷口的表面止血材料中，直接用于化妝品中保水材料和除皺方面的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種止血抑菌合成材料及其制備方法，干燥過后的白及經(jīng)用蒸餾水熱提取、加入中性蛋白酶水解蛋白、過濾、減壓濃縮，然后用柱吸附、將洗脫液濃縮，減壓濃縮，制得白及水溶性多糖純品，其多糖含量在99％以上。取精制白及多糖加入水，加入丙烯酸攪拌混合，向其中加入10％過硫酸銨和TEMED，快速混合后室溫下放置1～3小時，再加入水沖洗，最后將沉淀放置在真空干燥機中室溫下進行緩慢干燥得干燥物至干。
【IPC分類】A61K36/898, A61K8/97, C08B37/00, A61K8/365, A61K36/85, A61L24/08, A61K31/19, A61K36/896, A61P7/04, A61Q19/00, A61K8/73, A61K31/715, A61Q19/08, A61K31/722
【公開號】CN105582316
【申請?zhí)枴緾N201610081059
【發(fā)明人】向華, 唐克華, 唐忠海
【申請人】張家界本草科技有限公司
【公開日】2016年5月18日
【申請日】2016年2月4日